副溶血性弧菌和大腸桿菌在魚鱗表面形成生物被膜的相關(guān)研究.pdf

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1、學(xué)校代碼:10264研究生學(xué)號(hào):M150208375上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文副溶血性弧菌和大腸桿菌在魚鱗表面形成生題目:物被膜的相關(guān)研究Studyontheformationofbiofilmonthesurface英文題目:offishscalebyVibrioparahaemolyticusandEscherichiacoli專業(yè):食品科學(xué)與工程研究方向:食品安全與風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估姓名:柴旭鋒指導(dǎo)教師:趙勇教授二O一八年四月二十日1上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:我恪守學(xué)術(shù)道德,崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文,是

2、本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫,我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé),并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名:日期:年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或

3、掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□,在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:日期:年月日日期:年月日2上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會(huì)成員名單姓名工作單位職稱備注主席委員委員委員委員委員委員秘書答辯地點(diǎn)答辯日期3副溶血性弧菌和大腸桿菌在魚鱗表面形成生物被膜的相關(guān)研究摘要食源性致病菌不僅可以吸附在玻璃、不銹鋼以及塑料等常用于食品加工業(yè)以及食品運(yùn)輸?shù)姆巧锊牧媳砻?,還可以在吸附表面形成生物被膜,導(dǎo)致食品加工和運(yùn)輸過(guò)程中產(chǎn)生交叉污染,對(duì)公眾公共健康造成嚴(yán)重危害。目前關(guān)于生物被膜的

4、研究主要集中在非生物材料表面,因而對(duì)生物材料表面生物被膜的相關(guān)研究具有很重要的使用價(jià)值。本文以食源性致病菌中最具代表性的副溶血性弧菌和大腸桿菌作為研究對(duì)象,首先用電子掃描顯微鏡技術(shù)和胞外聚合物分析法研究了兩種菌在最適生長(zhǎng)溫度下在魚鱗表面形成生物被膜的動(dòng)態(tài)過(guò)程,并系統(tǒng)地分析了兩種菌在不同溫度條件下(4oC、10oC、15oC、25oC、37oC和40oC)在魚鱗表面形成生物被膜的情況,其次還研究了酸性電解水以及無(wú)菌自來(lái)水對(duì)兩種菌在魚鱗表面形成的生物被膜的清除情況,最后利用原子力顯微鏡以及胞外聚合物分析法分析了兩種菌在魚鱗表

5、面形成的生物被膜中細(xì)菌的粘附能力的差異。研究結(jié)果如下:(1)利用電子掃描顯微鏡技術(shù)結(jié)合胞外聚合物分析法對(duì)副溶血性弧菌和大腸桿菌在魚鱗表面形成生物被膜的動(dòng)態(tài)過(guò)程進(jìn)行分析。結(jié)果表明,副溶血性弧菌和大腸桿菌在形成生物被膜的過(guò)程中具有明顯的時(shí)間差異,但都經(jīng)歷了細(xì)菌的粘附期(0-24h)和(0-36h)、生物被膜的形成期(24-36h)和(36-48h)、生物被膜的成熟期(36-48h)和(48-60h)以及散播期(48h以后)和(60h以后);(2)副溶血性弧菌和大腸桿菌在本研究測(cè)定的所有溫度條件下在魚鱗表面均可以形成生物被膜,

6、且在不同溫度條件下在魚鱗表面形成生物被膜的能力次序?yàn)椋?7oC>40oC>25oC>15oC>10oC>4oC。(3)利用電子掃描顯微鏡技術(shù)結(jié)合胞外聚合物分析法對(duì)酸性電解水及無(wú)菌自來(lái)水清除副溶血性弧菌和大腸桿菌在魚鱗表面形成的生物被膜的效果進(jìn)行研究。結(jié)果表明,酸性電解水對(duì)兩種菌在本研究測(cè)定的所有溫度條件下在魚鱗表面形成的生物被膜均具有清除效果,且對(duì)大腸桿菌生物被膜的清除能力要高于對(duì)副溶血性弧菌生物被膜的清除能力。浸泡5min后兩種菌的生物被膜均變得稀薄,三維立4體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)被破壞,細(xì)菌表面變得粗糙甚至出現(xiàn)破裂現(xiàn)象。延長(zhǎng)處理

7、時(shí)間酸性電解水對(duì)生物被膜的清除效率也明顯增加,連續(xù)10min處理后,酸性電解水對(duì)副溶血性弧菌和大腸桿菌在魚鱗表面形成的生物被膜的清除率分別達(dá)到了60%以上和90%以上。(4)利用原子力顯微鏡技術(shù)結(jié)合胞外聚合物分析法對(duì)副溶血性弧菌和大腸桿菌在魚鱗表面形成的生物被膜中細(xì)菌的粘附能力差異進(jìn)行初步研究。結(jié)果表明,在魚鱗表面粘附能力:副溶血性弧菌>大腸桿菌;在玻璃表面粘附能力:副溶血性弧菌>大腸桿菌;魚鱗表面副溶血性弧菌和大腸桿菌粘附能力強(qiáng)于其在玻璃上的粘附能力;成熟生物被膜中副溶血性弧菌的粘附能力要強(qiáng)于其他生長(zhǎng)階段的生物被膜內(nèi)細(xì)

8、菌的粘附能力。關(guān)鍵詞:生物被膜;副溶血性弧菌;大腸桿菌;酸性電解水;形成;清除;粘附能力5StudyontheformationofbiofilmonthesurfaceoffishscalebyVibrioparahaemolyticusandEscherichiacoliABSTRACTFood-bornepat

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