牛黃對胃癌細(xì)胞bgc-823增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡的實驗研究

牛黃對胃癌細(xì)胞bgc-823增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡的實驗研究

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1、中圖分類號UDC610碩士學(xué)位論文學(xué)校代碼!Q§三呈密級公玨牛黃對胃癌細(xì)胞BGC.823增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡的實驗研究StudythegrowthinhibitionandapoptosisofgastriccancercellsBGC.823treatedwithcalculusbovis作者姓名:學(xué)科專業(yè):學(xué)院(系、所):指導(dǎo)教師:黃芳腫瘤學(xué)湘雅醫(yī)院鐘美佐論文答辯日期型答辯委員會主席牲中南大學(xué)矽,,年J’月原創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,除了論文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成

2、果,也不包含為獲得中南大學(xué)或其他單位的學(xué)位或證書而使用過的材料。與我共同工作的同志對本研究所作的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明。作者簽名:送鯊一.日期:竺年』月!日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人了解中南大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,即:學(xué)校有權(quán)保留學(xué)位論文并根據(jù)國家或湖南省有關(guān)部門規(guī)定送交學(xué)位論文,允許學(xué)位論文被查閱和借閱;學(xué)??梢怨紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,可以采用復(fù)印、縮印或其它手段保存學(xué)位論文。同時授權(quán)中國科學(xué)技術(shù)信息研究所將本學(xué)位論文收錄到《中國學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》,并通過網(wǎng)絡(luò)向社會公眾提供信息服務(wù)。中南大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要摘要研究背景:胃癌是常見的惡性腫瘤之一,在所

3、有惡性腫瘤中排名第四。許多患者被查出胃癌時已處于中晚期,喪失了手術(shù)機(jī)會。此時,以化療為主的綜合治療成為首選。近年來多種臨床新藥的應(yīng)用,為中、晚期胃癌的臨床治療提供了更多的可能,如5.氟尿嘧啶(5.FU)和順鉑(CDDP)等。然而,化療藥物具有治療效果的同時亦有副作用,如粒細(xì)胞減少,靜脈滴注持續(xù)時間較長導(dǎo)致的靜脈炎、靜脈置管并發(fā)癥等,使胃癌患者依從性差,近年來,中藥作為一種輔助治療性藥物越來越受到人們的青瞇。牛黃,又名西黃、犀黃。具有清熱解毒、抗炎、利膽、抗氧化和清除自由基和增強(qiáng)免疫系統(tǒng)等作用,常用于咽喉腫痛、潰爛、口舌生瘡。也可治療一切癰疽療毒之癥,如用于治療乳癌、瘰疬、癰毒等癥。

4、新近研究發(fā)現(xiàn)牛黃具有抑制病毒復(fù)制、消炎、利膽、恢復(fù)肝功能、提高機(jī)體免疫力及抗癌的作用。研究表明:將牛黃作用于人肝母細(xì)胞瘤HepG2細(xì)胞后,發(fā)現(xiàn)其能誘導(dǎo)癌細(xì)胞調(diào)亡,并可能還有抑制癌細(xì)胞生長的作用。這為牛黃在惡性腫瘤的治療方面的研究和應(yīng)用開拓了新的思路。迄今,未見牛黃在胃癌中的研究。因此,本研究擬用牛黃干預(yù)人胃癌BGC.823細(xì)胞株,觀察牛黃對BGC.823細(xì)胞的抑制增值、誘導(dǎo)凋亡效應(yīng),并用牛黃聯(lián)合5-FU和CDDP誘導(dǎo)BGC.823細(xì)胞凋亡的協(xié)同作用,以期待為進(jìn)一步的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。目的:探討牛黃對BGC一823細(xì)胞的增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡效應(yīng);研究牛黃聯(lián)合5-FU和CDDP對BG

5、C.823細(xì)胞增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡的協(xié)同作用。方法:用不同濃度的牛黃處理胃癌BGC.823細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)變化、通過四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測細(xì)胞生長抑制情況,Annexin.V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst33343染色檢測細(xì)胞凋亡;單獨用一定濃度的牛黃、5.FU、CDDP作用中南大學(xué)碩士學(xué)位論文中文摘要BGC.823細(xì)胞,再用一定濃度的牛黃、5-FU和CDDP聯(lián)合作用BGC.823細(xì)胞,通過四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法檢測細(xì)胞生長抑制情況,Annexin.V-FITC/PI雙染流式細(xì)胞術(shù)、Hoechst33343染色、DNA凝膠電泳檢測細(xì)胞

6、凋亡的情況。結(jié)果:1.倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),BGC.823細(xì)胞經(jīng)不同濃度的牛黃作用24h后細(xì)胞數(shù)量明顯減少、大小不一、細(xì)胞間隙增大,表現(xiàn)出明顯的細(xì)胞生長抑制,隨著牛黃濃度的增大和作用時間的延長,細(xì)胞形態(tài)變圓,體積縮小,折光度減弱,細(xì)胞脫落明顯,碎片增多。2.MTT法檢測不同濃度牛黃作用BGC.823細(xì)胞24h、48h、72h后,牛黃各個濃度組的生長抑制率明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在同一藥物濃度下,隨著作用時間的延長,生長抑制率逐漸升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。MTT法檢測牛黃聯(lián)合5-FU、CDDP對BGC.823細(xì)胞的增殖抑制作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn),BGC

7、.823細(xì)胞經(jīng)5-FU(100¨∥Ⅱ兒)加牛黃(400gg/mL)和CDDP(50gg/mL)聯(lián)合作用48小時后,細(xì)胞的生長抑制率為0.471士0.047;而空白對照組和單獨使用牛黃、5.FU、CDDP以及5-FU聯(lián)合CDDP組作用48小時后,細(xì)胞的生長抑制率分別為04-0、0.243+0.09、0.25士0.039、0.258士0.046、0.366士0.045。各用藥組與對照組相比較,差異明顯,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);而各單獨用藥組間相比較,組之間無顯著性差

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