資源描述：
《苦馬豆素降解菌的篩選與鑒定》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、苦馬豆素降解菌的篩選與鑒定摘要瘋草是豆科棘豆屬和黃芪屬有毒植物的總稱，是危害畜牧業(yè)最嚴(yán)重的有毒植物之一。其特點(diǎn)是耐貧瘠，耐干旱，返青早，繁殖力強(qiáng)等。動物采食瘋草表現(xiàn)為具有嗜癮性，蓄積性中毒。其毒性成分主要為苦馬豆素（Swainsonine，SW）。SW能夠抑制細(xì)胞中α-甘露糖苷酶，影響糖蛋白的代謝，引起動物細(xì)胞空泡樣變性，導(dǎo)致動物中毒死亡；造成母畜流產(chǎn)，畸形，弱胎等，引起動物繁殖性能障礙。研究表明，瘋草含有豐富的營養(yǎng)成分，其營養(yǎng)價(jià)值與苜蓿相當(dāng)，對其合理開發(fā)，不但能解決飼草料短缺問題，還可以降低瘋草中毒所帶來的經(jīng)濟(jì)損失。本實(shí)驗(yàn)對新疆南疆小花棘豆不同生長時(shí)期營養(yǎng)成分及與SW含量的關(guān)
2、系測定；并從土壤中篩選能夠降解SW的細(xì)菌，對篩選得到的SW降解菌進(jìn)行16SrDNA鑒定。本實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行為小花棘豆的開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。1小花棘豆不同生長時(shí)期營養(yǎng)成分與SW含量的關(guān)系對新疆南疆小花棘豆，不同生長時(shí)期的營養(yǎng)成分與SW含量之間的關(guān)系進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)隨著小花棘豆的生長，其營養(yǎng)成分有不斷增加的趨勢。其中粗蛋白、粗脂肪、粗灰分和鈣含量在盛花期時(shí)達(dá)到最大值，干物質(zhì)和磷含量在結(jié)莢期達(dá)到最大值，NDF和ADF含量在落葉期達(dá)到最大值。小花棘豆SW含量隨生長時(shí)期的發(fā)生明顯變化，其中結(jié)莢期SW含量均高于其它時(shí)期。2.土壤處理采集阿合奇縣小花棘豆生長地0～30cm的土壤，去除砂礫后稱取10g，
3、加入90mL滅菌水，充分混勻靜置，取上清液，加入牛肉膏蛋白胨液體培養(yǎng)基中37℃過夜培養(yǎng)。將提取得到的小花棘豆生物堿加入無機(jī)鹽液體培養(yǎng)基中，每4天轉(zhuǎn)接一次，轉(zhuǎn)接3次，將液體培養(yǎng)基均勻涂布到含生物堿的無機(jī)鹽固體培養(yǎng)基中，挑取菌落形態(tài)不同的菌進(jìn)行純化培養(yǎng)。3.土壤降解菌的篩選與降解測定取已分離純化后的菌株在LB液體培養(yǎng)基中37℃，200r/min過夜培養(yǎng)，移取菌液加入無機(jī)鹽培養(yǎng)基中在無機(jī)鹽培養(yǎng)基中加入SW使無機(jī)鹽培養(yǎng)基中含量由30mg/L每4天轉(zhuǎn)接一次，逐漸增加SW含量，最后轉(zhuǎn)接到含100mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中，發(fā)現(xiàn)有兩株菌具有降解能力，XJAHQ5、XJAHQ26菌株的降解效率為
4、20.86%和30.12%。4.對SW降解菌的鑒定將具有降解能力的菌株XJAHQ5、XJAHQ26的16S保守序列在NCBI上進(jìn)行BLAST對比，下載相似菌株利用MEGE6.0軟件建立無根進(jìn)化樹，了解菌株的進(jìn)化關(guān)系，鑒定發(fā)現(xiàn)兩株菌為假單胞菌科假單胞菌屬的惡臭假單胞菌。在不同pH條件下培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)菌株XJAHQ26在5~10可以生長，XJAHQ5在pH為4~10能夠生長，其適應(yīng)范圍廣有一定的開發(fā)價(jià)值。關(guān)鍵詞：小花棘豆；苦馬豆素；降解菌；鑒定ScreeningandIdentificationofSwainsonineDegradingBacteriaAbstractLocoweed
5、,themostseriouspoisonousplantswhichwasharmtothesustainabledevelopmentofanimalhusbandryintheworld,isthecommonnameofthegeneraAstragalussp.andOxytropissp.Itscharacteristicisbarren,droughtresistant,earlier,strongreproduction.Animalfeedlocoweedperformancehasaddictedtoaddiction,accumulationofpoiso
6、ning。Locoweedscontainswainsonine,whichistheprincipalagentresponsibleforlocoisminanimals.SWisaninhibitorofmannosidaseincell,whichcanaltermetabolismofglycoprotein,leadstocellularvacuolationandcellulardeath,finalycanresultsinanimaldeath.Infuenceonthepropertiesofanimalbreeding,easytoabortion,mal
7、formation,weakfetalandothersymptomscausedbyanimalreproductiveperformancebarriers.Bringstheseriouseconomiclossestolivestockindustry.Researchshowsthatlocoweedcontainsrichnutritionandmineralelements,itsnutritionalvalueandalfalfarather,itsreasonabledev
