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《文昌魚斑馬魚早期胚胎發(fā)育中gaba,a受體結合蛋白基因的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、山東大學博士學位論文文昌魚斑馬魚早期胚胎發(fā)育中GABA<,A>受體結合蛋白基因的研究姓名：梁愷龍申請學位級別：博士專業(yè)：發(fā)育生物學指導教師：張紅衛(wèi)20040408山東大學博士擘住論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經注明引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律責任由本人承擔。論文作者簽名：，蘭基!絲It期：竺壘笪關于學位論文使用授權的聲明本人完全了解山東大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學
2、校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權山東大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。(保密論文在解密后應遵守此規(guī)定)論文作者簽名理趁導師簽名：’暨血互日期：z型山末大學博士學位論文符號說明英文縮寫英文全名中文APAlkalinephosphatase堿性磷酸酶BCIPBSADEPCDIGDMFDMSOEDTAEGTAMoPSNBTPBSPCRPVPU5：b。oPo-4．-ohlo‘o’3-ind5-8-4一氯一3．吲哚磷酸鹽0ly-t)llOst)hate?
3、-?’。y?LuBovineserumalbum牛血清白蛋白Diethylpyrocarbonate焦碳酸二乙酯Digoxigenin地高辛Dimethylformamid二甲基甲酰胺Dimethylsulfoxide二甲基亞砜Ethylenediaminetetra．aceticacideEthyleneglycolbisf2一amino—ethyl-ether)·tetraaceticacid乙二胺四乙酸乙二醇．雙一(2-氨基乙基)四乙酸3。[N—mo。：1鼎i烈．．3．(N一嗎啡啉)丙磺酸propane-BIonlacidSJC?。“???Nitrobluetetrazo
4、lium硝基四氮唑鹽Phosphatate—bufferedsalinePolymerasechainreactionPoIyvinylpyrrolidoneUnit磷酸鹽緩沖液聚合酶鏈式反應聚乙烯吡咯烷酮酶活單位3山東大學博士學位論文文昌魚斑馬魚早期胚胎發(fā)育中GABAA受體結合蛋白基因的研究摘要文昌魚(Amphioxus)屬頭索動物(Cephalochordata)，代表著從無脊椎動物到脊椎動物進化過程中一個重要的過渡階段，被認為是現(xiàn)存的與脊椎動物最接近的無脊椎動物，是研究動物進化和動物胚胎發(fā)育的典型材料。本文介紹了從cDNA文庫得到的一個長度為996bp的cDNA序列，該序
5、列編碼117個氨基酸的與其他物種的GABARAPL2同源性很高的蛋白質，故命名為文昌魚GABARAPL2。由GABARAPL2演繹的蛋白質與人的GABARAPL2、小鼠GABARAPL2相同性均為75％；與果蠅、瘧蚊和線蟲的相同性分別為64％、64％和61％。利用clustalX1_8l對青島文昌魚GABARAPL2和其他同源的已知蛋白進行了比較，同時利用TREEPUZZLE5．O分析獲得系統(tǒng)進化樹。由系統(tǒng)進化樹可見，哺乳動物的GABARAP蛋白分成2部分，其中GABARAP、GABARAPLl和GABARAPL3序列的同源性較高，GABARAPL2與它們的同源性較差，單列一枝
6、。同源性較高的GABARAP、GABARAPLl和GABARAPL3也分為兩部分，Ll和L3的同源性很高，而GABARAP則與GABARAPLl和GABARAPL3不在同一枝上。從進化樹看出文昌魚的GABARAPL2是單列一枝的，只是與哺乳動物GABARAPL2的同源性較高一些。SouthernBlotting中，用多種酶切后的基因組DNA與隨機引物雜交，結果只有一條帶存在，顯示在文昌魚中GABARAPL2可能只有一個拷貝。原位雜交結果顯示GABARAPL2在文昌魚早期發(fā)育過程中有兩個明顯的表達期：在受精卵和早期卵裂時表達；其后在囊胚期和原腸早期沒有表達：到晚原腸和神經胚期及以
7、后的各時期又檢測到GABARAPL2的表達。早期卵裂存在的GABARAPL2的mRNA可能是母源性表達的結果：而囊胚和原腸早期不表達，可能是經歷了和其他大多數(shù)動物相似的囊胚中期轉化過程；晚原腸時期GABARAPL2的表達量又達到可檢測的水平，這個時期的GABARAPL2mRNA應該是合予類型表達的產物。合子型GABARAPL2的表達最初見于原腸晚期在胚孔附近靠近背唇的地方，之后在神經板處有強表達，隨著神經管的形成，GABARAPL2在腦泡、神經管、神經腸管和發(fā)育中的內4山東太學博士學位論文胚
