microrna-30a調(diào)控beclin-1對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)自噬作用

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1、解放軍醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明秉承我院“忠誠、敬業(yè)、和諧、創(chuàng)新”的學(xué)風(fēng),本人聲明:所呈交的論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不含為獲得我院或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位及證書而使用過的材料,對本文的研究作出貢獻(xiàn)的個人或集體,均已在文中做了明確的說明并表示謝意。申請學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處,本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名:日期:指導(dǎo)教師簽名:日期:解放軍醫(yī)學(xué)院研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人保證畢業(yè)離院后,發(fā)表論文或使用論文工作成果時署名單位為解放軍醫(yī)學(xué)院或解

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3、…………….11材料與方法…………………………………………………………………………..11結(jié)果…………………………………………………………………………………..17第二部分miR-30a腺病毒表達(dá)載體構(gòu)建及感染乳鼠心肌細(xì)胞…………………..19材料與方法…………………………………………………………………………..19結(jié)果…………………………………………………………………………………..28第三部分miR-30a調(diào)控Beclin-1對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧誘導(dǎo)自噬的作用…31材料與方法…………………………………………………………………………..31結(jié)果………..…………………………………

4、……………………………………....40討論…………………………………………………………………………………..44參考文獻(xiàn)……………………………………………………………………………..48綜述…………………………………………………………………………………..50在讀期間發(fā)表論文…………………………………………………………………..64致謝…………………………………………………………………………………..65解放軍醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文中英文縮略詞表英文縮寫英文全稱中文全稱miRsmicroRNAs微小RNAmiR-30amicroRNA-30a微小RNA-30aSDSSodiumDodec

5、ylSulfate十二烷基硫酸鈉CTthresholdcycle循環(huán)閾值DEPCdiethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯BSABovineSerumAlbumin牛血清白蛋白EDTAethylenediaminetetraaceticacid乙二胺四乙酸mRNAmessengerribonucleicacid信使核糖核酸bpbasepair堿基對PBSPhosphateBufferedSaline磷酸鹽緩沖液PCRPolymeraseChainReaction聚合酶鏈反應(yīng)ODopticaldensity光密度H/Rhypoxia/reoxygenation缺氧/復(fù)氧3’UT

6、R3’untranslatedregion3’非翻譯區(qū)AMIAcutemyocardialinfarction急性心肌梗死FITCFluoresceinisothiocyanate異硫氰酸苯酯DMEMDulbecco’sModifiedEagle’sMediumDulbecco改良必需培養(yǎng)基1解放軍醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文2解放軍醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文microRNA-30a調(diào)控Beclin-1對乳鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)自噬的作用中文摘要目的觀察microRNA-30a(miR-30a)在乳鼠原代心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧處理后的變化,并探討miR-30a調(diào)節(jié)缺血/再灌注誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞自噬的分子機(jī)制。方法

7、與結(jié)果(1)構(gòu)建乳鼠心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)模型,利用realtime-PCR技術(shù)精確定量對照組和H/R組miR-30a的表達(dá)水平,結(jié)果顯示H/R可誘導(dǎo)miR-30a表達(dá)下調(diào)(71.9±2.6)%,P<0.01。(2)重組構(gòu)建腺病毒表達(dá)載體(AD-rno-miR-NC、AD-rno-miR-30a及AD-rno-miR-30a-inhibition)感染原代乳鼠心肌細(xì)胞,使其過表達(dá)或低表達(dá)miR-

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