鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導的成骨細胞與phbhhx復合培養(yǎng)

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1、《中國圖書資料分類法》單位代碼10660分類號：R783.1學號：S090487貴陽醫(yī)學院2012屆碩士學位論文鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導的成骨細胞與PHBHHx復合培養(yǎng)研究生：周祥文導師：王永教授年級：2009級專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學2012年5月7日貴陽醫(yī)學院2012屆碩士研究生論文貴陽醫(yī)學院2012屆碩士學位論文鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導的成骨細胞與PHBHHx復合培養(yǎng)研究生：周祥文導師：王永教授年級：2009級專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學本課題受以下基金資助貴州省科學技術(shù)基金黔科合J字[2010]2177號2貴陽醫(yī)學院2012屆碩士研究生論文目錄摘要??????????????4前言????????

2、??????5材料與方法????????????7結(jié)果??????????????12討論??????????????18結(jié)論??????????????21參考文獻?????????????22英文摘要?????????????24致謝??????????????25略縮詞表?????????????26論文原創(chuàng)性聲明??????????27附：綜述????????????283貴陽醫(yī)學院2012屆碩士研究生論文鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導的成骨細胞與PHBHHx復合培養(yǎng)專業(yè)：口腔修復學研究生：周祥文導師：王永教授【摘要】目的：探討SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs)誘導的成骨細胞與3-

3、羥基丁酸/3-羥基己酸共聚物（PHBHHx)支架材料的體外相容性，進一步驗證PHBHHx材料作為骨組織工程支架材料的可行性。方法：采用全骨髓貼壁篩選培養(yǎng)法分離成年SD大鼠BMSCs,經(jīng)誘導培養(yǎng)后，進行細胞形態(tài)學觀察，堿性磷酸酶活性及鈣結(jié)節(jié)的鑒定。將誘導的成骨細胞與PHBHHx支架材料在體外復合培養(yǎng)，通過掃描電鏡觀察細胞與材料的復合情況，用MTT法檢測材料對細胞黏附和增殖的影響。結(jié)果：成骨細胞可以在PHBHHx支架材料表面及孔隙中良好的黏附和增殖。結(jié)論：SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞誘導的成骨細胞與PHBHHx支架材料具有良好的體外相容性，PHBHHx是一種性能優(yōu)良的骨組織工程支架材料?！娟P(guān)鍵

4、詞】骨髓間充質(zhì)干細胞；成骨細胞；PHBHHx4貴陽醫(yī)學院2012屆碩士研究生論文前言口腔種植技術(shù)與傳統(tǒng)的修復方法相比，由于具有更接近于天然牙的功能和美學修復效果，在口腔臨床中的應(yīng)用越來越廣泛，目前已成為修復牙列缺損或缺失的主要方法之一。然而，許多牙列缺損或缺失的患者由于缺牙后的生理性吸收、外傷性缺損等因素造成牙槽骨骨量不足而無法接受口腔種植修復。目前采用的骨組織引導再生術(shù)只能修復較小的骨缺損；自體骨移植雖然安全可靠，無免疫排斥，但易造成取骨部位的繼發(fā)損傷，存在供骨區(qū)合并癥的可能；異體骨移植能修復較大骨缺損，但存在免疫排斥。如今骨組織工程（Bonetissueengineering)已被

5、認為[1]是修復大段骨缺損最有希望的方法。骨組織工程是將患者或供者的特定細胞（干細胞、祖細胞）置于體外支架材料上生長，形成一個三維結(jié)構(gòu)，然后移植到患者體內(nèi)。種子細胞，支架材料，生長因子作為組織工程的三要素，在構(gòu)建組織工程骨中有舉足輕重的作用。種子細胞包括自體細胞、同種異體細胞、干細胞。自體細胞雖然安全可靠，但數(shù)量有限，且易造成繼發(fā)損傷。同種異體細胞存在免疫排斥反應(yīng)。干細胞是一類具有自我復制能力的多潛能細胞，在一定條件下，它可以分化成多種功能的細胞。根據(jù)來源不同可分為：胚胎干細胞和成體干細胞。目前，已經(jīng)有大量的報道證實，幾乎所有的成熟組織中都存在相應(yīng)的成體干細胞，例如造血干細胞、脂肪間充

6、質(zhì)干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞等。由于成體干細胞不存在倫理學問題，且有著較好的多向分[2]化潛能，因而成為近幾年的研究熱點。骨髓間充質(zhì)干細胞（Bonemarrowmesenchymalstemcells,BMSCs)是來源于中胚層的具有高度自我更新能力和多向分化潛能的成體干細胞。由于取材容易、易分離、體外可大量擴增，不存在免疫排斥反應(yīng)、故已成為骨組織工程最常用的種子細胞之一?？晌罩Ъ懿牧鲜枪墙M織工程的載體，為種子細胞的粘附、遷移、增殖分化以及分泌細胞外基質(zhì)提供框架，作為屏障保護新生組織，防止周圍組織向新生組織滲透，從而利于新生組織的再生。按來源可分為天然支架材料和人工合成材料。前者有細胞

7、識別，利于種子細胞粘附，可自然降解的優(yōu)點，但因其有免疫排斥及批次間存在差異，臨床應(yīng)用較少。而后者具有統(tǒng)一性，并且可根據(jù)需要人工塑形，[3]故逐漸成為支架材料的主流。骨支架材料目前以聚乳酸、聚羥基乙酸及其共聚5貴陽醫(yī)學院2012屆碩士研究生論文物等為代表的高分子可吸收材料應(yīng)用最為廣泛。聚乳酸是美國食品藥品管理局許可的可進行臨床應(yīng)用的高聚物之一。但由于其在體內(nèi)降解生成乳酸，會造成局部PH降低，有可能引起局部的炎性反應(yīng)，同時由于降解速度太快導致材料力