臍帶間質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的囊泡對(duì)順鉑誘導(dǎo)的急性腎損傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究

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1、江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文臍帶間質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的囊泡對(duì)順鉑誘導(dǎo)的急性腎損傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究姓名：徐會(huì)濤申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)指導(dǎo)教師：錢(qián)暉20120608江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要目的建立用化療藥物順鉑(Cisplatin)誘導(dǎo)的大鼠急性腎損傷(acutekidneyinjury，AKI)動(dòng)物模型，運(yùn)用病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、分子生物學(xué)等技術(shù)綜合評(píng)價(jià)注射人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞(humanumbilicalcordmesenchymalstemcells，hucMSCs)來(lái)源的囊泡(exosomes)的治療效果并初步探討其可能的作用機(jī)制。方法采用腹腔注射方式將順鉑以

2、6mg／kg體重的劑量注入大鼠體內(nèi)建立急性腎損傷動(dòng)物模型。在注射順鉑前以及注射順鉑后的ld、2d、3d、4d、5d、7d通過(guò)尾靜脈收集大鼠血清，測(cè)定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)；留取腎臟組織通過(guò)HE染色評(píng)價(jià)急性腎損傷程度。于順鉑注射后24h將hucMSCs來(lái)源的exosomes經(jīng)腎被膜輸注到腎損傷大鼠模型中，分別于不同時(shí)間點(diǎn)收集血清和腎組織，與未移植exosomes組對(duì)比，檢測(cè)血清Cr、BUN的變化，通過(guò)ELISA檢測(cè)血清腎損傷因子l(Kim．1)，綜合運(yùn)用分子生物學(xué)、病理學(xué)、免疫組織化學(xué)、定量RT-PCR、westernblot等技術(shù)，評(píng)價(jià)exosom

3、e對(duì)AKI的修復(fù)效果。結(jié)果Exosomes移植組較對(duì)照組Cr、BUN、Kim．1水平顯著降低(p

4、胞來(lái)源的exosomes可促進(jìn)大鼠急性腎損傷的修復(fù)，其主要是通過(guò)抗凋亡、促增殖和抗炎癥的機(jī)制。因此，人臍帶間質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的exosomes可能為急性腎損傷的治療提供一種新的思路。關(guān)鍵詞臍帶間質(zhì)干細(xì)胞，囊泡，急性腎損傷，順鉑江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文———————_—————————————————————————————————————_——一ABSTRACTObjectiveToestablishananimalmodelofacutekidneyinjury(AKI)inducedbycisplatinandevaluatethecurativeeffecton

5、renalinjuryrepairafterhumanumbilicalcordmesenchymalstemcell(hucMSC)derivedexosomestransplantation．Further，weinvestigatethemechanismbyexperimenttechnologiessuchaspathology,immunohistochemistry，molecularbiologytechnology．MethodsAcutekidneyinjurymodelofrmsWasestablishedbythemethodofint

6、raperitonealinjectioncisplatin，andthedosagesofcisplatinselected6mg／kgweightconditions．Theserumwascollectedat0day,ldays，2days，3days，4days，5days，and7daysafterinjectedcisplatin·TheserumBUNandCrlevelsweredetected．KidneytissueWasusedforHEstainingtoevaluatetheextentofacutekidneyinjury．Hum

7、anumbilicalcordmesenchymalstemcell-derivedexosomeswereinjectedintoratsviarenalcapsuleaftercisplatininjectionfor24hours．TheserumBUN、Crandkim．IofratsaRerhucMSCexosomesadministrationweredetected．Thetherapeuticefficacyandmechanismofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcell—derivedexosomeswe

8、reappreciatedbymole