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《gleevec誘導順鉑耐藥卵巢癌細胞coc1凋亡的形態(tài)學研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、Gleevec誘導順鉑耐藥卵巢癌細胞COC1凋亡的形態(tài)學研究【摘要】目的探討Gleevec對順鉑耐藥卵巢癌細胞COC1的誘導凋亡作用。方法用Gleevec處理COC1細胞，采用MTT法檢測Gleevec聯(lián)合順鉑對細胞增殖的影響。HE染色顯微鏡下觀察細胞，電鏡下觀察細胞形態(tài)學的變化。結(jié)果Gleevec顯著提高了COC1/DDP對順鉑的敏感性(P<0．05)；2.5～10μg／ml順鉑與1.0μmol/LGleevec合用表現(xiàn)為協(xié)同作用,2.5～10μg／ml順鉑與2.5～10μmol/LGleeve
2、c合用表現(xiàn)為相加作用。在Gleevec的作用下COC1細胞呈現(xiàn)明顯的凋亡改變，形成凋亡小體。結(jié)論Gleevec能夠誘導順鉑耐藥卵巢癌細胞COC1的凋亡。 【關(guān)鍵詞】Gleevec順鉑卵巢癌耐藥StudyandInvestigationabouttheeffectofGleeveconinductionofapoptosisinOvarianCancercellZHENGYi,etal.HarbinMedicalUniveristy,Harbin,Heilongjiang150086China【Ab
3、stract】ObjectiveThestudywasdesignedtoinvestigatetheeffectofGleeveconinductionofapoptosisinOvarianCancercell.MethodsMTTassaywasusedtoanalyzeinhibitoryeffectofGleevecandwithDDPonCOC1cell.ThechangesofapoptosiswereobservedwithHEstaininginvertmicroscopeand
4、transmissionelectronmicroscope.ResultsGleevecenhancedCOC1/DDPcellssensitivitytoDDPsignificiantly(P<0.05);2.5～10μg/mlDDPwith1.0μmol/LGleevecperformancedthefunctionofconjunction,2.5～10μg/mlDDPwith2.5～10μmol/LConclusionsTheGleeveccaninducethe
5、apoptosisofdrug-resistantovariantumorcellenhancetheapoptosisofdrug-resistantovariancarcinomacellinducedbyDDP.【Keywords】GleevecDDPOvarycancerDrugresistance細胞凋亡是一種與細胞壞死具有不同形態(tài)及生化特征且受基因調(diào)控的主動性細胞死亡。惡性變是腫瘤細胞喪失自發(fā)凋亡反應能力的最終結(jié)果,和耐藥與凋亡減少有關(guān)。因此誘導耐藥腫瘤細胞產(chǎn)生凋亡更有價值。本研究以卵
6、巢癌細胞系COC1的耐鉑類亞株COC1/DDP為研究對象來探討Gleevec誘導卵巢癌耐藥細胞凋亡的作用機制。為臨床提高耐藥卵巢癌的治療效果提供實驗依據(jù)。1材料與方法1．1材料COC1/DDP細胞株購自武漢大學中國典型培養(yǎng)物保藏中心,由中國醫(yī)學科學院腫瘤研究所建株;Gleevec購自瑞士諾華公司;DDP購自江蘇豪森制藥廠;四甲基偶氮哇藍(MTT)、二甲基亞砜(DMSO)均為Sigma公司產(chǎn)品;PRMI-1640培養(yǎng)基購自GIBCO公司；電鏡（EM208S荷蘭飛利蒲）。1．2方法1．2．1細胞培養(yǎng)及
7、實驗分組COC1/DDP細胞株在含有10%胎牛血清、100U/ml青霉素、100U/ml鏈霉素、0.5μg/mlDDP的RPMI-1640培養(yǎng)基中,37℃、5%CO2混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細胞換液為24～48h,取對數(shù)生長期細胞進行實驗。1．2．2順鉑、Gleevec聯(lián)合用藥對COC1細胞增殖的影響收集對數(shù)生長的細胞，細胞計數(shù)密度為1.5×106/ml,以100μl/孔接種于96孔培養(yǎng)板，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)12h，以1500轉(zhuǎn)/min離心10min,棄去培養(yǎng)液，
8、加入含不同濃度的藥物的培養(yǎng)基200μl，順鉑選取0、1.25、2.5、5.0、10μg/ml5個濃度，Gleevec選取0、0.5、1.0、2.5、5.0、10μmol/L6個濃度，設(shè)對照、單藥、聯(lián)合共30種組合，每組設(shè)3個復孔。加藥后繼續(xù)培養(yǎng)72h，每孔加入MTT(5mg／ml)20μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h后以1500轉(zhuǎn)/min離心10min，棄培養(yǎng)液，每孔加入DMSO200μl，振蕩10min,全自動酶標儀測570nm吸光度（A570）。用以下公式計算兩
