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《pd-1對膿毒癥小鼠肝臟枯否細胞功能的影響與機制研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文PD．1對膿毒癥小鼠肝臟枯否細胞功能的影響與機制研究ContributionofPD--1toLiverKupfferCellDysfunctioninMicewithSepsis研究生：王飛學(xué)科與專業(yè)：麻醉學(xué)研究方向：膿毒癥與天然免疫指導(dǎo)老師：鄧小明教授培養(yǎng)單位：第二軍醫(yī)大學(xué)第一附屬醫(yī)院導(dǎo)師組成員：AlfredAyala教授朱科明教授李金寶副教授二。一三年五月獨創(chuàng)性聲明本人聲明所成交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中
2、不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。本人承擔(dān)本聲明的法律責(zé)任。學(xué)位論文作者簽名：土七日期：加，歲年』月爿／日學(xué)位論文使用授權(quán)書聲明本人完全了解第二軍醫(yī)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，有權(quán)保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)第二軍醫(yī)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》、《中國優(yōu)秀博碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》等數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描
3、等復(fù)制方法和保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書)學(xué)位論文作者簽名：三乇聊簽名彩功膨日期：2。，鄉(xiāng)年j月J日日期：力多年歹月勿日目錄中文摘要??????????????????????????1英文摘要??????????????????????????4縮略詞??????????????????????????8—1上．—jL4日IJ舌?”??????一”????．．????一??“???·?··9第一部分膿毒癥小鼠肝臟枯否細胞表面PD．1表達????????11材料與方法
4、??????????00Oil00???????11結(jié)討第二部分PD．1對膿毒癥小鼠肝臟枯否細胞功能的影響0001QIIQ?．20材料與方法???????????100lID00?????????20結(jié)討論???????????????????????46第三部分PD一1在膿毒癥小鼠肝臟枯否細胞中的信號機制?????53材料與方法???010110??000110????????????53結(jié)討論??????????????????????···59第四部分PD一1在膿毒癥小鼠實體器官中的信號機
5、制???????63材料與方法???????????????????????63結(jié)果????????OQO00?????????????66討全文總結(jié)??????????????????????????75參考文獻????000???????????????76綜j苤???????????000?????????84在讀期間發(fā)表論文及參加科研工作?000???????????90致謝???????????????000?????????93PD-I對膿毒癥小鼠肝臟枯否細胞功能的影響及機制研究摘要
6、【研究目的】膿毒癥是感染引起的全身炎癥反應(yīng)綜合征，死亡率一直居高不下。免疫抑制是膿毒癥后期常見的免疫異常狀態(tài)。巨噬細胞功能障礙是這種免疫抑制的一個重要原因，但是其具體發(fā)生機制目前尚不明了。程序性死亡分子1(programmedcelldeathl，PD一1)是近年來發(fā)現(xiàn)的共抑制受體，參與外周組織免疫耐受和慢性病毒感染。PD．1基因敲除可以顯著提高膿毒癥小鼠的生存率，提示PD．1在膿毒癥免疫抑制中發(fā)揮著重要的作用。本課題擬首先檢測PD一1在肝臟枯否細胞的表達，進而應(yīng)用PD．1基因敲除小鼠，觀察PD
7、．1在膿毒癥肝臟枯否細胞功能障礙的作用，并初步探索PD．1在枯否細胞發(fā)揮作用的分子機制及PD．1參與膿毒癥多器官功能障礙的分子機制?！狙芯糠椒ā?、復(fù)制盲腸結(jié)扎穿孔(cecalligationandpullc眥，CLP)致膿毒癥小鼠模型。將16只野生型C57BL／6小鼠隨機分為假手術(shù)組(Sham，n=8)和CLP組(CLP,n=8)。術(shù)后24h時取肝臟，分離肝臟非實質(zhì)細胞，應(yīng)用流式細胞儀檢測枯否細胞(F4／80+)表面PD．1的表達水平。2、將10只野生型C57BL／6小鼠及10只PD．1基因敲
8、除小鼠隨機分為野生型假手術(shù)組(WTSham，n-4)，PD．1基因敲除假手術(shù)組(PD．1斗Sham，n_4)，野生型CLP組(WTCLP,n=6)和PD．1基因敲除CLP組(PD—l斗CLP,n=6)。術(shù)后24h時，分離肝臟非實質(zhì)細胞，應(yīng)用流式細胞儀檢測枯否細胞表面MHCH、CD69、CD80和CD86的表達水平。3、將8只野生型C57BL／6小鼠及8只PD．1基因敲除小鼠隨機分為野生型假手術(shù)組(wTSham，n-4)，PD．1基因敲除假手術(shù)組(PD．1士Sham，n-4)，野生型CLP組(WT
