鈣離子在p物質(zhì)促胃癌細胞增殖過程中的作用論文

《鈣離子在p物質(zhì)促胃癌細胞增殖過程中的作用論文》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術論文-天天文庫。

1、鈣離子在P物質(zhì)促胃癌細胞增殖過程中的作用論文【摘要】目的:研究P物質(zhì)（SP）對體外培養(yǎng)的人低分化胃癌細胞系MKN45增殖的調(diào)節(jié)作用,探討鈣信號在其中的作用.方法:以第4代人胃癌細胞系MKN45為研究對象,用MTT方法觀察了不同濃度的SP，ASN1377642（NK1受體拮抗劑）、新霉素（PIP2拮抗劑）、尼卡地平(鈣通道阻斷劑）對MKN45增殖的影響.結果:對于體外培養(yǎng)的人低分化胃癌細胞系，不同濃度的SP(10,50,100nmol/L)可以顯著的刺激MKN45的增殖，其增殖率分別為57.23%，63.75%，52.95%（P0.05）.不同濃度的ASN1377642、尼卡地平和新霉素

2、與MKN45預先孵育后SP促MKN45的增殖率顯著降低（P0.05），但是增加上述藥物劑量其抑制效應并無顯著增加（P0.05）.結論:SP可通過與NK1結合有效促進胃癌細胞增殖.ASN1377642,尼卡地平和新霉素可以顯著的抑制SP的促增殖效應，Ca2+可能在該過程中起重要作用.【關鍵詞】P物質(zhì)胃腫瘤細胞增殖0引言感覺神經(jīng)肽P物質(zhì)（substanceP,SP）是主要的速激肽之一.freela公司）；小牛血清（Sigma）；RPMI1640培養(yǎng)基（Gibco公司）；CO2孵箱(日本池本理化工業(yè)株式會社)，酶聯(lián)檢測儀(美國BioRad550型).1.2方法1.2.1細胞培養(yǎng)將人胃癌MKN

3、45細胞培養(yǎng)于含100mL/L小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中，添加青霉素及鏈霉素等.于37℃，50mL/LCO2的條件下常規(guī)培養(yǎng).取指數(shù)生長期2×107/L細胞傳代及接種于96孔板中，同時加入處理藥物，培養(yǎng)48h.1.2.2實驗處理及分組將2×107/L細胞接種于96孔板，每組8個復孔.實驗組分組如下：①分別以10，50,100nmol/LSP與MKN45細胞供孵育48h；②分別以50，250，500nmol/LASN1377642預先與MKN45細胞供孵育1h，然后加入10nmol/LSP孵育48h；③分別以1×10-7，1×10-6，1×10-5mol/L尼卡地平預先與MKN45細

4、胞供孵育1h，然后加入10nmol/LSP孵育48h；④分別以1×10-7,1×10-6,1×10-5mol/L新霉素預先與MKN45細胞供孵育1h，然后加入10nmol/LSP孵育48h.同時設立空白對照組.1.2.3細胞增殖實驗經(jīng)各組藥物處理后的細胞，棄上清，每孔加入200μL新配制的5g/LMTT，37℃繼續(xù)孵育4h，棄上清加入150μL的二甲基亞砜（DMSO），混勻后用酶標儀在490nm波長測定吸光度（A）.腫瘤細胞增殖率=（實驗孔測定值/對照孔測定值-1）×100%.統(tǒng)計學處理：用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，所有計量資料以x±s表示，統(tǒng)計分析方法采用LSDt檢驗，以P0.05作為具

5、有顯著性差異.2結果2.1不同濃度的SP促胃癌細胞增殖作用10，50,100nmol/LSP具有明顯的促胃癌細胞MKN45增殖的作用.3種不同濃度的SP促胃癌細胞的增殖率分別為：57.23%，63.75%，52.95%（P0.05）.隨著SP濃度的增加，SP促胃癌細胞增殖率并不顯著增加，在100nmol/L濃度時，細胞增殖率反有下降趨勢（圖1）.2.2不同濃度的ASN1377642對SP促胃癌細胞增殖效應的影響用ASN1377642與MKN45預先孵育后能顯著抑制SP的促胃癌細胞增殖效應.50，250，500nmol/LASN1377642預先孵育后細胞的增殖率分別為24.54%，14

6、.64%，14.23%（P0.05）.隨著ASN1377642濃度的增加，其抑制效應沒有顯著的增加（P0.05，圖2）.2.3不同濃度的尼卡地平對SP促胃癌細胞增殖效應的影響尼卡地平與MKN45預先孵育后能顯著抑制SP的促胃癌細胞增殖效應.1×10-7，1×10-6，1×10-5mol/L尼卡地平預先與MKN45細胞供孵育后細胞的增殖率分別為21.88%，19.58%，19.38%（P0.05）.隨著尼卡地平濃度的增加，其抑制效應無顯著增加（P0.05，圖3）.2.4不同濃度的新霉素對SP促胃癌細胞增殖效應的影響新霉素與MKN45預先孵育后能顯著的抑制SP的促胃癌細胞增殖效應.1×10-7

7、,1×10-6,1×10-5mol/L新霉素預先與MKN45細胞供孵育后細胞的增殖率分別為16.73%，14.42%，14.23%（P0.05）.隨著新霉素濃度的增加，其抑制效應無顯著增加（P0.05，圖4）.3討論感覺神經(jīng)肽是廣泛存在于中樞和外周神經(jīng)中的一類神經(jīng)遞質(zhì)，包括SP,.freelol/L時其增殖率反而有所下降的機制還不清楚.我們用不同濃度的NK1受體拮抗劑ASN1377642預先與MKN45孵