microrna-2抑制肺癌細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)作用研究

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1、同等學(xué)力申請(qǐng)博士學(xué)位學(xué)校代碼:10023學(xué)號(hào):ZB2009001MicroRNA-2抑制肺癌細(xì)胞增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移的生物學(xué)作用研究BiologicalFunctionandMolecularMechanismofMicroRNA-2inInhibitingLungCancerCellProliferation,InvasionandMigration院所:腫瘤研究所姓名:沈捷指導(dǎo)教師:王綠化教授中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院放療科導(dǎo)師小組:詹啟敏研究員中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院/腫瘤研究所分子腫瘤學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室張福泉教授中

2、國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院放療科宋詠梅副研究員中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤醫(yī)院/腫瘤研究所分子腫瘤學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室學(xué)科專業(yè):腫瘤學(xué)研究方向:腫瘤放射治療學(xué)二。一二年四月北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文目錄目錄目錄??????????????????????????.?????????????1圖表索引??????????????????????????????????2縮略語(yǔ)表??????????????????????????????????????4第一部分???????????????????????????

3、??????.6中文摘要???????????????????。英文摘要??????????前言???????????????????????.材料與方法??????????????????實(shí)驗(yàn)結(jié)果?????????????????????????????。42討論??????????????????????????????????????。63小結(jié)??????????????????????????????????????。72參考文獻(xiàn)?????????????????????????????????73基金

4、資助???????????????????????????????..78第二部分?????????????????????????????..79文獻(xiàn)綜述?????????????????????????????????92發(fā)表論文???????????????????????????????103j!改謝??????????????????????????????????????104學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明???????????????????????。106北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院博士學(xué)位論文圖表索弓圖表

5、索引圖1.MiRNA的合成過(guò)程以及如何發(fā)揮生物學(xué)功能圖2.MiRNA種子序列對(duì)靶mRNAYUTR的miRNA調(diào)控元件的調(diào)控????.12圖3.MiRNA的發(fā)揮生物學(xué)功能的其他作用機(jī)制????????.圖4.MiR.2的realtimePCR過(guò)程以及反應(yīng)產(chǎn)物??????一???????一32圖5.各肺癌細(xì)胞系miR-2表達(dá)水平以及瞬轉(zhuǎn)miR-2后表達(dá)的DNA電泳圖??.42圖6.各肺癌細(xì)胞系中miR-2表達(dá)水平以及瞬轉(zhuǎn)miR-2后miR-2的表達(dá)水平?-_43圖7.各肺癌細(xì)胞系中瞬轉(zhuǎn)miR-2后各個(gè)細(xì)胞系的增殖曲

6、線_43圖8.NCI.H520,A549以及Anip973瞬轉(zhuǎn)miR-2后遷移以及粘附能力????一.44圖9.NCI.H520,A549以及Anip973瞬轉(zhuǎn)miR.2后遷移以及粘附能力的比較?一45圖10.NCI—H446瞬時(shí)轉(zhuǎn)染后miR-2后侵襲以及粘附能力變化?????一?一一46圖11.NCI.H446瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-2后侵襲以及粘附能力的比較圖12.MiR-2與PLKl、TGFBl以及MMPll3’UTR結(jié)合區(qū)域的序列???一47圖13.PLKl和TGFBl的3’UTR中miR.2結(jié)合區(qū)以及其突變體

7、的報(bào)告基因質(zhì)粒設(shè)計(jì)?...???一?????????????~?????????????????一48圖14.MiR-2能夠特異性結(jié)合PLKl和TGFBl的3’UTR區(qū)域圖15.MiR-2不能特異性結(jié)合特異性結(jié)合MMPl1的3’UTR區(qū)域?????一??.49圖16.MiR.2瞬轉(zhuǎn)H446細(xì)胞系后靶基因mRNA的表達(dá)水平一49圖17.MiR-2瞬轉(zhuǎn)NCI.H520,A549以及Amip973細(xì)胞系后靶基因mRNA的表達(dá)水平圖18.瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-2后對(duì)PLKl、TGF13l以及MMPll蛋白水平影響???.5l

8、圖l9.穩(wěn)轉(zhuǎn)H446細(xì)胞系miR.2高表達(dá)??????一????????一?一51圖20.穩(wěn)轉(zhuǎn)miR-2高表達(dá)細(xì)胞系對(duì)細(xì)胞增殖無(wú)顯著影響??一一52圖21.穩(wěn)轉(zhuǎn)miR-2高表達(dá)細(xì)胞系對(duì)遷移和粘附的影響一??????????.52圖22.穩(wěn)轉(zhuǎn)miR.2高表達(dá)細(xì)胞系對(duì)NCI.H446細(xì)胞系遷移和粘附的影響???...53圖23.穩(wěn)定高表達(dá)miR-2的細(xì)胞系的PLKl、TGF13l的mRNA

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