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《脂聯(lián)素(adipoq)及其受體(adipor12)對(duì)山羊脂肪沉積的作用機(jī)制研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)SichuanAgriculturalUniversityMasterDegreeDissertationStudyonthemechanismoffatdepositionactionofAdipoQandAdipoRl／2ingoatXueKeDirectedbyProf．ZhangHong—pingAssociateResearchFellowWangLin-jieAnimalGeneticsandBreedingMolecularGeneticsandGoatBreedingYa’an，Sichuan，ChinaJune，2014萬(wàn)方
2、數(shù)據(jù)論文指導(dǎo)小組成員憋李利(教授)仲濤(副研究員)本論文由高等學(xué)校博士點(diǎn)基金資助項(xiàng)目(20115103120011)、四川省科技支撐計(jì)劃(2011NZ0099．36)和國(guó)家星火計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目(2012GA810001)資助在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)“畜禽遺傳資源發(fā)掘與創(chuàng)新利用四川省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室”完成萬(wàn)方數(shù)據(jù)論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，學(xué)位論文中不包含其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)所使用過(guò)的材料。與
3、我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名．聾對(duì)知心年g月／』日關(guān)于論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。囪本論文不保密。口本論文保密，在一年解密后適用本授權(quán)。(請(qǐng)?jiān)谝陨峡趦?nèi)劃“√”)研究生簽名：導(dǎo)師簽名：知
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7、{?礦萬(wàn)方數(shù)據(jù)摘要本試驗(yàn)?zāi)康氖茄芯緼dipoQ、AdipoRl和AdipoR2對(duì)山羊脂肪沉積的作用機(jī)制，為后續(xù)通過(guò)AdipoQ來(lái)調(diào)控山羊肌肉中的脂肪酸合成，改善山羊肉品質(zhì)提供依據(jù)。試驗(yàn)克隆得到南江黃羊AdipoQ、AdipoRl和AdipoR2基因的全長(zhǎng)編碼區(qū)序列。利用半定量RT-PCR檢測(cè)3個(gè)基因在山羊11個(gè)組織(皮下脂肪、背最長(zhǎng)肌、股二頭肌、腓腸肌、卵巢、子宮、腦、瘤胃、腎臟、肝臟和心臟)中的表達(dá)模式。利用qPCR檢測(cè)AdipoQ、AdipoRl和AdipoR2基因在南江黃羊出生后5個(gè)發(fā)育階段(3d、30d、60d、90d和120d
8、)背最長(zhǎng)肌中mRNA的相對(duì)表達(dá)量。利用含高濃度葡萄糖的培養(yǎng)基(25raM／L)誘導(dǎo)山羊骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞(Skeletalmusclesatellitecells，SMSCs)向脂肪細(xì)胞分化，油紅0染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂肪滴的沉積，qPCR檢測(cè)AdipoQ、AdipoRl、AdipoR2、脂肪酸合成及成脂分化相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量。構(gòu)建AdipoQ基因過(guò)表達(dá)載體pEGFP—N1一AD，并在山羊SMSCs中過(guò)表達(dá)AdipoQ基因。熒光顯微鏡檢測(cè)融合蛋白的亞細(xì)胞定位，qPCR檢測(cè)AdipoRl、AdipoR2、脂肪酸合成及成脂分化相關(guān)基因的相對(duì)表達(dá)量。結(jié)果如下：(1
9、)克隆得到南江黃羊AdipoQ、AdipoRl和AdipoR2基因的CDS區(qū)全序列(GenBank登錄號(hào)分別為JX573539、KC286912和JX573540)。CDS區(qū)全長(zhǎng)分別為720bp、1128bp和1176bp，編碼氨基酸數(shù)分別為239、375和391。南江黃羊與人、牛和豬AdipoQ基因核苷酸序列的一致性達(dá)到85％、97％和88％；Aaipom基因核苷酸序列一致性為87％、97％和90％；AdipoR2基因核苷酸序列一致性為86％、97％矛n88％，表明3個(gè)基因在物種間高度保守。(2)半定量RT-PCR檢測(cè)到AdipoO基因mRNA在脂
10、肪組織中表達(dá)量最高，在肌肉組織和肝臟中表達(dá)量相對(duì)較低，其它組織中無(wú)表達(dá)。AdipoRl基因mRNA在所有組織中都有表達(dá)，在肌肉組織、瘤胃、脂肪組織中表達(dá)量較高，其它組織中表達(dá)量較低。AdipoR2基因mRNA同樣在所有組織中都有表達(dá)，在脂肪組織、肌肉組織中表達(dá)量相對(duì)較高，在其它組織中表達(dá)量較低。3個(gè)基因主要在脂肪組織和肌肉組織中表達(dá)，表明3個(gè)基因在這些組織中起到重要作用。(3)利用qPCR檢測(cè)南江黃羊背最長(zhǎng)肌(3d、30d、60d、90d和120d)AdipoQ、AdipoRl和AdipoR2基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)在南江黃羊公、母羊背最長(zhǎng)肌中
11、AdipoQ的表達(dá)相似，呈上升-下降一上升趨勢(shì)，公羊中3d時(shí)表達(dá)量最低(P<0．05)，萬(wàn)方數(shù)據(jù)120d時(shí)表
