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《黑木耳多糖硫酸酯輻射防護(hù)作用的microrna免疫調(diào)控研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、碩士學(xué)位論文黑木耳多糖硫酸酯輻射防護(hù)作用的microRNA免疫調(diào)控研究STUDYONIMMUNOREGULSTIONOFAURICULARIAPOLYSACCHARIDESULFATEAGAINSTRADIATIONPROTECTIONBASEDONMICRORNA周鑫濤哈爾濱工業(yè)大學(xué)2018年6月國(guó)內(nèi)圖書分類號(hào):TS252.1學(xué)校代碼:10213國(guó)際圖書分類號(hào):602密級(jí):公開工學(xué)碩士學(xué)位論文黑木耳多糖硫酸酯輻射防護(hù)作用的microRNA免疫調(diào)控研究碩士研究生:周鑫濤導(dǎo)師:張華副教授申請(qǐng)學(xué)位:工程碩士學(xué)
2、科:化學(xué)工程所在單位:化工與化學(xué)學(xué)院答辯日期:2018年6月授予學(xué)位單位:哈爾濱工業(yè)大學(xué)ClassifiedIndex:TS252.1U.D.C:602DissertationfortheMasterDegreeinEngineeringSTUDYONIMMUNOREGULSTIONOFMICRORNAINRADIATIONPROTECTIONOFAURICULARIAPOLYSACCHARIDESULFATECandidate:ZhouXintaoSupervisor:A.Prof.ZhangHuaAc
3、ademicDegreeAppliedfor:MasterofEngineeringSpeciality:ChemicalengineeringAffiliation:SchoolofChemistryandChemicalEngineeringDateofDefence:June,2018Degree-Conferring-Institution:HarbinInstituteofTechnology哈爾濱工業(yè)大學(xué)工程碩士學(xué)位論文摘要隨著科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展,航空、航天、醫(yī)療、軍事等各個(gè)方面存在輻射隱患,
4、嚴(yán)重威脅人體健康,因而迫切需尋找新型有效的輻射防護(hù)劑,研究輻射對(duì)機(jī)體的損傷途徑。目前,黑木耳多糖抗輻射研究多集中在評(píng)價(jià)其體外清除自由基的能力以及對(duì)體內(nèi)抗氧化酶系的影響。本研究在課題組前期對(duì)黑木耳多糖提取、改性修飾以及體外抗氧化研究的基礎(chǔ)上,將修飾后的黑木耳多糖硫酸酯進(jìn)行體內(nèi)輻射防護(hù)研究,從免疫系統(tǒng)以及與免疫相關(guān)的microRNA(miRNA)和其基因角度揭示黑木耳多糖硫酸酯的抗輻射功能,為黑木耳多糖藥食價(jià)值提供理論支撐。本課題以氯磺酸-N,N二甲基甲酰胺法(CAS-DMF)修飾黑木耳多糖得到的黑木耳多糖硫
5、酸酯(SNAAP)作為受試物,建立60Co-γ輻射損傷模型。發(fā)現(xiàn)不同劑量的SNAAP均在一定程度上緩解60Co-γ輻射對(duì)機(jī)體免疫系統(tǒng)、造血功能、氧化平衡以及骨髓DNA產(chǎn)生的損傷,起到輻射防護(hù)效果,其中高劑量抗輻射效果最好,基本與陽性對(duì)照受試物香菇多糖的抗輻射效果相當(dāng)。其具體防護(hù)途徑如下:SNAAP能夠促進(jìn)小鼠健康生長(zhǎng),提高相關(guān)免疫器官指數(shù),促進(jìn)脾臟淋巴細(xì)胞增殖,提高IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ、IgM等免疫因子含量,使LTB4、TGF-β含量降低,因此增強(qiáng)小鼠免疫能力;SNAA
6、P通過提高小鼠外周血淋巴細(xì)胞、白細(xì)胞、紅細(xì)胞和血小板數(shù)量,增加骨髓中DNA含量起到抗輻射效果;SNAAP可以顯著降低脂質(zhì)過氧化物MDA含量,提高SOD、GSH-px、CAT酶活力,通過維護(hù)小鼠機(jī)體氧化-抗氧化系統(tǒng)平衡發(fā)揮輻射防護(hù)作用。本研究以空白組、輻射模型組和SNAAP-H組小鼠脾臟為實(shí)驗(yàn)材料,構(gòu)建脾組織miRNA文庫(kù),測(cè)序質(zhì)量值高,堿基正確識(shí)別率大于99.9%。通過深度測(cè)序鑒定已知miRNA并預(yù)測(cè)新miRNA;利用生物信息學(xué)比較并分析模型組與空白組、SNAAP-H組與模型組之間差異表達(dá)的miRNA,預(yù)
7、測(cè)靶基因并對(duì)靶基因進(jìn)行GO富集分析以及KEGG分析,篩選出與機(jī)體免疫相關(guān)的miRNA、靶基因及所在通路。結(jié)果鑒定出已知miRNA600余種,預(yù)測(cè)出新的miRNA180余種,其中已知miRNA預(yù)測(cè)出靶基因約2.1×104個(gè),新的miRNA預(yù)測(cè)出靶基因約1.8×104個(gè)。測(cè)序結(jié)果表明,輻射會(huì)導(dǎo)致脾臟已知mmu-miR-200a-3p;mmu-miR-200b-3p;mmu-miR-200c-3p和mmu-miR-375-3p表達(dá)水平上調(diào),輻射前給藥SNAAP對(duì)小鼠進(jìn)行防護(hù)以后,將使脾組織中已知mmu-miR-
8、200a-3p;mmu-miR-200b-3p;mmu-miR-200c-3p;mmu-miR-375-3p表達(dá)下調(diào);對(duì)于新的miRNA,輻射會(huì)導(dǎo)致mmu_novel_mir307表達(dá)上調(diào),mmu_novel_mir322表達(dá)下調(diào)。而給藥SNAAP防護(hù)以后,mmu_novel_mir307和mmu_novel_mir322表達(dá)水平有一定程度下降。并最終篩選出與免疫相關(guān)的差異I哈爾濱工業(yè)大學(xué)工程碩士學(xué)位論文已知mmu-miR-2