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《花生網(wǎng)斑病菌鑒定及其誘導(dǎo)下花生轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、分類號(hào)密級(jí)UDC單位代碼碩士學(xué)位論文花生網(wǎng)斑病菌鑒定及其誘導(dǎo)下花生轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究PathogenicIdentificationofPeanutWebBlotchandStudiesonTranscriptomicsofPeanutInducedbyPhomaarachidicola研究生姓名呂賓指導(dǎo)教師鄢洪海教授學(xué)科專業(yè)植物病理學(xué)研究方向植物病理生理中國(guó).青島二零一八年六月PathogenicIdentificationofPeanutWebBlotchandStudiesonTranscriptomicsofPeanutI
2、nducedbyPhomaarachidicolaThesissubmittedtoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyLvBin（DepartmentofAgronomy）Supervisor:YanHonghaiQingdao.ChinaJune,2018獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論
3、文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果，也不包含為獲得青島農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。研究生簽名：時(shí)間：年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解青島農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留送交論文的復(fù)印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意青島農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研究生簽名：時(shí)間：年月日導(dǎo)師簽名：時(shí)間：年月
4、日青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要花生網(wǎng)斑病菌鑒定及其誘導(dǎo)下花生轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究摘要花生（ArachishypogaeaL.）是世界上最重要的油料作物之一，因其對(duì)環(huán)境要求較低，種植適應(yīng)性強(qiáng)，而在世界各地廣泛種植。中國(guó)是世界上最大的花生生產(chǎn)國(guó)、消費(fèi)國(guó)和出口國(guó)。近年來(lái)，由花生莖點(diǎn)霉（PhomaarachidicolaMarasasPauer&Boerema）引起的花生網(wǎng)斑病為害日益嚴(yán)重。從分子水平研究花生響應(yīng)網(wǎng)斑病菌侵染的機(jī)制，對(duì)花生選育優(yōu)良品系具有重要意義。目前，關(guān)于花生網(wǎng)斑病的研究主要集中在病原菌的鑒定及其生物學(xué)特性、發(fā)生流行條件等
5、方面，而在轉(zhuǎn)錄組水平關(guān)于花生網(wǎng)斑病的研究鮮有報(bào)道。本研究采用形態(tài)學(xué)結(jié)合分子生物學(xué)對(duì)采集到的花生網(wǎng)斑病菌進(jìn)行鑒定，及其致病性檢測(cè)；以前期鑒定出的強(qiáng)致病力菌株及接種方法為基礎(chǔ)，以接種網(wǎng)斑病后不同時(shí)間段的花生葉片為材料，對(duì)其轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測(cè)序分析，通過(guò)比對(duì)分析網(wǎng)斑病菌脅迫下的差異基因表達(dá)情況，找到響應(yīng)網(wǎng)斑病菌脅迫的關(guān)鍵基因，并對(duì)其進(jìn)行功能注釋和代謝途徑分析。研究結(jié)果如下：（1）從山東、云南、沈陽(yáng)等花生產(chǎn)區(qū)采集分離共得到9個(gè)菌株（編號(hào)為WB-LX、WB-PD、WB-SY、WB-YN1、WB-YN2、WB-YN3、WB-BS、WB-YM、
6、WB-3），通過(guò)形態(tài)學(xué)特征觀察并結(jié)合分子生物學(xué)鑒定得到WB-LX、WB-PD、WB-SY、WB-YN1、WB-YN2五個(gè)菌株為花生莖點(diǎn)霉（PhomaarachidicolaMarasasPauer&Boerema）。（2）通過(guò)離體葉片接種法對(duì)網(wǎng)斑病菌的接種條件進(jìn)行初探并篩選出致病力較強(qiáng)的菌株，作為下一步活體植株接種的菌株。篩選得到5個(gè)菌株具有致病性，致病力依次為WB-SY＞W(wǎng)B-LX＞W(wǎng)B-PD＞W(wǎng)B-YN2＞W(wǎng)B-YN1。致病力最強(qiáng)的菌株WB-SY于近紫光條件下接種7d后葉片發(fā)病。同時(shí)研究發(fā)現(xiàn)近紫光可顯著促進(jìn)植株發(fā)病。通過(guò)
7、活體植株接種篩選出一種快速有效的接種方法：在花生開花末期使用高濃度孢子懸浮液（106個(gè)/ml），接種濕度保持在90-100%之間持續(xù)保濕36h以上，溫度在25-28℃之間，同時(shí)黑暗處理24h利于發(fā)病。（3）采用RNA-Seq技術(shù)，對(duì)接種網(wǎng)斑病后7d、14d和27d的花生葉片轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行高通量測(cè)序，將測(cè)序結(jié)果與兩個(gè)野生型花生基因組Arachisduranensis（A）和Arachisipaensis（B）為參考進(jìn)行比對(duì)，分析篩選差異表達(dá)基因，并對(duì)其進(jìn)行GO和Pathway富集分析。結(jié)果表明，①對(duì)網(wǎng)斑病菌誘導(dǎo)下花生差異表達(dá)基因進(jìn)
8、行統(tǒng)計(jì)，同時(shí)以A、B兩個(gè)基因組為參考序列比對(duì)分析差異表達(dá)基因。以A為參考序列時(shí)，接菌7d、14d、27d相比對(duì)照差異表達(dá)基因總量分別為766個(gè)、3248個(gè)、1960個(gè)，其中連續(xù)差異表達(dá)的基因I青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要有126個(gè)；以B為參考序列時(shí)，接菌7d、14d、27d相比對(duì)照差異表達(dá)
