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《jmjd1c對牛卵丘細胞增殖與凋亡的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、JMJD1C對牛卵丘細胞增殖與凋亡的影響EffectofJMJD1Concumuluscellproliferationandapoptosisofcattle作者姓名：徐芳芳專業(yè)名稱：動物遺傳育種與繁殖指導(dǎo)教師：張嘉保教授學(xué)位類別：農(nóng)學(xué)碩士答辯日期：2015年6月3日中文摘要JMJD1C對牛卵丘細胞增殖與凋亡的影響卵丘細胞作為顆粒細胞的一種，其在卵母細胞成熟過程中的擴張狀態(tài)以及凋亡比率對卵母細胞的成熟具有重要作用。已有研究表明，BMP15、IGF-I與FSH均可影響其增殖、生長與分化，從而影響卵母細胞正常生長和成熟。JMJD1C是KDM3家族中的一員，其中KDM3A、KDM3B即J
2、MJD1A、JMJD1B能夠特異去除H3K9me1與H3K9me2的甲基化修飾，但JMJD1C是否也具有對H3K9的催化作用或活性，且在BMP15、IGF-I、FSH介導(dǎo)下對卵丘細胞增殖與凋亡的影響則罕有報道。為明確JMJD1C對H3K9的去甲基化作用，本研究在對牛卵丘細胞進行體外培養(yǎng)后，利用RNAi方法抑制JMJD1C的表達，并通過免疫熒光方法檢測H3K9me1、H3K9me2的表達變化。結(jié)果表明：對牛卵丘細胞中JMJD1CmRNA表達成功地進行抑制后，H3K9me1、H3K9me2表達量無明顯變化，即JMJD1C對去除H3K9me1與H3K9me2的甲基化修飾均并無明顯作用。為檢
3、測BMP15、IGF-I和FSH對JMJD1C表達的影響，分別在培養(yǎng)液中添加不同濃度BMP15、IGF-I和FSH并檢測JMJD1C的表達變化，實時熒光定量PCR結(jié)果表明，添加FSH和IGF-1對JMJD1C的mRNA表達水平無顯著影響；而50ng/ml與100ng/ml的BMP15添加會顯著降低JMJD1C的mRNA表達水平（p﹤0.01）。MTS細胞增殖檢測結(jié)果也表明，BMP15的添加量為50ng/ml時，可明顯促進卵丘細胞增殖，即BMP15的添加濃度為50ng/ml時顯著抑制了JMJD1C的表達并促進了卵丘細胞增殖。因此進一步選取添加量為50ng/mlBMP15探究JMJD1C
4、在BMP15介導(dǎo)下對卵丘細胞凋亡與增殖的影響?；谝陨辖Y(jié)果，利用siRNA敲減JMJD1C基因的表達，同時從mRNA水平和蛋白水平檢測凋亡標(biāo)記基因Bcl2和Bax表達量變化。實時熒光定量PCR與WesternBlot結(jié)果均表明，BMP15添加后沉默JMJD1C基因，凋亡標(biāo)記基因Bcl2與Bax的比值都明顯升高，即卵丘細胞的凋亡率降低。表明了BMP15與JMJD1CI之間的間接聯(lián)系可以影響卵丘細胞的凋亡，JMJD1C可抑制卵丘細胞中BMP15介導(dǎo)的抗凋亡作用。綜上所述，本研究明確了牛卵丘細胞中JMJD1C在mRNA水平上不具有直接調(diào)控組蛋白H3K9me1、H3K9me2的去甲基化作用，
5、而JMJD1C可影響B(tài)MP15在牛卵丘細胞中介導(dǎo)的抗凋亡作用。研究結(jié)果有助于識別KDM3密切相關(guān)的蛋白質(zhì)之間的差別，對JMJD1C的功能進行了新的探究并為揭示卵丘細胞凋亡的分子機制提供一定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞：JMJD1C；牛卵丘細胞；去甲基化；細胞增殖與凋亡；BMP15IIAbstractEffectofJMJD1ConcumuluscellproliferationandapoptosisofcattleCumuluscells,asakindofgranulosacells,itsexpandedstatesandapoptosisratiosimpactoocytesmaturati
6、onandembryonicdevelopment.BMP15,IGF-IandFSHcanpromotegranulosacellproliferation,growthanddifferentiation,contributingtothenormalmaturationofoocytes.JMJD1CisamemberofKDM3families.JMJD1AandJMJD1B(KDM3A,KDM3B)canremoveH3K9me1andH3K9me2methylationmodificationspecifically,HoweverwhetherJMJD1Calsohas
7、aH3K9catalyticactionisunclearanditseffectoncumuluscellapoptosisandproliferationmediatedbyBMP15,IGF-IandFSHisstillrarelyreported.InordertoclarifytheroleofJMJD1C’sactionofH3K9demethylation.Afterbovinecumuluscellsculturedinviro,weuse
