紫扇貝線粒體dna的初步研究

紫扇貝線粒體dna的初步研究

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1、DNAofArgopectenpurpuratusQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyFengWei(DepartmentofAnimalScienceandVeterinaty)Suu"砌ngChundeSuDervJsor:eWaQingdao.ChinaJune,2012獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的

2、地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。研究生簽名:葬弗時間:文口I≥年6月7細(xì)關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤,允許論文被查閱和借閱,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。(保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)

3、遵守此協(xié)議)研究生簽名:導(dǎo)師簽名:時間:>們>年6月1自時間:o峪年鄉(xiāng)月a伊干№捌旒青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要紫扇貝線粒體+DNA韻初步研究摘要本實驗以引進的紫扇貝和海灣扇貝為親本,建立了紫扇貝自交組合(ZZ)、海灣扇貝自交組合(HID、紫扇貝×海灣扇貝(ZH)和海灣扇貝×紫扇貝餌勱共4個實驗組合。對紫扇貝j海灣扇貝及其雜交后代的線粒體進行研究。通過對紫扇貝12SrRNA、16SrRNA和COI片段的擴增測序,得到的線粒體片段分別為910bp、990bp和1504bp.與lO種扇貝建立進化樹,結(jié)果表明紫扇貝與海灣扇貝的親緣關(guān)系較近

4、。應(yīng)用引物COIl=和COIR對紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線粒體DNA進行PCR擴增,獲得660bp長度的COI基因片段,應(yīng)用引物Z001F/Z001R對紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線粒體12S片段進行PCR擴增,獲得544bp長度的12S基因片段。經(jīng)過比對性腺與體細(xì)胞的COI和12S片段,發(fā)現(xiàn)性腺與體細(xì)胞COI基因及12S基因均為一個單倍型,即體內(nèi)只有一種線粒體DNA類型,沒有發(fā)現(xiàn)雙單性遺傳現(xiàn)象,雌、雄性腺的COI基因和12S基因片段變異率很低(0.45%和0.74%)。根據(jù)序列的差異設(shè)計各自的選擇性引物:H001FPH001R.Z002F/Z

5、002R,前者在海灣扇貝中擴增出521bp片段,后者在紫扇貝中擴增出362bp的片段。同樣可以用于雜交扇貝的鑒定。應(yīng)用引物COIF和COIR對紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線粒體DNA進行PCR擴增,獲得660bp長度的COI基因片段,應(yīng)用引物Z001F/Z001R對紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線粒體12S片段進行PCR擴增,獲得544bp長度的12S基因片段。經(jīng)過比對性腺與體細(xì)胞的COI和12S片段,發(fā)現(xiàn)性腺與體細(xì)胞COI基因及12S基因均為一個單倍型,即體內(nèi)只有一種線粒體DNA類型,沒有發(fā)現(xiàn)雙單性遺傳現(xiàn)象,雌、雄性腺的COI基因和12S基因片段變

6、異率很低(0.45%和0.74%)。根據(jù)序列的差異設(shè)計各自的選擇性引物:H001F/H001R,Z002F/Z002R,前者在海灣扇貝中擴增出521bp片段,后者在紫扇貝中擴增出362bp的片段。同樣可以用于雜交扇貝的鑒定。關(guān)鍵詞:紫扇貝;海灣扇貝;線粒體基因;雜交鑒定;雙單性遺傳青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstraetPrimaryStudy+onMitochondrial、DNAofAbstractThisexperimentfoucusontheimportedArgopectenpuratusandArgopectenirr

7、adians,launchaserialresearchontheirhybridizationgeneration.Twointer-specifichybrid.families(HZandZH)andtwoinbredfamilieswereconstructedusingthePeruvianscallop,Argopectenpurpuratusandthebayscallop,Argopecten·irradians.16SrRNAgene。fragmentsareamplifiedbyPCRrespectivelyfr

8、omArgopectenpurpuratusandArgopectenirradians.Comparingthesetwosequences,wedesignedthreepairsofselectiveprimersforthei

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