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《酚氧化酶原(propo)編碼基因的原核表達(dá)及其體內(nèi)表達(dá)水平研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、關(guān)于學(xué)位論文原創(chuàng)性和使用授權(quán)的聲明本人所呈交的學(xué)位論文,是在導(dǎo)師指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)研究所取得的成果6對(duì)在論文研究期間給予指導(dǎo)、幫助和做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體,均在文中明確說(shuō)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。本人完全了解山東農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留和使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留和按要求向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文紙質(zhì)本和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)山東農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文,同時(shí)授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全
2、文數(shù)據(jù)庫(kù)》并向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。導(dǎo)師簽名:日符號(hào)說(shuō)明Amp:ampicillin,氨芐青霉素Kan=kanamycinMonosulfate,硫酸卡那霉素cDNA:complementarydna,互補(bǔ)DNADEPC:diethylpyrocarbonate,焦炭酸-71酯EB:ethidiumbromide,溴化乙錠EDTA:ethylenediaminetetraaceticacid,乙二胺四乙酸kDa:kilodalton,千道爾頓RNA:ribonucleicacid,核糖核酸mRNA=messe
3、ngerrna,信使核糖核酸OD:opticaldensity,光密度PCR:polymerasechainreaction,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)RT-PCR=reversetranscriptpcr,反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)phisoelectricpoint,等電點(diǎn)PO:Phenoloxidase,酚氧化酶proPO:Prophenoloxidase,酚氧化酶酶原Tris:trisdroxymethyaminomethane,三羥甲基氨基甲烷IPTG:Isopropyl13-D.111iogalactopyranoside,異丙基?13D硫代吡
4、喃半乳糖苷AP:AmmoniumPerSulfate,過(guò)硫酸銨TEMED:N,N,N’’N’.Tetramethylethylenediamine,N,N,N’,N’一四甲基7,--胺PBS:phosphateBuffersolution,磷酸鹽緩沖液NC膜:nitrocellulosefiltermembrane,硝酸纖維素膜摘要???-Abstract1前言??目錄?IⅢ11.1酚氧化酶研究概況???????????????????????????·11.1.1酚氧化酶的起源??????????????????????????????
5、11.1.2酚氧化酶的生化特性????????????????????????????21.1.3酚氧化酶的分子生物學(xué)研究????????????????????????31.1.4酚氧化酶基因的調(diào)控概述??????????????????????????41.1.5酚氧化酶的功能??????????????????????????????41.1.6酚氧化酶重組蛋白的體外表達(dá)???????????????????????61.2選題目的和意義????????????????????????????·71-3本研究的技術(shù)路線???????
6、????????????????????·82材料與方法92.1試蟲(chóng)飼養(yǎng)???????????????????????????????·92.2試劑及儀器設(shè)備????????????????????????????·92.2.1主要試劑?????????????????????????????????.92.2.2試劑配制?????????????????????????????????1o2.2.3儀器設(shè)備?????????????????????????????????122.3小菜蛾總RNA的提取、鑒定及cDNA合成??????·?
7、?????????122.3.1小菜蛾總RNA的提取??????????????????????????122.3.2小菜蛾總RNA的檢測(cè)???????????????????????????132.3.3小菜蛾第一鏈cDNA合成?????????????????????????142.4PxPP01編碼蛋白序列全長(zhǎng)的克隆????????????????????·152.4.1引物的設(shè)計(jì)????????????????????????????????152.4.2PCR反應(yīng)?????????????????????????????????
8、.162.4.3PCR產(chǎn)物的純化?????????????????????????????..172.4.4轉(zhuǎn)化大腸桿菌和克隆測(cè)序?????????????????????????.182.5