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《秋水仙素與順鉑誘導(dǎo)hela細(xì)胞凋亡的定量多肽組學(xué)研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)萬方數(shù)據(jù)摘要多肽組學(xué)是一種可以定性和定量分析生物樣品中的多肽的技術(shù)。這項技術(shù)可應(yīng)用于發(fā)現(xiàn)疾病的生物標(biāo)記分子、檢測活性多肽、研究蛋白水解調(diào)控活性肽過程等方面。本實驗應(yīng)用多肽組學(xué)的方法研究在秋水仙素和順鉑誘導(dǎo)Hela細(xì)胞產(chǎn)生凋亡后，細(xì)胞內(nèi)多肽水平的變化。細(xì)胞凋亡是生物體中一項非常重要的生理過程，在維持生物機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、免疫功能、生長發(fā)育等生命活動中具有重要的作用，因而研究凋亡過程具有重要意義。秋水仙素是一種用于治療痛風(fēng)和癌癥的生物堿。它可以通過抑制微管蛋白聚合引起細(xì)胞凋亡。順鉑是一種重金屬絡(luò)合物，可結(jié)合于DNA上抑制DNA的復(fù)制過程
2、，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。盡管有很多方法解釋秋水仙素與順鉑引起細(xì)胞凋亡的機(jī)制，但這些藥物引起細(xì)胞內(nèi)多肽的變化還未見報導(dǎo)。另外，因為對細(xì)胞內(nèi)多肽可能對很多生理過程包括凋亡過程可能會發(fā)揮作用缺乏認(rèn)識，所以目前利用細(xì)胞內(nèi)的多肽信息用于對細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究是相當(dāng)有限的。本研究用定量多肽組學(xué)方法檢測了用200μM秋水仙素與50μM順鉑處理Hela細(xì)胞24小時后多肽的變化。結(jié)果如下：1.用CCK-8檢測法檢測秋水仙素與順鉑對細(xì)胞存活率的影響，隨藥物濃度增加，細(xì)胞活力下降。2.用200μM秋水仙素處理Hela細(xì)胞24小時后，一共鑒定出203種多肽，這些多肽來自1
3、01種不同的前體蛋白。其中有84種多肽發(fā)生顯著變化。在這些明顯變化的多肽中，有3條多肽是來自相應(yīng)的蛋白前體的N端，有24條多肽來自相應(yīng)的蛋白前體的C端。其他的57條多肽則來自蛋白前體的中間部分。3.用50μM順鉑處理Hela細(xì)胞24小時后，共提取出61條多肽，這些多肽來自26種不同的前體蛋白。提取出的多肽中有34條多肽發(fā)生顯著變化。這些顯著變化的多肽中，只有1條多肽是來自相應(yīng)的蛋白前體的N端，有14條多肽來自相應(yīng)的蛋白前體的C端。其他的19條多肽則來自蛋白前體的中間部分。4.在兩種藥物處理細(xì)胞后提取出的相同多肽中，有些多肽在兩種藥物處理后
4、均產(chǎn)生下調(diào)，有些多肽則只在一種藥物處理后產(chǎn)生顯著變化，沒有發(fā)現(xiàn)共同上調(diào)的多肽，這可能與兩種藥物不同的作用機(jī)理有關(guān)。本實驗中我們用一種有效的分析方法對細(xì)胞發(fā)生凋亡的過程中的多肽進(jìn)行了全面的分析。這是一種對凋亡過程研究的新方法。結(jié)果發(fā)現(xiàn)秋水仙素與順鉑改變了細(xì)胞內(nèi)多肽的平衡，表明多肽可能在這些藥物的生物學(xué)作用中發(fā)揮作用。關(guān)鍵詞：多肽組學(xué)，凋亡，秋水仙素，順鉑，多肽變化I萬方數(shù)據(jù)AbstractPeptidomicsisatechnologyofqualitativeandquantitativeanalysisofpeptidesinbiolo
5、gicalsamples.Theapplicationsofpeptidomicsincludeidentifyingpeptidebiomarkersofdisease,identifyingbioactivepeptideandinvestigatingproteolyticregulationofbioactivepeptides.Inthisstudy,weappliedpeptidomicstoexaminethechangesofpeptideswithintheHelacellsaftertreatmentbycolchic
6、ineandcisplatinwhichinducecellapoptosis.Cellapoptosisisanimportantphysiologicalprocessesinlife,whichplayanimportantroleinmaintaininghomeostasis,immunefunctionandgrowthanddevelopment.Therefore,itisofgreatsignificancetostudyapoptosisprocess.Colchicineisanalkaloidthathasbeen
7、usedtotreatgoutandcancerforalongtime,anditcaninducecellapoptosisbyinhibitingmicrotubulepolymerizationwhichhasbeenwelldocumented.Cisplatinisaheavymetalcomplex,anditcaninhibitthereplicationofDNAbybindingtoDNAandinduceapoptosis.Whiletherehavebeenmanywaystoexploretheapoptosis
8、mechanisminducedbythesetwokindsofmedicine,theimpactofcolchicineandcisplatinonintracellularpeptid
