耐低鉀水稻的篩選及基因型鑒定

耐低鉀水稻的篩選及基因型鑒定

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1、分類號(hào)學(xué)校代碼!Q5壘2密級(jí)學(xué)號(hào)2Q!!Q2l壘122魚耐低鉀水稻的篩選及基因型鑒定ScreeningandGenotypesIdentificationofLowPotassiumTolerantRice研究生姓名指導(dǎo)教師姓名、職稱學(xué)科專業(yè)研究方向湖南師范大學(xué)學(xué)位評(píng)定委員會(huì)辦公室二零一四年五月摘要我國(guó)耕地缺鉀面積不斷擴(kuò)大,在我國(guó)南方水稻主產(chǎn)區(qū),出現(xiàn)土壤缺鉀或嚴(yán)重缺鉀的耕地達(dá)到了50%以上,鉀已成為限制水稻優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)的主要因素之一。我國(guó)鉀資源貧乏,需要大量進(jìn)口鉀肥,但是鉀肥價(jià)格日益高漲,依靠大量進(jìn)口鉀肥來解決我國(guó)耕地缺

2、鉀問題并非良計(jì)。因此,篩選出能夠適應(yīng)低鉀環(huán)境的耐低鉀水稻基因型,是解決缺鉀問題的重要途徑。本研究以490份雜交稻親本材料和732份日本晴/9311雜交后代為材料進(jìn)行耐低鉀篩選,并對(duì)耐低鉀能力最強(qiáng)和最弱的材料進(jìn)行吸鉀相關(guān)基因的分子檢測(cè),目的在于為我國(guó)南方耐缺鉀水稻育種提供理論和技術(shù)支持,促進(jìn)我國(guó)糧食安全生產(chǎn)的同時(shí),降低糧食生產(chǎn)成本,減少農(nóng)業(yè)生產(chǎn)對(duì)環(huán)境的不利影響。主要研究結(jié)果如下:1.不同K+濃度對(duì)水稻生長(zhǎng)的影響規(guī)律通過水培法,在8種中低鉀營(yíng)養(yǎng)液和完全營(yíng)養(yǎng)液(40mg/L)培養(yǎng)水稻至五葉期。K+濃度在O-2mg/L條件下

3、,所有水稻材料生長(zhǎng)均嚴(yán)重受阻,矮小細(xì)弱;當(dāng)K+濃度增加到3mg/L時(shí),其各項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)得到顯著改善,不同品種間差異最大;隨著K+濃度進(jìn)一步增加,植株逐漸生長(zhǎng)得更好,耐低鉀水稻的生長(zhǎng)量與完全營(yíng)養(yǎng)條件下的差異迅速變小。當(dāng)K+濃度達(dá)20mg/L后,改善植株生長(zhǎng)的增長(zhǎng)趨勢(shì)減緩。2.水稻耐低鉀能力的比較與一級(jí)耐低鉀水稻品種的篩選在低鉀營(yíng)養(yǎng)液(3mg/L)和完全營(yíng)養(yǎng)液(40mg/L)條件下,以五葉期為篩選時(shí)期,根據(jù)植株地上部相對(duì)于重,結(jié)合植株相對(duì)株高、根長(zhǎng)、鮮重及缺鉀癥狀等表型,對(duì)1222份供試水稻材料進(jìn)行了耐低鉀T能力等級(jí)劃分(

4、一級(jí)為最耐低鉀,四級(jí)為低鉀敏感),從日本晴/9311雜交后代中篩選出5份一級(jí)耐低鉀品種,從雜交稻親本材料中篩選出4份一級(jí)耐低鉀品種;二級(jí)耐低鉀材料239份;三級(jí)耐低鉀材料507份;四級(jí)耐低鉀材料467份。3.不同耐低鉀水稻葉片中鉀離子含量的比較在低鉀條件下,由于不同水稻吸收利用鉀的能力不同,葉片中鉀離子含量差異顯著,耐低鉀基因型其葉片鉀離子含量要高于不耐低鉀基因型。4.不同耐低鉀水稻的吸鉀相關(guān)基因的分析用11個(gè)與鉀吸收相關(guān)基因設(shè)計(jì)的引物對(duì)篩選出的24種耐低鉀與不耐低鉀基因型進(jìn)行PCR檢測(cè),在所有材料中均能檢測(cè)到C2、

5、OsHKT4.eGFP、OsTPK-A的目的條帶,但與水稻耐低鉀能力沒相對(duì)應(yīng)關(guān)系,OsKAT3、OsSKORI、Pa2.J、OsKAT2、OsAKT4、AtKATl、AtAKTl和OsHAKl未能檢測(cè)到目的條帶。對(duì)8種耐低鉀與不耐低鉀材料進(jìn)行RT-PCR檢測(cè),C2、OsHKT4.eGFP、OsTPK-A和OsKAT3在所有材料中均有表達(dá),在不同基因型中這4個(gè)基因雖有表達(dá)量的差異,但依然與水稻耐低鉀能力無相關(guān)性,其余基因并未檢測(cè)到目的條帶。對(duì)其中4種材料中OsKAT3的RT-PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序,在14個(gè)不同的堿基位點(diǎn)上

6、有差異,與日本晴的OsKAT3基因序列進(jìn)行比對(duì),發(fā)現(xiàn)耐低鉀基因型與日本晴差異位點(diǎn)最少,不耐低鉀基因型與日本晴差異位點(diǎn)最多,這些堿基上的差異可能與水稻耐低鉀能力的強(qiáng)弱有相關(guān)性,這有待進(jìn)一步研究與驗(yàn)證。關(guān)鍵詞:水稻,耐低鉀,篩選,基因IIABSTRACTOurcountrycultivatedlandareaisexpandingeveryyear,riceproducingareasinsouthernChinaappearedpotassiumdeficiencyorseverepotassiumdeficiency

7、insoilhasreachedmorethan50%ofthecultivatedland.Potassiumhasbecomeoneofthemajorfactorslimitinghighyieldandqualityofrice.Chinaisapotassiumresource—poorcountry,whichneedtoimportlargequantitiesofpotash,butthepricesisrising,relyheavilyonimportsofpotashtosolveourprob

8、lemsisnotafeasibleway.Thus,screeningforlowpotassiumtolerantricegenotypeswhichcanadapttotheenvironmentoflowpotassium,isanimportantwaytosolvepotassiumdeficiencyproblem.Inthisr

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