豬巨細(xì)胞病毒gb蛋白間接elisa方法的建立及單克隆抗體的制備與鑒定

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1、DEVELOPMENTOFINDIRECTELISAFoRDETECTINGANTIBODIESAGAINSTgBPROTEINOFPORCINECYTOMEGALOⅥRUSANDPREPARATIONOFITSMoNOCLoNALANTIBODIESByZhu砌ehuaAThesisSubmittedtoNanjingAgriculturalUniversityInPartialFulfillmentoftheRequirementfortheMasterDegreeofAgronomyCompletedinApril,2013

2、CommencementinMay,2013原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)卜,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均己在文中以明確方式標(biāo)明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者(需親筆)虢緲風(fēng)智羽/;年鄉(xiāng)月多日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。

3、本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文。保密口,在——年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密日/(請(qǐng)?jiān)谝陨戏娇騼?nèi)打“√”)學(xué)位論文作者(需親筆)簽名:導(dǎo)師(需親筆)簽爭(zhēng)日爭(zhēng)I歷眵年∥月多Et加侈年鄉(xiāng)月歹Et目錄目錄摘要?????????????????????????????????·IABSTRACT????????????????????????????????????????·III第一篇文獻(xiàn)綜述??????????????????

4、??????????·11生物學(xué)特性與病毒蛋白???????????????????????l1.1病毒生物學(xué)特性???????????????????????·21.2病毒主要蛋白????????????????????????”22流行病學(xué)?????????????????????????????·33臨床特征和病理變化????????????????????????44診斷技術(shù)?????????????????????????????44.1電鏡觀察??????????????????????????·44.2酶聯(lián)免疫吸附試

5、驗(yàn)??????????????????????·44.3間接免疫熒光試驗(yàn)??????????????????????-54.4免疫組織化學(xué)技術(shù)??????????????????????..64.5分子診斷??????????????????????????·64.5.1PCR??????????????????????????????????·64.5.2原位雜交技術(shù)??????????????????????75預(yù)防與控制????????????????????????????8參考文獻(xiàn)????????????????????

6、??????????·9第二篇研究?jī)?nèi)容???????????????????????????”15第一章豬巨細(xì)胞病毒gB基因原核表達(dá)與鑒定???????????????151材料與方法???????????????????????????“151.1材料???????????????????????????????·151.2方:法????????????????????????????????????·161.2.1PCMVga基因的PCR擴(kuò)增???????????????”161.2.2PCR產(chǎn)物回收純化???????????

7、????????161.2.3重組質(zhì)粒的構(gòu)建及鑒定?????????????????·171.2.4重組gB蛋白的表達(dá)??????????????????“191.2.5表達(dá)gB蛋白的Western-blotting鑒定???????????“2l2結(jié)果????????????????????????????????????????“222.1gB基因擴(kuò)增????????????????????????·222.2重組質(zhì)粒pET32a—gB雙酶切鑒定???????????????”22豬巨細(xì)胞病毒gB蛋白間接ELlSA方法的建立及

8、單克隆抗體的制備與鑒定2.3gB基因序列測(cè)定??????????????????????.232.4重組gB蛋白的SDS.PAGE電泳結(jié)果??????????????232.5表達(dá)產(chǎn)物的Western-blotting鑒定結(jié)果???????????

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