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《長鏈非編碼RNA H19對HL60細(xì)胞的生物功能影響和作用機(jī)制的初步研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文分類號：R733.71學(xué)校代碼：10392學(xué)科專業(yè)代碼：100201學(xué)號：2151003263碩士學(xué)位論文長鏈非編碼RNAH19對HL60細(xì)胞的生物功能影響和作用機(jī)制的初步研究Thepreliminaryresearchontheeffectoflongnon-codingRNAH19onthebiologicalfunctionofHL60cellsandMechanism學(xué)位類型：醫(yī)學(xué)碩士所在學(xué)院：協(xié)和臨床醫(yī)學(xué)院申請人姓名：劉陽學(xué)科、專業(yè)：內(nèi)科學(xué)（血液?。?dǎo)師：沈建箴教授研究
2、起止日期：2016年2月至2018年2月答辯委員會主席：陳志哲教授答辯日期：2018年5月23日二○一八年五月福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄英文縮略詞……………………………………………………………………………1中文摘要………………………………………………………………………………2英文摘要………………………………………………………………………………5前言……………………………………………………………………………………9第一部分敲低H19基因的急性白血病細(xì)胞模型的建立及功能檢測…………
3、11材料與方法……………………………………………………………………11結(jié)果……………………………………………………………………………32討論……………………………………………………………………………41結(jié)論……………………………………………………………………………43第二部分H19基因介導(dǎo)相關(guān)生物功能改變的機(jī)制的初步研究…………………44材料與方法……………………………………………………………………45結(jié)果……………………………………………………………………………51討論…………………………………………
4、…………………………………54結(jié)論……………………………………………………………………………56全文總結(jié)……………………………………………………………………………57參考文獻(xiàn)……………………………………………………………………………58綜述…………………………………………………………………………………61致謝…………………………………………………………………………………71福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文附錄英文縮略詞ALacuteleukemia急性白血病AMLacutemyeloidleukemia急性髓細(xì)
5、胞白血病M3acutepromyelocyticleukemia急性早幼粒細(xì)胞白血病lncRNAlongnon-codingRNA長鏈非編碼RNAImprintedmaternallyH19長鏈非編碼RNAH19expressedtranscriptncRNAnoncodingRNA非編碼RNADNMTDNAmethyltransferasesDNA甲基轉(zhuǎn)移酶實時熒光定量聚合酶鏈RT-qPCRReal-timeQuantitativePCR式反應(yīng)WBWesternblotting蛋白質(zhì)免疫印跡cDNAC
6、omplementaryDNA互補(bǔ)DNACRCompleteremission完全緩解率RBRetinoblastomageneRB基因RNAiRNAinterferenceRNA干擾1福建醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文長鏈非編碼RNAH19對HL60細(xì)胞的生物功能影響和作用機(jī)制的初步研究摘要目的：（1）在細(xì)胞水平敲低長鏈非編碼RNAH19(Imprintedmaternallyexpressedtranscript)，研究對HL60細(xì)胞（急性髓性白血病細(xì)胞）生物功能（增殖、凋亡、侵襲、遷移）的影響，為探索靶向診
7、治某些類型AL（acuteleukemia，AL）提供分子基礎(chǔ)依據(jù)。（2）研究H19可能作用的下游效應(yīng)分子，探索靶基因啟動子區(qū)CpG島的甲基化修飾情況，從而闡述H19對HL60細(xì)胞作用的初步機(jī)制。方法：（1）運(yùn)用RNAi干擾技術(shù)，構(gòu)建pGV248-H19-RNAi-GFP、Puro慢病毒干擾載體，轉(zhuǎn)染HL60細(xì)胞。（2）在慢病毒成功轉(zhuǎn)染HL60細(xì)胞并取得較高的轉(zhuǎn)染率后，分別用CCK-8法，克隆形成法、流式細(xì)胞儀檢測敲低H19對HL60增殖的影響。（3）采用苯并咪唑熒光染料（bisbenzimide，Ho
8、echst33258）染色法觀察細(xì)胞凋亡的形態(tài)、流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞的凋亡率、蛋白印跡法檢測細(xì)胞株中凋亡相關(guān)蛋白Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的表達(dá)，使用上述方法研究細(xì)胞凋亡情況。（4）使用Transwell小室探究H19對HL60侵襲、遷移能力的影響，測量穿膜細(xì)胞的OD值以反映穿膜細(xì)胞數(shù)，從而驗證對侵襲、遷移的影響。（5）通過文獻(xiàn)檢索，篩選H19下游可能調(diào)節(jié)的靶基因，敲低H19后在細(xì)胞水平上用RT-qPCR檢測相
