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《十亞慢性經(jīng)口毒性試驗》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、十四、亞慢性經(jīng)口毒性試驗SubchronicOralToxicityTest1范圍本規(guī)范規(guī)定了嚙齒類動物亞慢性經(jīng)口毒性試驗的基本原則、要求和方法。本規(guī)范適用于檢測化妝品原料的亞慢性經(jīng)口毒性。2規(guī)范性引用文件OECDGuidelinesforTestingofChemicals(No.408,May1981)3試驗?zāi)康脑诠烙嫼驮u價化妝品原料的毒性時，獲得受試物急性毒性資料后，還需進行亞慢性經(jīng)口毒性試驗。通過該試驗不僅可獲得一定時期內(nèi)反復(fù)接觸受試物后引起的健康效應(yīng)、受試物作用靶器官和受試物體內(nèi)蓄積能力資料，并可估計接觸的無有害作用水平，后者可用于選擇和確定慢性試驗的接觸水平和初步計算人群接
2、觸的安全性水平。4定義4.1亞慢性經(jīng)口毒性(Subchronicoraltoxicity)是指在實驗動物部分生存期內(nèi)，每日反復(fù)經(jīng)口接觸受試物后所引起的不良反應(yīng)。4.2無有害作用水平（No-adverse-effectlevel）是指在試驗中不引起任何有害作用的最大染毒劑量，可用每日單位動物體重接觸受試物的重量（mg/kg）表示。當受試物是混入動物飼料或飲水中進行染毒時，可用每公斤飼料或每毫升飲水中受試物重量（mg/kg,mg/mL）表示。5試驗的基本原則以不同劑量受試物每日經(jīng)口給予各組實驗動物，連續(xù)染毒90d，每組采用一個染毒劑量。染毒期間每日觀察動物的毒性反應(yīng)。在染毒期間死亡的動物要
3、進行尸檢。染毒結(jié)束后所有存活的動物均要處死，并進行尸檢以及適當?shù)牟±斫M織學(xué)檢查。6試驗方法6.1實驗動物和飼養(yǎng)環(huán)境6.1.1動物種系的選擇常規(guī)選擇嚙齒類動物，首選大鼠。一般選用6周～8周齡的大鼠。動物體重的變動范圍不應(yīng)超出平均動物體重的10%。若該試驗為慢性試驗的預(yù)備試驗，則在兩個試驗中所用的動物種系應(yīng)當相同。6.1.2動物的性別和數(shù)量 每一劑量組實驗動物至少應(yīng)有20只（雌雄各半），但是考慮到亞慢性試驗的重要性，應(yīng)適當增加每組雌雄動物數(shù)。若計劃在試驗過程中處死動物，則應(yīng)增加計劃處死的動物數(shù)。試驗結(jié)束時的動物數(shù)需達到能夠有效評價受試物毒性作用的數(shù)量。此外，可另設(shè)一追蹤觀察組，選用20只
4、動物（雌雄各半），給予最高劑量受試物，染毒90d，在全程染毒結(jié)束后繼續(xù)觀察一段時間（一般不少于28d），以了解毒性作用的持續(xù)性、可逆性或遲發(fā)毒作用。1346.1.3飼養(yǎng)環(huán)境實驗動物及實驗動物房應(yīng)符合國家相應(yīng)規(guī)定。選用常規(guī)飼料，飲水不限制。6.2劑量分組試驗時至少要設(shè)三個染毒組和一個對照組。除不接觸受試物外，對照組的其它條件均與試驗組相同。最高染毒劑量的設(shè)計應(yīng)在引起中毒效應(yīng)的前提下又不致造成動物過多死亡，否則將會影響結(jié)果的評價。低劑量組應(yīng)不出現(xiàn)任何毒性作用。若掌握人群接觸水平，則最低染毒劑量應(yīng)高于人群的實際接觸水平。中間劑量組應(yīng)引起較輕的可觀察到的毒性作用。若設(shè)多個中間劑量組，則各組的染
5、毒劑量應(yīng)引起不同程度毒性作用。在中、低劑量組和對照組中，動物死亡率應(yīng)很低，以保證得到有意義的評價結(jié)論。對那些毒性較低的物質(zhì)來說，當通過飼料染毒時應(yīng)特別注意確保大量的受試物混入不會對動物正常營養(yǎng)產(chǎn)生影響。對其它的染毒方式要加以特殊說明。若采用灌胃方式染毒，則每日染毒時點應(yīng)相同，并定期（每周）按體重調(diào)整染毒劑量，維持單位體重染毒水平不變。本項試驗中，如果接觸水平超過1000mg/kg時仍未產(chǎn)生可觀測到的毒性效應(yīng)，而且可以根據(jù)相關(guān)結(jié)構(gòu)化合物預(yù)期受試物毒性時，可以考慮不必進行三個劑量水平的全面試驗觀察。6.3試驗步驟染毒開始前至少要有5d時間使實驗動物適應(yīng)實驗室飼養(yǎng)環(huán)境。實驗動物隨機分組。受試
6、物可通過混入飼料或飲水、直接喂飼以及灌胃進行染毒。動物最好每周7d染毒，但考慮到可行性，每周可染毒5d。試驗期間所有動物染毒的方式應(yīng)完全相同。若為染毒目的加入其它溶劑或添加劑，這些溶劑或添加劑不應(yīng)影響受試物的吸收或引起毒性作用。6.4臨床觀察 觀察時間應(yīng)至少為90d。追蹤觀察組還要增加28d，但不作任何處理，以了解毒性作用的可逆性、持續(xù)性及遲發(fā)毒作用。觀察期間對動物的任何毒性表現(xiàn)均應(yīng)記錄，記錄內(nèi)容包括發(fā)生時間、程度和持續(xù)時間。觀察應(yīng)至少包括如下內(nèi)容：皮膚和被毛的改變、眼和粘膜變化、呼吸、循環(huán)、植物神經(jīng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)、肢體運動和行為活動等改變。應(yīng)計算每周飼料消耗量（或當通過飲水染毒時的
7、飲水消耗量），記錄每周體重變化。6.5臨床檢查6.5.1眼科檢查在動物染毒前和染毒后，最好對所有實驗動物，至少應(yīng)對最高劑量組和對照組動物，使用眼科鏡或其它有關(guān)設(shè)備進行眼科檢查。若發(fā)現(xiàn)動物有眼科變化則應(yīng)對所有動物進行檢查。6.5.2血液檢查在染毒前、染毒中期、染毒結(jié)束及追蹤觀察結(jié)束時應(yīng)測定血球容積、血紅蛋白濃度、紅細胞數(shù)、白細胞總數(shù)和分類，必要時測定凝血功能如凝血時間、凝血酶原時間、凝血激酶時間或血小板數(shù)等指標。6.5.3臨床血液生化檢查在染毒前
