xiap基因及蛋白在腺樣囊性癌細(xì)胞株中的表達(dá)及作用的研究

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1、目錄中文摘要?????????????????????????1英文摘要?????????????????????????·3研究論文XIAP基因及蛋白在腺樣囊性癌細(xì)胞株中的表達(dá)及作用的研究前言?????????????????????????????????·66日lJ吾?????????????????????????????????‘材料與方法??????????????????????7結(jié)果?????????????????????????????????·13附圖?????????????????????????·15附表??

2、??????????????????????????????21討論?????????????????????????????????·22結(jié)論?????????????????????????????????·25參考文獻(xiàn)???????????????????????”26綜述XIAP與腫瘤發(fā)生及發(fā)展關(guān)系的研究進(jìn)展?????????30致謝????????????????????????????????????41個(gè)人簡歷?????????????????????????42中文摘要XIAP基因及蛋白在腺樣囊性癌細(xì)胞株中的表達(dá)及作用的

3、研究摘要目的：本研究旨在探討XIAP基因及蛋白水平在腺樣囊性癌不同細(xì)胞株中的表達(dá)變化，及其對人腺樣囊性癌細(xì)胞凋亡的影響。方-法：l細(xì)胞傳代和鑒定選取人腺樣囊性癌肺高轉(zhuǎn)移潛能和低轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞株，細(xì)胞復(fù)蘇后傳代培養(yǎng)，利用倒置顯微鏡觀察不同細(xì)胞株的形態(tài)學(xué)差異，利用免疫組化染色(EMACEA)鑒定細(xì)胞株；2細(xì)胞周期分析、凋亡指數(shù)分析和XIAP蛋白表達(dá)檢測采用流式細(xì)胞術(shù)方法檢測培養(yǎng)12h、24h、36h、48h、60h、72h時(shí)間節(jié)點(diǎn)的細(xì)胞凋亡指數(shù)、細(xì)胞周期分布曲線，同時(shí)檢測XIAP蛋白在兩種細(xì)胞株中的表達(dá)情況。3采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT

4、-PCR)法檢測XIAPmRNA在兩種腺樣囊性癌細(xì)胞株中傳代培養(yǎng)12h、24h、36h、48h、60h、72h時(shí)間節(jié)點(diǎn)的表達(dá)差異，利用激光掃描后經(jīng)QuantityONE(BIO．RAD)軟件對目的基因進(jìn)行光密度相對定量分析比較。結(jié)果：1不同肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中均存在CEA、EMA的共同表達(dá)，同時(shí)證明兩種細(xì)胞株的傳代培養(yǎng)成功；高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中兩者的陽性細(xì)胞比率為84．33％_-1：6．77％和82．88％士5．26％，在低肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中的陽性細(xì)胞比率分別為88．84％+7．27％和80．840／o_-1=6．16％，兩種指標(biāo)在不同細(xì)胞株中的陽性

5、率比較差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>O．05)；高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株呈梭形排列，粘附性較差，隨傳代時(shí)間的延長，細(xì)胞異型性更加明顯、且梭形變較突出；低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株呈圓形或卵圓形，細(xì)胞粘附性強(qiáng)，體積較小，呈片狀分布，細(xì)胞異型性不明顯。2高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株的細(xì)胞凋亡指數(shù)在12．72h呈穩(wěn)定的低水平，平均11．4％_40．5％，6個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)的凋亡指數(shù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無明顯差別中文摘要(P>O．05)；低轉(zhuǎn)移組細(xì)胞凋亡指數(shù)在6個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)呈明顯的高水平，平均為36．5％士5．2％，且各個(gè)節(jié)點(diǎn)比較無明顯差別(尸>O．05)；低轉(zhuǎn)移組細(xì)胞凋亡指數(shù)高于高肺轉(zhuǎn)移組，兩組差別有統(tǒng)計(jì)

6、學(xué)意義(PO．05)；S期比率在高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株明顯高于低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株(P<0．05)。高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株XIAP蛋白的陽性表達(dá)率為48．4％-4-5．34％，低轉(zhuǎn)移組為24．60／硅4．12

7、％，高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株明顯高于低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0．05)；而在低轉(zhuǎn)移組細(xì)胞株中呈一致的低水平表達(dá)，6個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn)表達(dá)水平差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(尸>0．05)；兩種細(xì)胞株的mRNA表達(dá)水平間比較差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。結(jié)論：1不同轉(zhuǎn)移潛能的腺樣囊性癌細(xì)胞株在形態(tài)學(xué)方面存在一定的差異，高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株粘附性差，且梭形變明顯，這可能是造成其具

8、有不同轉(zhuǎn)移潛能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)；2高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株的凋亡指數(shù)高表達(dá)XIAP蛋白，且其凋亡明顯受到抑制，細(xì)胞周期S期比例明顯升高；低肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株凋亡無明顯影響；細(xì)胞周期的G期占明顯優(yōu)勢。3兩組細(xì)胞株都存在XIAPmR