硅酸三鈣促人牙髓細(xì)胞增殖與礦化的機(jī)制研究

硅酸三鈣促人牙髓細(xì)胞增殖與礦化的機(jī)制研究

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1、上海交通大學(xué)博士學(xué)位論文硅酸三鈣促人牙髓細(xì)胞增殖與礦化的機(jī)制研究研究生:杜嶸導(dǎo)師:朱亞琴教授專(zhuān)業(yè):口腔臨床醫(yī)學(xué)研究方向:牙髓生物學(xué)資助基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金(No:81271134)上海市科委基礎(chǔ)重點(diǎn)項(xiàng)目(No:08JCl414500)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:博士培養(yǎng)單位:上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院關(guān)鍵詞:硅酸三鈣,人牙髓細(xì)胞,增殖,礦化,絲裂素活化蛋白激酶,細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2二0一三年四月IIIIII)IIIIIIIIIIIIIIIIII)IIIIIII)IIIIIIIIY2351513胍CHANISMRESEARCHONTRICALCIUMSILICATEST

2、IMULATINGDENTALPULPCELLS’PROLIFERATIONANDBIOMINERALIZATIONADissertatiOnPresentedByDuRongSupervisedByProf.Ya—QinZhuSupportedByTheNationalNaturalScienceFoundationofChina(No:81271134)ScienceandTechnologycommitteeofShanghai(No:08JCl414500)SubmittedtoAcademicDegreesEvaluationCommitteeofShangha

3、iJiaoTongUniversityforthePhl}DegreeInSchoolofMedicineShanghaiJiaoTongUniversityApril2013上海交通大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均己在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位敝儲(chǔ)虢擗日期:pI1)年9月如日上海交通大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校

4、有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)上海交通大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密口,在一年解密后適用本授權(quán)書(shū)。本學(xué)位論文屬于不保密口。(請(qǐng)?jiān)谝訣方框內(nèi)打“√”)學(xué)位論文作者簽名:毒∥緣指導(dǎo)教師簽名:物鼉?nèi)掌冢荷?、’年辱.印刀日日期:乃f;年中月砂日上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院lO級(jí)博士學(xué)位論文硅酸三鈣促人牙髓細(xì)胞增殖與礦化的機(jī)制研究摘要近年來(lái)以MTA(Mineraltrioxideaggregate)為代表的硅酸鈣類(lèi)

5、材料正成為蓋髓劑發(fā)展的一個(gè)新方向,目前關(guān)于這類(lèi)蓋髓產(chǎn)品對(duì)牙髓細(xì)胞的作用機(jī)制尚未逐一明確,但總體上可以推測(cè)其主要成分硅酸三鈣(Tricalciumsi1icate,C3S)在其中起了重要作用,明確硅酸三鈣的作用機(jī)制將有助于闡釋硅酸鈣類(lèi)蓋髓劑的作用原理,為硅酸鈣類(lèi)生物材料的進(jìn)一步發(fā)展應(yīng)用提供理論依據(jù)。許多研究證實(shí)絲裂素活化蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase,MAPK)信號(hào)通路在牙本質(zhì)一牙髓復(fù)合體損傷修復(fù)的過(guò)程中可能發(fā)揮重要作用,而針對(duì)MTA作用機(jī)制的研究顯示,MTA可通過(guò)激活MAPK通路促進(jìn)人牙髓細(xì)胞的增殖和成牙本質(zhì)分化,由此我們推測(cè)作為MT

6、A主要成分的C3S也可能通過(guò)MAPK通路影響人牙髓細(xì)胞生物學(xué)性能。本研究首先探討了硅酸三鈣對(duì)人牙髓細(xì)胞活力及生物礦化的調(diào)控作用。結(jié)果表明,硅酸三鈣作用下人牙髓細(xì)胞活力增強(qiáng),礦化相關(guān)基因DSPP(Dentinsialophosphoprotein)、OPN(Osteopontin)與OCN(Osteocalcin)等表達(dá)水平增加,細(xì)胞外基質(zhì)礦化沉積增多,由此得出結(jié)論,硅酸三鈣可促進(jìn)人牙髓細(xì)胞生物礦化。同時(shí),本研究通過(guò)Westernblot技術(shù)檢測(cè)硅酸三鈣作用時(shí)人牙髓細(xì)胞內(nèi)的MAPK信號(hào)通路關(guān)鍵信號(hào)分子的表達(dá)情況(ERKl/2、JNK與p38蛋白的磷酸化水平)。結(jié)果表明,硅酸

7、三鈣作用下ERKl/2蛋白的磷酸化水平短時(shí)上調(diào),30分鐘時(shí)最強(qiáng);..INK與p38蛋白磷酸化水平無(wú)顯著改變。以上結(jié)果表明,硅酸三鈣可激活ERKl/2信號(hào)通路。最后,本研究采用U0126阻斷ERKl/2信號(hào)通路后觀察硅酸三鈣作用下人牙髓細(xì)胞的增殖與生物礦化情況。研究發(fā)現(xiàn):U0126可抑制ERKl/2蛋白的磷酸化,U0126聯(lián)合硅酸三鈣作用組的人牙髓細(xì)胞增殖顯著下降,生物礦化較硅酸三鈣組有所減少上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院10級(jí)博士學(xué)位論文但仍高于空白組。這些結(jié)果表明:硅酸三鈣確實(shí)可以通過(guò)ERKl/2信號(hào)途徑參與調(diào)控人牙髓細(xì)胞的增殖、分化與

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