葡萄漆酶的畢赤酵母異源表達(dá)純化及酶學(xué)特性與功能研究

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1、‘__~PURIFICATION,CHARACTERIZATIONANDFUNCTIoNALANALYSIS0FLACCASEFROM多鉚缸?vtnt]eraByrYa-qiuLinTheDissertationSubmiaedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementsForMaster’SDegreeofAgriculturalScienceSupervisedbyProf.Quan—hongYaoCollegeofHorticulture,NanjingA

2、griculturalUniversityNanjing210095,RR.ChinaCompletedinApril,2013CommencementinMay,2013原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者(需親筆)簽名:吲、殛乩Ⅺ}{年6月p日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校

3、有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文。保密口,在——年解密后適用本授權(quán)書(shū)。本學(xué)位論文屬于不保密以(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“巾)學(xué)位論文作者(需親筆)簽名:卅、釔啦山?jīng)癴;年6月年日導(dǎo)師(需親筆)簽名:慚訓(xùn)年‘月壚日目錄摘要??????????????.????????.???????????????..。?????.IABsTRACT???????????.

4、..?????????????.???????????????Il縮蛹說(shuō)明???....?????????????????????????????。V第一章文獻(xiàn)綜述?????????????????????????????..11引‘言?????????????????????????????????????????12漆酶的研究進(jìn)展??????????????????????????12.1漆酶?????????????????????????????????????..12.2漆酶的來(lái)源?????????????????????????.12.3漆

5、酶的結(jié)構(gòu)?????????????????????????.32.4漆酶催化氧化作用的底物???????????????????.42.5漆酶催化氧化反應(yīng)機(jī)理????????????????????.42.6漆酶的特性?????????????????????????.52.7漆酶的功能與應(yīng)用??????????????????????.62.7.1漆酶的功能???????????????????????62.7.2漆酶的應(yīng)用???????????????????????73畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)?????????????????????????83.1主要

6、優(yōu)點(diǎn)??????????????????????????.93.2常用的菌株類(lèi)型???????????????????????.93'3目的基因的整合方式?????????????????????..93.4畢赤酵母表達(dá)載體??????????????????????lO3.5提高蛋白表達(dá)量的對(duì)策????????????????????114研究的目的意義及內(nèi)容??????????????????????.124.1研究的目的意義???????????????????????124.2研究?jī)?nèi)容??????????????????????????l2第二

7、章葡萄濠酶基因VvLCCI的合成??....????????????¨..????131材料與方法???????????????????????????.131.1試驗(yàn)材料??????????????????????????131.2試驗(yàn)方法??????????????????????????142結(jié)果與分析???????????????????????????.202.1VvLa凹基因的合成?????????????????????.203討論????????????????????????????????????????.23第三章葡萄漆酶的畢赤酵

8、母異源表達(dá)及純化????????????????25I材料與方法???????????????

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