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《褪黑素對水牛卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎體外發(fā)育的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文褪黑素對水牛卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎體外發(fā)育的影響姓名：羅茜申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：動物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師：陸陽清；盧克煥201206褪黑素對水牛卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎體外發(fā)育的影響摘要活性氧基I歪I(ROS)被認(rèn)為是不利于卵母細(xì)胞體外成熟和胚胎體外發(fā)育的因素。在體外培養(yǎng)條件下，胚胎遇到比體內(nèi)更多的氧化因子。褪黑素可以提高卵母細(xì)胞質(zhì)量，使卵母細(xì)胞免于氧化危害。褪黑素和其代謝物組成了清除ROS的高效的級聯(lián)反應(yīng)，褪黑素有別于其他的抗氧化劑就是因為這個特性。本研究探討在水牛卵母細(xì)胞體外成熟液和胚胎培養(yǎng)液中添加褪黑素對卵母細(xì)胞體外成熟和胚胎發(fā)育的
2、影響。試驗一，在水牛卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)液中，分別添加三種濃度的褪黑素，即10。omol／L，10一mol／L，10一mol／L，不添加為對照組。目的在于探討添加不同濃度褪黑素的成熟液水牛卵母細(xì)胞的成熟情況。IVmol／L24h后，以第一極體的排出作為成熟標(biāo)準(zhǔn)。試驗結(jié)果表明，10。9m01]L試驗組成熟率與其他試驗組相比，差異不顯著(46．28+1．74％VS43．15士5．24％，43．40+3．12％，P>0．05)，但顯著高于對照組(46．28+1．74％VS32．90+2．21％，P<0．05)。試驗二，僅在胚胎培養(yǎng)液中添加褪黑素情況下，10培mol／
3、L組分裂率與其他組相比，差異不顯著(59．6％VS53．6％，49．5％，48．O％，P>0．05)，然而，其囊胚率顯著高于對照組(34．3％VS20．6％，P<0．05)。根據(jù)試驗一結(jié)果，在成熟培養(yǎng)階段添加最優(yōu)濃度(10粵mol／L)褪黑素的同時，在胚胎培養(yǎng)液中也添加不同濃度的褪黑素(10—mol／L，10。9mol／L，10。10mol／L，0mol／L)。結(jié)果表明，10。9mol／L組分裂率與其他組相比無顯著差異(70．0％VS64．8％，65．2％，60．9％，P>0．05)，囊胚率與其他試驗組相比也沒有顯著差異(28．9％VS15．4％，26．1％，
4、25．3％，P>0．05)，但顯著高于對照組(28．9％VS15．4％，P<0．05)。試驗三，在水牛卵母細(xì)胞成熟培養(yǎng)液中分為添加褪黑素(試驗組)和不加褪黑素(對照組)，IVM24h后，通過DCHFDA熒光染色方法測定水牛卵母細(xì)胞中的ROS含量。結(jié)果表明，與對照組的熒光強(qiáng)度相比，褪黑素處理組的ROS水平顯著低于對照組。試驗四，通過實時定量PCR測定線粒體拷貝數(shù)。在水牛卵母細(xì)胞成熟液中添加10’9mol／L褪黑素和不加褪黑素，IVM24h。試驗組和對照組的拷貝數(shù)沒有差別。這說明褪黑素對線粒體拷貝數(shù)沒有影響。本研究結(jié)果表明，褪黑素可以提高水牛卵母細(xì)胞體外成熟率和早
5、期胚胎體外發(fā)育率，同時還參與清除活性氧的過程。關(guān)鍵詞：褪黑素水牛卵母細(xì)胞活性氧基團(tuán)線粒體EffectofmelatoninonbuffalooocytematurationandtheirsubsequentembryodevelopmentinvitroABSTRACTThereactiveoxygenspecies(ROS)wereconsideredasaggressivemoleculesagainstoocytematurationandembryodevelopmentinvitro．Embryosculturedinvitroencountere
6、dhigheroxygentoxicityelicitedbyROSthantheirinvivocounterparts．Melatonincouldimproveoocytequalityandprotectsoocytefromoxidativestress．TheprocessofmelatoninanditsmetabolitessuccessivelyscavengingROSisreferredasthefreeradicalscavengingcascade．Melatonindiffersfromotherconventionalantiox
7、idantsbecausethecascadereactionisanovelproperty．Mitochondriaareanimportanttargetofmelatonin．Thisstudywascarriedouttoinvestigatetheeffectofdifferentconcentrationsofmelatoninsupplementedinvitromaturationandcultl】remediaonbuffalooocytematurationandembUodevelopmentinvitroInexperiment1，i
8、mmatureoocyteswerec
