wnt10b基因失活對人肝癌細胞增殖、周期、凋亡、遷移及侵襲的影響

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1、：Ｒ７．２學校代碼分類號３４：１０６０１密級：公開編號：Ｙ１２００１０１３？掛各屋聲資ＧＵＩＬＩＮＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ碩±學位論文ＷｎｔＷｂ基因失活對人肝癌細胞増殖、周期、調ｔ、迂移及侵襲的影響學科專業(yè)：病理學與病理生理學研究方向：講瘦基因多態(tài)性研究生姓名：吳國慧學號：Ｙ１２００１０１３學位類型：科學學位導師姓名：孫莉教授二０－五年六月獨創(chuàng)聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據我所知，除了文中特別加標注和致謝的地方外，也不包含

2、，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果未獲得（巧；如沒有其他需要特別聲明的，本欄可空）或其他教育機構的學位或證書使用過的材料一。與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名；簽字日期：部／ｒ年＾月５日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解桂林醫(yī)學院有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部口或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權桂林醫(yī)學院可將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據庫進行檢索，可采用影印、縮印或掃描等刊（光盤版）電復制手

3、段保存、匯編學位論文。同時授權中國學術期、科學技術信研本論文收錄到《中國優(yōu)秀子雜志社中國息究所將學位，通過庫》博碩±學位論文全文數(shù)據庫》、《中國學位論文全文數(shù)據并提供信息服務。（學位論文在解密后適用本授網絡向社會公眾保密的權書）：簽字：學位名論文作者簽導師＇［【主期臺之＾；興月日簽字日：瑚月日簽字日年８期年目錄Wnt10b基因失活對人肝癌細胞增殖、周期、凋亡、遷移及侵襲的影響???????????????????????????1中文摘要????????????????????????1ABSTRACT???????????????????

4、????2英漢縮略詞對照表??????????????????????4前言??????????????????????????61材料與方法???????????????????????81.1實驗材料與儀器????????????????????81.1.1細胞株??????????????????????81.2主要實驗試劑??????????????????????81.2.1實驗常用試劑??????????????????????81.2.2常用溶液的配制?????????????????????101.3主要實驗儀器???????????????????

5、???121.4實驗方法?????????????????????????131.4.1人肝癌HepG2細胞空載體株control、穩(wěn)定沉默shWnt10b#1和穩(wěn)定沉默shWnt10b#2細胞的培養(yǎng)???????????????????131.4.2WesternBlot檢測control、shWnt10b#1和shWnt10b#2細胞中Wnt10b的蛋白表達水平????????????????????????151.4.3CCK-8檢測control、shWnt10b#1和shWnt10b#2細胞增殖情況?201.4.4平板克隆（集落）形成實驗檢測細胞克隆形成能

6、力???????211.4.5流式細胞術PI染色法檢測細胞周期?????????????211.4.6Hoechst33342染色檢測細胞凋亡??????????????231.4.7劃痕愈合實驗檢測細胞遷移能力??????????????231.4.8Transwell侵襲實驗檢測細胞侵襲能力????????????241.4.9統(tǒng)計與分析???????????????????????252結果?????????????????????????262.1倒置熒光顯微鏡下拍照?????????????????262.2特異性shRNA抑制Wnt10b蛋白的表達???

7、??????????272.3CCK-8法觀察HepG2細胞增殖情況??????????????282.4細胞平板克隆形成實驗觀察克隆形成能力???????????292.5流式細胞術檢測細胞周期??????????????????302.6Hoechst33342染色檢測細胞凋亡???????????????312.7劃痕愈合實驗檢測細胞的遷移能力??????????????342.8Transwell侵襲實驗檢測細胞侵襲能力????????????363討論????????????????????????????383.1Wnt10基因失活對肝癌細胞影響的研