omihtra2基因及蛋白在人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞株中的表達(dá)及作用的研究

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1、河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下，由本人獨立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗材料、原始數(shù)據(jù)、申報的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名痞荔Lf玨師簽章：衢鈞二級學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章：加侈年￥只孤B河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文

2、中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名：硅引睦導(dǎo)師簽章：薩弘緬加，弓年廠月；／日目錄mIlllIIIJllllIIIJ111111IIIIIIIIIIIillllIY2397892中文摘要??????????????????????????1英文摘要??????????????????????????3研究論文0mi／HtrA2基因及蛋白在人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞株中的表達(dá)及作用的研究前言??????????????????????????6月U吾???????????????????

3、???????材料與方法???????????????????????8結(jié)果??????????????????????????14附圖??????????????????????????l7附表??????????????????????????23討論????????????????????????·?··25結(jié)論????????????????????????一?·27參考文獻(xiàn)????????????????????????28綜述線粒體凋亡途徑及調(diào)控因子的研究進(jìn)展??????????31致謂}????????????????????????

4、????39個人簡歷??????????????????????????40中文摘要0mi／HtrA2基因及蛋白在人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞株中的表達(dá)及作用的研究摘要目的：本研究旨在探討Omi／HtrA2基因及蛋白水平在人涎腺腺樣囊性癌不同細(xì)胞株中的表達(dá)變化，及其對人腺樣囊性癌細(xì)胞凋亡的影響。方法：選取人涎腺腺樣囊性癌高肺轉(zhuǎn)移潛能和低肺轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞株。1、細(xì)胞傳代，利用倒置顯微鏡觀察不同細(xì)胞株的形態(tài)學(xué)差異，利用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測傳代細(xì)胞株中CEA、EMA在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)，證實傳代的成功；2、采用CMIAS真彩色病理圖像分析系統(tǒng)對兩種不同細(xì)胞株的細(xì)胞核、細(xì)

5、胞漿的面積、核漿比例、細(xì)胞周長、平均直徑、圓度、形狀因子等形態(tài)學(xué)指標(biāo)進(jìn)行檢測，統(tǒng)計分析，獲得脫落細(xì)胞形態(tài)學(xué)原始數(shù)據(jù)，進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)的對比研究。3、采用流式細(xì)胞術(shù)方法檢測培養(yǎng)12h、24h、36h、48h、60h、72h時間節(jié)點Omi／HtrA2蛋白在兩種細(xì)胞株中的表達(dá)情況以及細(xì)胞周期分布差異。4、采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT．PCR)法檢測Omi／HtrA2mRNA在兩種腺樣囊性癌細(xì)胞株中傳代培養(yǎng)12h、24h、36h、48h、60h、72h時間節(jié)點的表達(dá)差異。結(jié)果：1傳代培養(yǎng)后經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)檢測CEA、EMA的表達(dá)情況，結(jié)果在高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中的

6、陽性細(xì)胞比率為84．33％+6．77％矛1182．88％+5．26％，在低肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株中的陽性細(xì)胞比率分別為88．84％+7．27％和80．840／'硅6．16％，兩種指標(biāo)在不同細(xì)胞株中的陽性率比較差別無統(tǒng)計學(xué)意義(尸>O．05)。同時證明兩種細(xì)胞株的傳代培養(yǎng)成功。2高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株呈梭形排列，粘附性較差，隨傳代時間的延長，細(xì)胞異型性更加明顯、且梭形變較突出；低肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株呈圓形或卵圓形，細(xì)胞粘附性較前者略好，體積較小，細(xì)胞異型性不明顯；通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)圖像分析系統(tǒng)對兩組細(xì)胞株進(jìn)行形態(tài)學(xué)分析，結(jié)果顯示兩種細(xì)胞株在細(xì)胞面積、周長、等效直徑、長徑、短徑間存

7、在明顯差異，高肺轉(zhuǎn)移組明顯高于低肺轉(zhuǎn)移組，差別有統(tǒng)計學(xué)意義(p

8、7．4％士4．25％；統(tǒng)計分析顯示：高肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株G1期比率明顯低于低肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞株(尸