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《sirna抑制cortactin基因表達對喉癌hep-2細胞增殖和侵襲的影響》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在學術論文-天天文庫。
1、分類號密級UDC編號碩士學位論文siRNA抑制cortactin基因表達對喉癌Hep-2細胞增殖和侵襲的影響研究生姓名：譚桂煌指導教師姓名、職稱：謝海龍副教授甘潤良教授學科、專業(yè)名稱：病理學與病理生理學研究方向：腫瘤發(fā)病機制及防治2013年4月南華大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明，所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了論文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南華大學或其他單位的學位或證書而使用過的材料。與我共同工作的
2、同志對本研究所作的貢獻均已在論文中作了明確的說明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。作者簽名：年月日南華大學學位論文版權使用授權書本學位論文是本人在南華大學攻讀（博/碩）士學位期間在導師指導下完成的學位論文。本論文的研究成果歸南華大學所有，本論文的研究內容不得以其它單位的名義發(fā)表。本人同意南華大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，即：學校有權保留學位論文，允許學位論文被查閱和借閱；學?？梢怨紝W位論文的全部或部分內容，可以采用復印、縮印或其它手段保留學位論文；學?？筛鶕?jù)國家或湖南省有關部門規(guī)定送交學位論文
3、。同意學校將論文加入《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并按《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫出版章程》規(guī)定享受相關權益。同意授權中國科學信息技術研究所將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，并通過網絡向社會公眾提供信息服務。對于涉密的學位論文，解密后適用該授權。作者簽名：導師簽名：年月日年月日目錄一、中文摘要……………………………………………………………1二、英文摘要……………………………………………………………2三、正文1.前言…………………………………………………………42.實驗材料………………
4、…………………………………………63.技術路線…………………………………………………………94.實驗方法………………………………………………………105.實驗結果………………………………………………………196.討論………………………………………………………267.結論………………………………………………………30四、參考文獻…………………………………………………………31五、附錄…………………………………………………………34六、文獻綜述…………………………………………………………35七、碩士期間撰寫的文章
5、……………………………………………47八、致謝………………………………………………………………48siRNA抑制cortactin基因表達對喉癌Hep-2細胞增殖和侵襲的影響碩士研究生：譚桂煌指導教師：謝海龍副教授甘潤良教授中文摘要背景與目的：皮層肌動蛋白結合蛋白cortactin(corticalactin-bindingprotein)參與細胞骨架系統(tǒng)的調控、細胞外信號轉導以及細胞黏附等過程，研究表明cortactin與腫瘤的侵襲和轉移有關。然而，cortactin在喉癌中的重要作用還沒有被詳細的闡明。本
6、實驗探討siRNA(smallinterferingRNA)抑制cortactin基因表達對喉癌Hep-2細胞系體外增殖和侵襲的影響。方法：利用基因重組技術構建針對cortactin基因的小干擾RNA真核表達載體pSilencer3.1-H1neo-cortactin；用DNA測序法鑒定重組質粒；用脂質體轉染技術將重組質粒轉染Hep-2細胞，同時以轉空載體組和空白組作為對照(三組細胞分別命名為pcortactin-siRNA/Hep-2，pSilencer3.1/Hep-2，Hep-2)，G418篩選出陽性細
7、胞克??；應用Westernblot及免疫細胞化學方法分別檢測cortactin在Hep-2中的siRNA干擾效率及定位；MTT和平皿克隆形成實驗檢測細胞增殖能力；流式細胞儀檢測細胞周期分布情況；Transwell體外遷移、侵襲實驗檢測細胞遷移侵襲能力。結果：DNA測序分析表明針對cortactin基因的重組真核表達載體pSilencer3.1-H1neo-cortactin構建成功。免疫細胞化學方法顯示cortactin在Hep-2細胞胞漿中呈彌漫性表達，Westernblot顯示成功構建cortactin表
8、達下調的穩(wěn)轉喉癌細胞系pcortactin-siRNA/Hep-2。與空白組Hep-2細胞比較,pcortactin-siRNA/Hep-2的cortactin含量為11.22%(P＜0.01)；細胞生長速度明顯減慢（P＜0.05）；克隆形成率降低為21.47%(P＜0.01)；細胞中S期細胞百分比明顯降低（P＜0.05）；遷移、侵襲能力顯著降低(P＜0.01)。結論：1.成功建立cortactin
