念珠菌性外陰陰道炎菌種的分布、快速鑒定法的研究

念珠菌性外陰陰道炎菌種的分布、快速鑒定法的研究

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1、中圖分類號:R759.碩士學位論文念珠菌性外陰陰道炎菌種的分布、快速鑒定法的研究院(系)、所臨床醫(yī)學院研究生姓名馬虎學科、專業(yè)皮膚病與性病學導(dǎo)師姓名林昭春教授二Ο一三年四月目錄1念珠菌性外陰陰道炎菌種的分布、快速鑒定法的研究……11.1中文摘要………………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言……………………………………………………………71.4第一部分念珠菌性外陰陰道炎病臨床致病株的鑒定及臨床分析……………………………………………………………111.

2、4.1材料與方法……………………………………………………121.4.2結(jié)果……………………………………………………………171.4.3討論……………………………………………………………211.5第二部分念珠菌性外陰陰道炎病菌種快速鑒定方法的建立………………………………………………………………261.5.1材料與方法……………………………………………………271.5.2結(jié)果……………………………………………………………291.5.3討論……………………………………………………………301.6結(jié)論…………………………

3、…………………………………371.7參考文獻………………………………………………………381.8英漢縮略詞對照表……………………………………………432致謝……………………………………………………………453白念珠菌致病相關(guān)的水解酶(綜述)………………………46念珠菌性外陰陰道炎菌種的分布、快速鑒定法的研究摘要第一部分念珠菌性外陰陰道炎病臨床致病株的鑒定及臨床分析目的:本研究通過對念珠菌性外陰陰道炎臨床致病株進行生物學分類、基因鑒定,了解成都地區(qū)女性陰道炎感染菌種分布情況。分析不同念珠菌種臨床致病株分布和發(fā)病特點

4、,為臨床提供由念珠菌感染的念珠菌性外陰陰道炎的分子流行病學資料,提高臨床診斷及防治水平。方法:收集2012年7月至2013年1月四川省人民醫(yī)院皮膚性病研究所和成都市計劃生育指導(dǎo)所門診收治的念珠菌性外陰陰道炎患者陰道分泌物標本,將有典型癥狀(如豆渣樣白帶和外陰瘙癢等)的患者,取陰道后穹隆處的分泌物送檢,真菌鏡檢發(fā)現(xiàn)菌絲或孢子,并培養(yǎng)鑒定為念珠菌陽性的患者確診為外陰陰道念珠菌病(VVC)組;一年反復(fù)發(fā)作四次及以上者,診斷為復(fù)發(fā)性外陰陰道念珠菌?。≧VVC)組;患者無癥狀,但真菌培養(yǎng)鑒定為念珠菌陽性的患者確定為攜帶者(

5、H)組。對陽性標本行沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)分離培養(yǎng),初步鑒定為念珠菌,然后對培養(yǎng)的念珠菌提取DNA,并采用真菌通用引物ITSl、ITS2對外陰陰道念珠菌病的病原菌rDNA(核糖體DNA)的ITS1-2區(qū)進行PCR擴增,測序后通過Blast比對,確定菌種。結(jié)合患者年齡、發(fā)病頻率等一般資料,初步分析不同念珠菌種臨床致病株的分布和發(fā)病特點。結(jié)果:1、PCR能快速、準確鑒定臨床標本中的致病真菌。本實驗一共收集151個鏡檢陽性標本,培養(yǎng)出112個標本,104例DNA鑒定成功。其中白念珠菌90株(86.54%),光滑

6、念珠菌13株(12.5%),鏈格孢菌1株(0.96%)。12、白念珠菌是各組研究對象中檢出率最高的菌種,是造成感染的主要菌種,光滑念珠菌是引起感染最常見的非白念珠菌菌種。在各組檢測陽性的菌種中,白念珠菌在VVC初發(fā)組占有比例90.48%、RVVC組占有比例86.21%、H組占有比例50%,說明白念珠菌是人類陰道常駐菌群,一旦致病,分布率顯著上升。光滑念珠菌在VVC初發(fā)組占有比例4.76%、RVVC組占有比例10.34%、H組占有比例25%,說明光滑念珠菌致病力較白念珠菌弱,更多時候作為共生菌寄生于人體,少數(shù)情況下

7、致病。H組可以攜帶白念珠菌以及光滑念珠菌。鏈格孢菌是常見的污染菌,在環(huán)境中廣泛存在,意義不大。3、本實驗發(fā)現(xiàn)再次感染的念珠菌性外陰陰道炎中白念珠菌感染率最高,達80.77%。4、白念珠菌感染與年齡的關(guān)系:在25-30歲,白念珠菌感染率最高,<25歲和41-45歲的年齡段次之。結(jié)論:1、PCR方法能快速準確鑒定臨床最常見的致病真菌,總體而言優(yōu)于傳統(tǒng)的診斷方法。2、白念珠菌仍然是最常見的致病念珠菌,而在非白念珠菌中光滑念珠菌的感染比例高。3、白念珠菌在初發(fā)組感染率最高為90.48%,光滑念珠菌在健康攜帶組占有比例為最

8、高。H組存在白念珠菌,也存在非白念珠菌,非白念珠菌感染以光滑念珠菌為主。4、在性活躍年齡段,感染白念珠菌比例較高。念珠菌種的鑒定對指導(dǎo)臨床治療具有很大意義。第二部分念珠菌性外陰陰道炎病菌種快速鑒定方法的建立目的:本研究通過對念珠菌性外陰陰道炎病患者的陰道分泌物采取直接提取DNA的方法,快速鑒定致病菌種。方法:收集2013年1月成都市計劃生育指導(dǎo)所門診收治的念珠菌性外陰陰道

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