鎂對高磷誘導(dǎo)慢性腎衰竭大鼠胸主動(dòng)脈血管鈣化作用的研究

鎂對高磷誘導(dǎo)慢性腎衰竭大鼠胸主動(dòng)脈血管鈣化作用的研究

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1、學(xué)位論文使用授權(quán)及知識產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師(或指導(dǎo)小組)的指導(dǎo)下,由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果,其知識產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文,第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué),試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則,承擔(dān)相二蘭耄:二孓文唐導(dǎo)師簽方磷學(xué)院領(lǐng)研究生簽名:立孓文唐導(dǎo)師簽彰讎級學(xué)院領(lǐng)河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外,文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果,指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審

2、定。本論文由本人獨(dú)立撰寫,文責(zé)自負(fù)。研究生簽名:立孓爻牙導(dǎo)師簽章:沙J目錄中文摘要??????????????????????????.1英文摘要??????????????????????????.4研究論文鎂對高磷誘導(dǎo)慢性腎衰竭大鼠胸主動(dòng)脈血管鈣化作用的研究前言??????????????????????????.99剛舌??????????????????????????.材料與方法???????????????????????.9結(jié)果??????????????????????????15附圖??????????????????????????17附表???????????????

3、???????????20討論??????????????????????????22結(jié)論??????????????????????????23參考文獻(xiàn)????????????????????????24綜述鎂離子在慢性腎臟病血管鈣化中的作用???????????26致謝??????????????????.?????????..41個(gè)人簡歷??????????????????????????42中文摘要鎂對高磷誘導(dǎo)慢性腎衰竭大鼠胸主動(dòng)脈血管鈣化作用的研究摘要目的:心血管疾病(cardiovasculardisease,CVD)是慢性腎臟病(chronickidneydisease,CK

4、D)患者的主要并發(fā)癥之一,血管鈣化是導(dǎo)致CKD患者發(fā)生CVD的首要原因。血管鈣化類似于成骨或成軟骨過程,并由多種細(xì)胞、分子共同參與調(diào)節(jié),但其發(fā)生機(jī)制迄今尚未完全闡明。目前高磷血癥是參與CKD患者血管鈣化形成的主要危險(xiǎn)因素之一。研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外磷通過血管平滑肌細(xì)胞(VSMCs)上的鈉磷協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)體(Pit一1)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),通過誘導(dǎo)VSMCs向成骨或成軟骨樣細(xì)胞轉(zhuǎn)分化,導(dǎo)致了血管鈣化的發(fā)生。目前臨床上對于血管鈣化的防治尚沒有較好的方法。隨著對血管鈣化研究的深入,近來研究發(fā)現(xiàn)基質(zhì)G1A蛋白、胎球蛋白.A、骨橋蛋白、骨保護(hù)蛋白等都對血管鈣化有保護(hù)性作用。但目前關(guān)于鎂離子與CKD血管鈣化的研究較少,為此

5、本實(shí)驗(yàn)建立了慢性腎衰竭大鼠血管鈣化模型,觀察鎂對主動(dòng)脈血管鈣化及彈性功能的影響,并對其可能機(jī)制進(jìn)行了初步探討。方法:1實(shí)驗(yàn)對象本論文采用完全隨機(jī)對照的研究方法,將于河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心購買的32只清潔級、健康、雄性、5周齡的SD大鼠,在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院動(dòng)物中心屏障環(huán)境適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后,隨機(jī)分為4組:正常對照組、慢性腎衰竭血管鈣化組、低鎂組、高鎂組。分別用硫酸腺嘌呤灌胃(600mg/kg/d)14天+高磷飲食(P1.2%)13周復(fù)制慢性腎衰竭大鼠血管鈣化模型,分別給予不同濃度鎂飲食(Mg0.02%,0.05%,O.15%)干預(yù)。2實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的留取四組大鼠于屏障環(huán)境飼養(yǎng)15周后通過心臟取

6、血留取血標(biāo)本,處死大鼠后取其胸主動(dòng)脈全段、腹主動(dòng)脈全段及腎臟,部分于10%福爾馬林溶液中固定,腹主動(dòng)脈全段于烤箱80。C中烘干后常溫保存,余標(biāo)本于一80℃冰箱保存,分離出的血清于-20。C冰箱保存。3慢性腎衰竭大鼠主動(dòng)脈脈搏波速率的測定中文摘要通過多導(dǎo)電生理儀記錄動(dòng)脈的壓力波形,測量大鼠胸主動(dòng)脈.腹主動(dòng)脈內(nèi)兩個(gè)導(dǎo)管尖端的距離(D),計(jì)算胸主動(dòng)脈.腹主動(dòng)脈壓力的時(shí)間延遲(T),計(jì)算PWV,PWV=D/T。4慢性腎衰竭大鼠的腎臟病理及血清學(xué)指標(biāo)的檢測對大鼠腎臟組織進(jìn)行HE染色,觀察腎臟結(jié)構(gòu)的病理改變,化驗(yàn)血清鈣、磷、鎂、尿素氮、肌酐,以判斷慢性腎衰竭大鼠模型是否建立成功。5慢性腎衰竭大鼠的血管

7、HE、Vonkossa染色及鈣含量測定方法對大鼠胸主動(dòng)脈上段血管壁行常規(guī)眥染色及Vonkossa鈣化染色,檢測各組胸主動(dòng)脈的血管鈣化情況。對大鼠腹主動(dòng)脈全段血管壁用鄰甲酚酞絡(luò)合酮比色法檢測主動(dòng)脈鈣含量。6慢性腎衰竭大鼠胸主動(dòng)脈核心結(jié)合因子al(cbfal)mRNA表達(dá)情況對大鼠胸主動(dòng)脈下段血管壁用RT-PCR方法檢測主動(dòng)脈血管鈣化標(biāo)志分子核心結(jié)合因子0【1(cbfal)mRNA的表達(dá)情況。7統(tǒng)計(jì)分析采用SPSSl3.0統(tǒng)

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