鈣離子在P物質(zhì)促胃癌細(xì)胞增殖過(guò)程中作用的研究

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1、第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文鈣離子在P物質(zhì)促胃癌細(xì)胞增殖過(guò)程中作用的研究姓名:豐帆申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):外科學(xué)(普通外科)指導(dǎo)教師:王為忠20070501獨(dú)創(chuàng)性聲明秉承學(xué)校嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膶W(xué)風(fēng)與優(yōu)良的科學(xué)道德,本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果,不包含本人或他人已申請(qǐng)學(xué)位或其他用途使用過(guò)的成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了致謝。申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處,本人承擔(dān)一切相關(guān)責(zé)任。論文作者簽名:日期:保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)聲明

2、本人完全了解第四軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定,即:研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬第四軍醫(yī)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后,發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位仍然為第四軍醫(yī)大學(xué)。學(xué)校可以公布論文的全部或部分內(nèi)容(含電子版,保密內(nèi)容除外),可以采用影印,縮印或其他復(fù)制手段保存論文。學(xué)校有權(quán)允許論文被查閱和借閱,并在校園網(wǎng)上提供論文內(nèi)容的瀏覽和下載服務(wù)。論文作者簽名:導(dǎo)師簽名:日期:第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文鈣離子在P物質(zhì)促胃癌細(xì)胞增殖過(guò)程中作用的研究研究生:豐帆導(dǎo)師:王為忠教授(主任醫(yī)師)輔導(dǎo)老師:張洪偉副教授第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院胃腸外科,西安710032中文摘要【背景

3、】感覺(jué)神經(jīng)肽P物質(zhì)(substanceP,SP)是主要的速激肽之一,廣泛分布于包括神經(jīng)系統(tǒng)在內(nèi)的各組織中,SP除具有神經(jīng)遞質(zhì)和炎性介質(zhì)的作用外,對(duì)多種細(xì)胞還具有促有絲分裂活性。近年來(lái)大量的實(shí)驗(yàn)研究證明SP對(duì)多種細(xì)胞有促有絲分裂活性,促進(jìn)細(xì)胞的增殖,其中包括平滑肌細(xì)胞、上皮細(xì)胞以及一些神經(jīng)源性的腫瘤細(xì)胞等。前期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)人的胃癌組織內(nèi)分布著較正常胃組織更多的P物質(zhì)免疫陽(yáng)性神經(jīng)纖維。它們的分布特征表明其是由于胃癌組織的存在而誘發(fā)再生的神經(jīng)纖維。該結(jié)果表明胃癌組織內(nèi)分布的肽能神經(jīng)纖維可能直接促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖。SP是通過(guò)與速激肽的受體(NK)結(jié)合后發(fā)揮其生理作用的。SP與NK-1受體結(jié)

4、合可激活引起細(xì)胞肌醇磷脂的水解,2+細(xì)胞內(nèi)Ca升高,cAMP水平增高以及絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)的活化,從而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)一系列信號(hào)事件,激動(dòng)相應(yīng)的第二信使來(lái)啟動(dòng)多個(gè)代謝途徑。最終導(dǎo)致細(xì)胞的增殖?!灸康摹垦芯课赴┘?xì)胞系MKN45表面NK-1受體的表達(dá),SP及拮抗劑(NK-1受體拮抗劑、尼卡地平和新霉素)對(duì)體外培養(yǎng)的人胃癌細(xì)胞的增殖的3第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文調(diào)節(jié)作用,探討鈣信號(hào)在其中的作用?!痉椒ā恳缘谒拇宋赴┘?xì)胞系MKN45為研究對(duì)象,以不同濃度的SP刺激,觀察其對(duì)細(xì)胞增殖的影響,又分別以ASN-1377642(NK-1受體拮抗劑)、新霉素(PIP2拮抗劑)和尼卡地平(

5、鈣通道阻斷劑)為干預(yù)因素,觀察它們對(duì)P物質(zhì)作用的影響,并用激光共聚焦掃描顯微鏡觀察在該過(guò)程中鈣離子濃度的變化?!窘Y(jié)果】SP在10nmol/L~100nmol/L范圍內(nèi)對(duì)人胃癌細(xì)胞呈劑量依賴性-6增生刺激。ASN-1377642(NK-1受體拮抗劑)、新霉素(10mol/L)和尼卡地平-6(10mol/L)均可以明顯的抑制SP的促增殖作用,增加劑量抑制率不再增加。在Hanks液中,SP可以顯著升高細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,ASN-1377642和尼卡地平可以顯著的抑制這一效應(yīng),在D-Hanks液中,SP同樣可以增加細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度,但是幅度較在Hanks液中有顯著性降低?!窘Y(jié)論

6、】1、胃癌細(xì)胞系MKN45表達(dá)速激肽受體NK-1。2、SP通過(guò)與受體NK-1結(jié)合對(duì)胃癌細(xì)胞系MKN45有促增殖作用。3、SP與受體NK-1結(jié)合后引起細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的升高。4、SP導(dǎo)致的細(xì)胞內(nèi)游離鈣離子濃度的升高主要通過(guò)細(xì)胞外鈣離子內(nèi)流和鈣庫(kù)鈣離子釋放。5、MKN45游離鈣離子濃度的升高在SP促增值效應(yīng)中起了重要的作用。6、鈣離子通道阻斷劑及PIP2拮抗劑可抑制由SP誘發(fā)的胃癌細(xì)胞增殖。7、NK-1拮抗劑、鈣離子通道阻斷劑及PIP2拮抗劑具有潛在的抗癌活性?!娟P(guān)鍵詞】鈣;P物質(zhì);胃癌細(xì)胞;細(xì)胞增殖;激光共聚焦掃描顯微鏡4第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文Roleofcalciumo

7、ntheproliferativeeffectofsubstancePongastriccancercellsCandidateformaster:FengFanSupervisor:Prof.WangWeizhongAssistantTutor:Prof.ZhangHongweiDepartmentofGastrointestinalSurgery,XijingHospitalFourthMilitaryMedicalUniversityXi’an710032,ChinaAbstract【Backgr

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