全局轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子dody在嗜熱鏈球菌中的調(diào)控機制研究

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1、分類號:密級:單位代碼:10422學(xué)號:200911549∥戶茹只SHANDONGUNIVER博士學(xué)位論文DissertationforDoctoralDegree論文題目:全局轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子CodY在嗜熱鏈球菌中的調(diào)控機制研究ThemechanismofglobalregulatorCodYins加eptococcusthermophilus作者姓名培養(yǎng)單位專業(yè)名稱指導(dǎo)教師合作導(dǎo)師陸文偉生命科學(xué)學(xué)院微生物學(xué)孔健教授2014年04月15日萬各一原創(chuàng)性聲明lIlqlllIIIIIIIIIll111111IIIIIIIlY2595944本人鄭重聲明:所

2、呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名日期:關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的印刷件和電子版,允許論文被查閱和借閱;本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽導(dǎo)師簽名

3、:丕止日期:山東大學(xué)博士學(xué)位論文目錄摘要??????????????????????????????????????????一IAbstract.....................................................................................................................VIII符號說明及縮寫詞????????????????????????..XVI第一章緒論????????????????????????????.11.1嗜熱鏈球菌的進化

4、地位????????????????????..11.2嗜熱鏈球菌代謝特征?????????????????????.31.2.1碳代謝????????????????????????..31.2.2氮代謝????????????????????????..41.3嗜熱鏈球菌代謝調(diào)控?????????????????????.51.3.1嗜熱鏈球菌碳代謝調(diào)控機制???????????????..61.3.2嗜熱鏈球菌全局轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子CodY的調(diào)控機制??????.61.3.2.1全局轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子CodY的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)???????????71.3.2

5、.2CodY調(diào)控模式????????????????????.81.3.2.3CodY在革蘭氏陽性菌內(nèi)的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)???????????101.4嗜熱鏈球菌應(yīng)對環(huán)境脅迫的策略????????????????121.4.1嗜熱鏈球菌抗氧脅迫機制????????????????131.4.2嗜熱鏈球菌抗熱脅迫機制????????????????131.4.3嗜熱鏈球菌對外源DNA入侵的應(yīng)對機制?????????.141.5本論文的研究思路及內(nèi)容???????????????????16第二章嗜熱鏈球菌全局轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子CodY的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)????????.

6、.192.1材料????????????????????????????192.1.1菌株和質(zhì)粒??????????????????????192.1.2培養(yǎng)基????????????????????????202.2方法????????????????????????????212.2.1嗜熱鏈球菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子codY基因的敲除????????..2l2.2.1.1codY基因敲除載體的構(gòu)建???????????????.212.2.1.2codY基因敲除及驗證?????????????????.212.2.1.3codY基因的過表達回補???

7、?????????????.222.2.2野生菌株ST2017及突變株ST2017AcodY的生物學(xué)特性分析?222.2.2.1生長曲線測定????????????????????..222.2.2.2代謝產(chǎn)物檢測????????????????????..222.2.3&thermophilusST2017和ST2017AcodY轉(zhuǎn)錄組測序?????232.2.3.1轉(zhuǎn)錄組測序樣品制備?????????????????.232.2.3.2轉(zhuǎn)錄組測序的建庫、測序和數(shù)據(jù)分析??????????.232.2.4實時熒光定量PCR驗證?????????

8、???????..242.3結(jié)果????????????????????????????242.3.1SthermophilusST20

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