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《gleevec誘導(dǎo)順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞coc1凋亡的形態(tài)學(xué)研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、Gleevec誘導(dǎo)順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞COC1凋亡的形態(tài)學(xué)研究【摘要】目的探討Gleevec對順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞COC1的誘導(dǎo)凋亡作用。方法用Gleevec處理COC1細(xì)胞，采用MTT法檢測Gleevec聯(lián)合順鉑對細(xì)胞增殖的影響。HE染色顯微鏡下觀察細(xì)胞，電鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué)的變化。結(jié)果Gleevec顯著提高了COC1/DDP對順鉑的敏感性(P<0．05)；2.5～10μg／ml順鉑與1.0μmol/LGleevec合用表現(xiàn)為協(xié)同作用,2.5～10μg／ml順鉑與2.5～10μmol/LGleeve
2、c合用表現(xiàn)為相加作用。在Gleevec的作用下COC1細(xì)胞呈現(xiàn)明顯的凋亡改變，形成凋亡小體。結(jié)論Gleevec能夠誘導(dǎo)順鉑耐藥卵巢癌細(xì)胞COC1的凋亡?！ 娟P(guān)鍵詞】Gleevec順鉑卵巢癌耐藥StudyandInvestigationabouttheeffectofGleeveconinductionofapoptosisinOvarianCancercellZHENGYi,etal.HarbinMedicalUniveristy,Harbin,Heilongjiang150086China【Ab
3、stract】ObjectiveThestudywasdesignedtoinvestigatetheeffectofGleeveconinductionofapoptosisinOvarianCancercell.MethodsMTTassaywasusedtoanalyzeinhibitoryeffectofGleevecandwithDDPonCOC1cell.ThechangesofapoptosiswereobservedwithHEstaininginvertmicroscopeand
4、transmissionelectronmicroscope.ResultsGleevecenhancedCOC1/DDPcellssensitivitytoDDPsignificiantly(P<0.05);2.5～10μg/mlDDPwith1.0μmol/LGleevecperformancedthefunctionofconjunction,2.5～10μg/mlDDPwith2.5～10μmol/LConclusionsTheGleeveccaninducethe
5、apoptosisofdrug-resistantovariantumorcellenhancetheapoptosisofdrug-resistantovariancarcinomacellinducedbyDDP.【Keywords】GleevecDDPOvarycancerDrugresistance細(xì)胞凋亡是一種與細(xì)胞壞死具有不同形態(tài)及生化特征且受基因調(diào)控的主動性細(xì)胞死亡。惡性變是腫瘤細(xì)胞喪失自發(fā)凋亡反應(yīng)能力的最終結(jié)果,和耐藥與凋亡減少有關(guān)。因此誘導(dǎo)耐藥腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生凋亡更有價(jià)值。本研究以卵
6、巢癌細(xì)胞系COC1的耐鉑類亞株COC1/DDP為研究對象來探討Gleevec誘導(dǎo)卵巢癌耐藥細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制。為臨床提高耐藥卵巢癌的治療效果提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1材料與方法1．1材料COC1/DDP細(xì)胞株購自武漢大學(xué)中國典型培養(yǎng)物保藏中心,由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所建株;Gleevec購自瑞士諾華公司;DDP購自江蘇豪森制藥廠;四甲基偶氮哇藍(lán)(MTT)、二甲基亞砜(DMSO)均為Sigma公司產(chǎn)品;PRMI-1640培養(yǎng)基購自GIBCO公司；電鏡（EM208S荷蘭飛利蒲）。1．2方法1．2．1細(xì)胞培養(yǎng)及
7、實(shí)驗(yàn)分組COC1/DDP細(xì)胞株在含有10%胎牛血清、100U/ml青霉素、100U/ml鏈霉素、0.5μg/mlDDP的RPMI-1640培養(yǎng)基中,37℃、5%CO2混合氣體的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。細(xì)胞換液為24～48h,取對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1．2．2順鉑、Gleevec聯(lián)合用藥對COC1細(xì)胞增殖的影響收集對數(shù)生長的細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)密度為1.5×106/ml,以100μl/孔接種于96孔培養(yǎng)板，37℃、5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)12h，以1500轉(zhuǎn)/min離心10min,棄去培養(yǎng)液，
8、加入含不同濃度的藥物的培養(yǎng)基200μl，順鉑選取0、1.25、2.5、5.0、10μg/ml5個(gè)濃度，Gleevec選取0、0.5、1.0、2.5、5.0、10μmol/L6個(gè)濃度，設(shè)對照、單藥、聯(lián)合共30種組合，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。加藥后繼續(xù)培養(yǎng)72h，每孔加入MTT(5mg／ml)20μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h后以1500轉(zhuǎn)/min離心10min，棄培養(yǎng)液，每孔加入DMSO200μl，振蕩10min,全自動酶標(biāo)儀測570nm吸光度（A570）。用以下公式計(jì)算兩
