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1、中圖分類號(hào)：563.9碩士學(xué)位論文鈣結(jié)合蛋白S100A9在小鼠銅綠假單胞菌肺炎中的表達(dá)及意義院（系）、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名毛安強(qiáng)學(xué)科、專業(yè)內(nèi)科學(xué)導(dǎo)師姓名湛曉勤教授二Ο一三年四月1目錄1鈣結(jié)合蛋白S100A9在小鼠銅綠假單胞菌肺炎中的表達(dá)及意義…………………………………………………………...…....11.1中文摘要…………………………………………………….......31.2英文摘要……………………………………………………...…51.3前言…………………………………………………………...…71.4材料與方法………………………………………………….…111.5結(jié)果……
2、…………………………………………………….…171.6討論………………………………………………………….…251.7結(jié)論………………………………………………………….…301.8參考文獻(xiàn)…………………………………………………….…311.9英漢縮略詞對照表………………………………………….…342致謝………………………………………………………….…353綜述…………………………………………………………….362鈣結(jié)合蛋白S100A9在小鼠銅綠假單胞菌肺炎中的表達(dá)及意義摘要目的：觀察小鼠銅綠假單胞菌肺炎肺組織中鈣結(jié)合蛋白S100A9mRNA表達(dá)，并同時(shí)測定對應(yīng)小鼠血液中S10
3、0A9鈣結(jié)合蛋白含量，觀察肺組織的病理改變，探討鈣結(jié)合蛋白S100A9在銅綠假單胞菌所致小鼠肺部感染中的地位與作用。方法：小鼠36只，按隨機(jī)數(shù)字表分為空白對照組12只、模型組小鼠24只。通過經(jīng)環(huán)莢膜穿刺注射銅綠假單胞菌菌液建立肺部感染模型。空白對照組（經(jīng)環(huán)莢膜8注射等量的2個(gè)麥?zhǔn)蠁挝粷舛龋?×10cfu/ml）0.6ml的銅綠假單胞菌菌液，造模過程中死亡2只）、模型組（經(jīng)環(huán)莢膜注射等量的2個(gè)麥?zhǔn)蠁挝粷舛鹊你~綠假單胞菌菌液0.6ml，造模中死亡5只,分別在在3小時(shí)和9小時(shí)2個(gè)時(shí)間點(diǎn)各處死9和10只）。取小鼠右肺下葉HE染色觀察肺組織病理，觀察空白對照組，3h模型組及9h模型組
4、的病理改變；使用普通PCR檢測系統(tǒng)對三組小鼠肺組織中S100A9mRNAPCR反應(yīng)進(jìn)程中的產(chǎn)量進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測,最終對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,從而比較三組小鼠S100A9mRNA表達(dá)，并同步采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法分別測定三組小鼠血液中S100A9以及TNF-a的含量，比較三組小鼠血液中生成S100A9鈣結(jié)合蛋白的差異及與TNF-a變化的相關(guān)系。結(jié)果：（1）病理觀察：大鼠右下肺肺組織HE染色200倍光鏡下病理結(jié)果顯示，正常對照組（1組）肺泡結(jié)構(gòu)較為均勻與清晰，有少許淋巴細(xì)胞與巨噬細(xì)胞侵潤；模型組（3h組）主要為肺泡炎性改變，肺泡內(nèi)及周圍可見滲出，中性粒細(xì)胞和淋3
5、巴細(xì)胞，巨噬細(xì)胞浸潤;模型組（9h組）肺泡炎性最嚴(yán)重，肺泡內(nèi)及周圍可見大量滲出，大量中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，巨噬細(xì)胞浸潤，病理炎性改變明顯重于3h組。（2）普通PCR實(shí)驗(yàn):本實(shí)驗(yàn)根據(jù)電泳后條帶亮度的強(qiáng)弱來判斷模板拷貝數(shù)的高低，或者是表達(dá)量的高低。實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出s100A9mRNA在第3h，9h組中的條帶亮度強(qiáng)度明顯高于空白組，提示S100A9表達(dá)量模型組明顯高于對照組,且經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析后3h與對照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05)，與9h模型組比較（P<0.05）差異有意義。（3）S100A9鈣結(jié)合蛋白ELISA檢測：結(jié)果顯示3h，9h組外周血中S100A9的含量明顯高于空白組，
6、且以3h組增高最明顯，3h組與空白組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）與9h組比較（P<0.05）有差異。（4）腫瘤壞死因子TNF-a的ELISA檢測結(jié)果顯示：3h，9h組外周血中TNF-a的含量明顯高于空白組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。（5）通過對S100A9鈣結(jié)合蛋白與腫瘤壞死因子-a的相關(guān)性分析后，得出兩者之間的變化趨勢存在正相關(guān)，3h模型組r=0.77；9h模型組，r=0.653.結(jié)論：（1）.鈣結(jié)合蛋白S100A9參與小鼠銅綠假單胞菌肺部炎癥反應(yīng)。（2）.鈣結(jié)合蛋白S100A9在小鼠銅綠假單胞菌肺炎中與經(jīng)典炎性因子TNF-a存在密切相關(guān)。關(guān)鍵詞：S1
7、00A9鈣結(jié)合蛋白；S100A9mRNA；腫瘤壞死因子-a（TNF-a）;銅綠假單胞菌肺炎；4CalciumbindingproteinexpressionandsignificanceofS100A9inlungtissueinmiceinfectedbyPseudomonasaeruginosaAbstractObjective:thepathologicalchangesoflungtissueinmicewithPseudomonasaeruginosapneumoniainfectionsobserved
