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《tcrγδ-ig融合蛋白抗人卵巢癌活性的研究及功能性抗人tcrγδ抗體及單鏈抗體的制備和鑒定》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、博士學(xué)位論文學(xué)校代碼：10023學(xué)號：B2009250TCRy8．Ig融合蛋白抗人卵巢癌活性的研究及功能性抗人TCRy8抗體及單鏈抗體的制備和鑒定所院：姓名：導(dǎo)師：導(dǎo)師小組：學(xué)科專業(yè)：研究方向：完成時(shí)間：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所鄭靜何維教授崔蓮仙教授免疫學(xué)腫瘤免疫2012年5月北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文目錄目錄目錄?????????????????????????????．．1中文摘要?????????????????????????????2英文摘要?????????????????????????????5縮略詞
2、表?????????????????????????????．9前言?????????????????????????????。13第一部分TCR丫6-lg融合蛋白抗人卵巢癌活性的研究技術(shù)路線?????????????????????????????16材料?????????????????????????????．17方法?????????????????????????????．22結(jié)果?????????????????????????????．29討論?????????????????????????????．38第二部分功能性抗人TCR丫8
3、抗體及單鏈抗體的制備和鑒定技術(shù)路線?????????????????????????????43材料?????????????????????????????．44方法?????????????????????????????．53結(jié)果?????????????????????????????．63討論?????????????????????????????．78全文結(jié)論?????????????????????????????．81參考文獻(xiàn)?????????????????????????????82文獻(xiàn)綜述??????????????????
4、???????????91個(gè)人簡歷????????????????????????????1061改謝．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．??．．．???．107獨(dú)創(chuàng)性聲明????????????????????????????109北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文巾文摘要TCRy8一Ig融合蛋白抗人卵巢癌活性的研究及功能性抗人TCRy8抗體及單鏈抗體的制備和鑒定中文摘要二十余年來，腫瘤的抗體靶向治療發(fā)展迅速。曲妥珠單克隆抗體(Trastuzumab
5、)和利妥昔單克隆抗體(Rituximab)分別被用于靶向性治療乳腺癌轉(zhuǎn)移和非何杰金式淋巴瘤；并取得了良好的臨床治療效果。腫瘤靶向治療的關(guān)鍵在于發(fā)現(xiàn)腫瘤特異性抗原。然而，已獲鑒定的腫瘤特異性抗原數(shù)量較少，這大大限制了應(yīng)用抗體進(jìn)行腫瘤靶向治療的發(fā)展。除了抗體，腫瘤浸潤性T細(xì)胞表面的T細(xì)胞受體(Tcellreceptor,TCR)也能特異地識別腫瘤抗原，這使之成為腫瘤靶向治療的理想候選者。據(jù)報(bào)道，應(yīng)用TCRot[3進(jìn)行腫瘤靶向治療的研究已取得了初步的進(jìn)展。TCRy982在TCR缺失的JRT3．T3．5細(xì)胞中表達(dá)，能夠賦予后者識別和殺傷腫瘤細(xì)胞的能力，表明
6、TCRy982在3,982T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷中起著關(guān)鍵性作用。對腫瘤細(xì)胞的特異識別使TCRy982可能像抗體一樣應(yīng)用于腫瘤的靶向治療。更重要的是，與TCRap相比，TCRy8的抗原識別不受主要組織相容性復(fù)合物(Majorhistocompabilitycomplex，MHC)限制，其抗原識別譜可能更廣。因此，TCRy6應(yīng)用于腫瘤靶向治療可能也具有一定優(yōu)勢。本課題組致力于研究TCRy982在腫瘤靶向治療中的作用。在前期工作中，本組在人卵巢上皮癌浸潤性T淋巴細(xì)胞中獲得了一個(gè)優(yōu)勢TCR82鏈互補(bǔ)挾定區(qū)3(complementarydeterminmg
7、region3，CDR3)序列，將其命名為OT3。實(shí)驗(yàn)證明，TCRy982(OT3)是卵巢癌反應(yīng)性的特異性TCR。用OT3取代抗體重鏈CDR3區(qū)，構(gòu)建的CDR38(OT3)移植性抗體，保留了其與多種腫瘤細(xì)胞的結(jié)合特性，但親和力較弱。為了獲得既具有對腫瘤抗原的高親合特性，又具有抗體生物學(xué)功能的融合蛋白，我們將TCRy982(OT31的完整胞外段或可變區(qū)分別與人IgGl重鏈恒定區(qū)連接起來，構(gòu)建了三種TCRT8一Ig融合蛋白，即TCRy982(OT3)一Fc，TCRV82(OT3)一Fc和TCRV82(OT3)H／Vy9LA,。體外結(jié)合實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，三
8、種融合蛋白中，TCRy982(OT3卜Fc與卵巢癌細(xì)胞系和組織的結(jié)合能力最強(qiáng)。因此，本研究的第一部分工作，主要研究TTCR
