高壓氧調(diào)控急性重癥胰腺炎大鼠脾細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究

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1、中圖分類(lèi)號(hào)：R657.5+1論文編號(hào)：HBLG2015-302UDC：密級(jí)：公開(kāi)碩士學(xué)位論文高壓氧調(diào)控急性重癥胰腺炎大鼠脾細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究作者姓名：任一鵬學(xué)科名稱(chēng)：外科學(xué)研究方向：急性重癥胰腺炎學(xué)習(xí)單位：華北理工大學(xué)學(xué)習(xí)時(shí)間:3年提交日期:2015年4月29日申請(qǐng)學(xué)位類(lèi)別：臨床醫(yī)學(xué)碩士導(dǎo)師姓名：張國(guó)志教授單位：華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院論文評(píng)閱人：田煒教授單位：華北理工大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心李曙光副教授單位：華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院論文答辯日期：2015年6月3日答辯委員會(huì)主席：徐哲龍教授關(guān)鍵詞：急性重癥胰腺炎；高壓氧；Bax/Bcl-2；

2、脾細(xì)胞；凋亡唐山華北理工大學(xué)2015年6月TheEffectofHBOonApoptosisofSplenicCellinRatsWithSevereAcutePancreatitisDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofClinicalMedicinebyRenyipeng(Surgery)Supervisor:Prof

3、essorZhangGuozhiJune,2015獨(dú)創(chuàng)性說(shuō)明本人鄭重聲明：所呈交的論文是我個(gè)人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的研究成果，也不包含為獲得華北理工大學(xué)以外其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)所使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說(shuō)明并表示了謝意。論文作者簽名：日期：年月日關(guān)于論文使用授權(quán)的說(shuō)明本人完全了解華北理工大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：已獲學(xué)位的研究生必須按學(xué)校規(guī)定提交學(xué)位論文，學(xué)校

4、有權(quán)保留、送交論文的復(fù)印件，允許論文被查閱和借閱；學(xué)?？梢詫W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容采用影印、縮印或編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行公開(kāi)、檢索和交流。作者及導(dǎo)師同意論文公開(kāi)及網(wǎng)上交流的時(shí)間：□自授予學(xué)位之日起；□自年月日起。作者簽名：導(dǎo)師簽名：簽字日期：年月日簽字日期：年月日摘要摘要目的探討高壓氧治療對(duì)急性重癥胰腺炎大鼠脾細(xì)胞凋亡的影響，研究其發(fā)生機(jī)制，并為合理開(kāi)展相關(guān)臨床治療提供理論依據(jù)。方法首先選取45只SD雄性大鼠，隨機(jī)分為3組，即正常對(duì)照組（5只）、假手術(shù)（sham）組（20只）、急性重癥胰腺炎（SAP）組（20只），其中sham組

5、只進(jìn)行單純的開(kāi)關(guān)腹術(shù)，SAP組均采用逆行膽胰管注射?；悄懰徕c的方法制備胰腺炎模型，sham組和SAP組各分為4個(gè)亞組，每組5只，分別在術(shù)后3h、6h、12h和24h處死。檢測(cè)正常對(duì)照組和各模型組大鼠血淀粉酶，并用Westernblot方法檢測(cè)所提取的各組脾組織蛋白中Bax和Bcl-2的表達(dá)量，Bax在急性重癥胰腺炎各亞組中表達(dá)以6h組最高，之后降低；Bcl-2表達(dá)呈遞減趨勢(shì)，故選取SAP-6h組為HBO干預(yù)組；再選取30只SD雄性大鼠，隨機(jī)分為急性重癥胰腺炎高壓氧治療（SAP-HBO）組（15只）和急性重癥胰腺炎6h（SAP-

6、6h）組（15只），其中SAP-HBO組于造模成功后1h內(nèi)給予高壓氧治療（壓力為2ATA，氧濃度98%，治療時(shí)間為1h），分別于造模后6h處死SAP-HBO組和SAP-6h組。計(jì)算各組大鼠腹水量；HE染色觀察胰腺組織病理變化；Westernblot方法檢測(cè)所提取的各組脾組織蛋白中Bax和Bcl-2的表達(dá)量；采用末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的標(biāo)記染色法（TUNEL法）檢測(cè)脾臟細(xì)胞的凋亡，計(jì)算凋亡指數(shù)（AI）。結(jié)果1.SAP-HBO組Bax表達(dá)明顯低于SAP-6h組；SAP-HBO組Bcl-2表達(dá)明顯高于SAP-6h組；2.SAP-H

7、BO組凋亡指數(shù)（30.072±1.143）明顯低于SAP-6h組（58.440±1.263）；3.SAP-6h組胰腺組織標(biāo)本可見(jiàn)明顯出血壞死，大量炎細(xì)胞浸潤(rùn)，而SAP-HBO組胰腺組織標(biāo)本出血壞死及炎細(xì)胞浸潤(rùn)情況輕于SAP-6h組；4.SAP-HBO組腹水量（6.200±0.960ml）明顯低于SAP-6h組（11.033±1.187ml）。結(jié)論SAP時(shí)，高壓氧治療可能通過(guò)增強(qiáng)抗凋亡蛋白Bcl-2的表達(dá)，抑制促凋亡蛋白Bax的表達(dá)來(lái)抑制脾細(xì)胞的凋亡，減少免疫細(xì)胞的耗竭，調(diào)控機(jī)體免疫功能狀態(tài)，保持機(jī)體免疫平衡，以此改善急性重癥胰

8、腺炎。圖8幅；表4個(gè)；參36篇。關(guān)鍵詞：急性重癥胰腺炎；高壓氧；Bax/Bcl-2；脾細(xì)胞；凋亡分類(lèi)號(hào)：R657.5+1-I-華北理工大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractObjectiveToinvestigatetheeffectofHBOonapoptosisofspleno