奶山羊乳腺組織差異表達(dá)mirna功能預(yù)測(cè)及mir-135a對(duì)prlr基因靶向調(diào)控研究

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2、解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。論文作者簽名:弛導(dǎo)師簽名:燦El期:函f切、6f。符號(hào)說(shuō)明目錄中文摘要????????????????????????????????..III』§L】[1STRACT?????????????????????????????????????????.III1引言?????????????????????????????????????????????..11.1MicroRNA的研究進(jìn)展??????????????????????????11.1.1miRNA的基本特征及作用機(jī)制?????????????????????.11.1.2miRNA的鑒定???????

3、?????????????????????.21.1-3miRNA靶基因的預(yù)測(cè)及驗(yàn)證??????????????????????.31.1.4乳腺發(fā)育及泌乳相關(guān)miRNA的研究進(jìn)展?????????????????.51.1.5miR.135a的在動(dòng)物中的研究進(jìn)展????????????????????..61.2乳腺發(fā)育、泌乳及退化相關(guān)功能基因及通路????????????????..71.2.1GO注釋與KEGG注釋?????????????????????????71.2.2JAK.STAT信號(hào)通路??????????????????????????81.3PRLR研究進(jìn)展???

4、??????????????????????????91.4本研究的目的意義???????????????????????????102材料和方法???????????????????????????????112.1數(shù)據(jù)挖掘與分析????????????????????????????112.1.1試驗(yàn)數(shù)據(jù)??????????????????????????????.112.1.2主要數(shù)據(jù)庫(kù)及生物分析軟件??????????????????????.112.1.3差異表達(dá)miRNA的篩選與聚類(lèi)?????????????????????122.1.4差異表達(dá)miRNA的靶基因的預(yù)測(cè)??

5、??????????????????122.1.5miRNA及靶基因的生物信息學(xué)分析???????????????????132.2分子試驗(yàn)材料與方法??????????????????????????132.2.1菌株、載體和細(xì)胞??????????????????????????.132.2.2主要儀器設(shè)備????????????????????????????.132.2.3主要試劑及來(lái)源???????????????????????????.142.2.4常用試劑的配置???????????????????????????.152.2.5miR.135a真核表達(dá)載體及PRLR報(bào)

6、告基因載體構(gòu)建????????????.152.2.6重組載體去內(nèi)毒素質(zhì)粒提取??????????????????????.2l2.2.7乳腺上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)染??????????????????????????.222.2.8熒光定量PCR檢測(cè)mir-135a及PRLR基因表達(dá)量?????????????232.2.9雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)驗(yàn)證miR-135a與PRLR靶向關(guān)系?????????262.2.10Westernblot檢驗(yàn)PRLR蛋白表達(dá)量變化????????????????一272.2.1l統(tǒng)計(jì)分析???::..??????????????????????????.293結(jié)

7、果與分析???????????????????????????????303.1miRNA表達(dá)譜的數(shù)據(jù)挖掘及生物信息學(xué)分析???????????????..303.1.1差異表達(dá)miRNA的篩選與聚類(lèi)????????????????????..303.1.2差異表達(dá)miRNA的靶基因預(yù)測(cè)?????????????????????303.1.3miRNA靶基因的生物信息學(xué)分析????????????????????323.2miR.135a與PR

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