sirna沉默upar和cathepsin b基因表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、侵襲、凋亡的影響

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1、戶曲虔種乂嗦．纖子學(xué)號(hào)２０，２２０２２２ＧｕａｎｘｉＭｅｄｃａｎｖｅｒｓｔｇｉｌＵｉｉｙ＾碩±學(xué)位論文ｍｓｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和Ｇａｔｈ巧ｓｉｎＢ基因表達(dá)對(duì)巧癌細(xì)胞增殖、侵襲、調(diào)ｔ的影響石注注々／貝／目導(dǎo)師姓名：呂小平專業(yè)名稱；消化內(nèi)科申請(qǐng)學(xué)位類型；科學(xué)學(xué)位答辯委員會(huì)主席：梁列新答辯委員會(huì)委員；梁列新陳遠(yuǎn)能唐國(guó)都黃雪賴銘裕二〇－五年五月原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得巧研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加Ｌ乂標(biāo)注和致

2、謝的地方外，論文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含獲得廣西醫(yī)科大學(xué)或其他教育化構(gòu)的學(xué)位或證書使用過的材料一。與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均臣在論文中作了明確的說明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽雀：乂簽字曰期：年巧ｉ曰學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：在校期罔論文的知識(shí)產(chǎn)權(quán)屬?gòu)V西醫(yī)科大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保存論文的電子和紙質(zhì)文檔，可借閥或上網(wǎng)公布本論文的部分或全部巧容、、匯編學(xué)位論文。，可Ｌ乂采用影印復(fù)印或其它手段保存學(xué)校可Ｌ乂向

3、國(guó)家有關(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。同意廣西醫(yī)科大學(xué)可Ｌ義用不同方式在不罔媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。保密論文在解密后遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者簽名：：＾導(dǎo)師簽字簽字曰期／曰：＞ｓ年ｒ月如簽字日期：擇＾月＾個(gè)人簡(jiǎn)歷基本情況：石清清性別姓名：女民族漢族出生年月－－：１９８６０６０６籍貫；廣西省桂平市政治面貌：黨員學(xué)習(xí)工作經(jīng)歷起止時(shí)間所在院校或單位學(xué)歷學(xué)位職稱２００６？．９２０１０．３廣西醫(yī)科大學(xué)本科學(xué)生一？２０１０

4、．３２０１１．５南寧市第人民醫(yī)院本科實(shí)習(xí)醫(yī)師？２０１１．７２０１２．７容縣人民醫(yī)院本科見習(xí)醫(yī)師？２０１２．９２０１５．６廣西醫(yī)科大學(xué)碩±學(xué)生研究生期間科研經(jīng)歷項(xiàng)目起止時(shí)間項(xiàng)目名稱項(xiàng)目來源本人承擔(dān)任務(wù)？２０１３．３２０１４．７ＲＮＡｉ沉默ｕＰＡＲ和廣西科學(xué)研究實(shí)驗(yàn)操作、數(shù)據(jù)ＣａｔｈｅｓｉｎＢ基因?qū)Ω闻c技術(shù)開發(fā)計(jì)統(tǒng)計(jì)及分析、論ｐ癌的視向治療及其機(jī)劃課題文撰寫及發(fā)布制研究目錄一、中文摘要１二、英文摘要４Ｈ、前言８四、論文正文第一部分材料與方法

5、１１實(shí)驗(yàn)結(jié)果２８第二部分材料與方法３２實(shí)驗(yàn)結(jié)果：３８訊侖４５小結(jié)５０五、參考文獻(xiàn)５１屯、附錄（英文縮略詞與中文對(duì)照）５４六、綜述５６八、致謝６８九、研究生期間所發(fā)表的論文６９ｓ、１ｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞増殖、侵襲調(diào)亡的影咱２０２級(jí)碩±研巧生學(xué)位論文ｓｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、侵襲、調(diào)亡的影響摘要目的；探討ＳｉＲＮＡ單獨(dú)或聯(lián)合沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因?qū)Ω伟?/p>

6、細(xì)胞增殖、侵襲、調(diào)亡的影響。方法－）；用帶癸光的ｓｉＲＮＡ轉(zhuǎn)染人類肝癌細(xì)胞（ＳＭＭＣ７７２１，篩選合適的ＳｉＲＮＡ轉(zhuǎn)染濃度，該濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。分別人工構(gòu)建并合成鞭向一沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因的Ｈ條ｓｉＲＮＡ和條陰性ｓｉＲＮＡ。轉(zhuǎn)染人類肝癌細(xì)胞ＳＭＭＣ－７７２１后，實(shí)時(shí)巧光定量ＰＣＲ技術(shù)和ＷＢ技術(shù)分別檢測(cè)基因水平上和蛋白水平上沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因最好的ｓｉＲＮＡ，篩選出的兩個(gè)ＳｉＲＮＡ用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。單獨(dú)或聯(lián)合轉(zhuǎn)染后，炎光定量ＰＣＲ技術(shù)和ＷＢ技術(shù)分別檢測(cè)ｕＰＡＲ和Ｃａｔｈ

7、ｅｐｓｉｎＢ的基因表達(dá)水平和蛋白表達(dá)水平。ＭＴＴ實(shí)驗(yàn)檢測(cè)單獨(dú)或聯(lián)合沉默ｕＰＡＲ和Ｃａ也ｅｐｓｉｎＢ基因后癌細(xì)胞的增殖情況?；|(zhì)膠侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力的改變。流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)肝癌細(xì)胞調(diào)亡率的變化。結(jié)果：１．按Ｒｏｃｈ說明書，從不同比例的轉(zhuǎn)染試劑和ＳｉＲＮＡ中篩選出轉(zhuǎn)染最佳濃度，我們發(fā)現(xiàn)低濃度ＳｉＲＮＡ進(jìn)行轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染率達(dá)８０％，細(xì)胞狀態(tài)最好。２．按低濃度ＳｉＲＮＡ進(jìn)行轉(zhuǎn)染，實(shí)時(shí)焚光定量ＰＣＲ法分別檢測(cè)各組巧癌－細(xì)胞ＳＭＭＣ７７２１的ｕＰＡＲ和Ｃａ也ｅｓｉｎＢ基因水平。結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)染４８ｈｐ１

8、ｓ、ｉＲＮＡ沉默ｕＰＡＲ和ＣａｔｈｅｐｓｉｎＢ基因表達(dá)對(duì)肝癌細(xì)胞増殖侵襲、調(diào)亡的影巧２０１２級(jí)碩±研究生學(xué)位論文－Ｈ個(gè)ｓｏｉＲＮＡ組的后，與空白對(duì)照組（ｎｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｎｔｒｏｌ，ＮＴＣ）相比，ｕＰＡＲ和Ｃａ