高壓氧對(duì)急性重癥胰腺炎大鼠腸屏障的影響.pdf

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1、今日健康2015年5月第14卷第5期·l68·JINRIJIANKANGMay2015Vo1．14No，5高壓氧對(duì)急性重癥胰腺炎大鼠腸屏障的影響陳迪張國(guó)志王長(zhǎng)友崔明新(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院普通外科，河北唐山，063000)【摘要】目的探討高壓氧治療在急性重癥胰腺炎中的有效性。觀察I-t／30在治療大鼠急性胰腺炎的過程中，對(duì)腸屏障的保護(hù)作用，探討其可能機(jī)制，并為合理開展相關(guān)臨床治療提供理論依據(jù)。方法首先選取SD雄性大鼠，采用逆行膽胰管注射牛黃膽酸鈉的方法制備胰腺炎模型。SAP—H．BO組于造模成功后lh內(nèi)給予高壓氧治療(壓力為2ATA，氧濃度9

2、8％，治療時(shí)間為lh)，在術(shù)后3h、6h、12h和24h處死。檢測(cè)正常對(duì)照組和各模型組大鼠血淀粉酶。計(jì)算SAP組及SAP-HAO組大鼠腹水量；用ELISA法檢測(cè)血液中IL一2、IL一6、TNF一0【水平及血DAO活性。結(jié)果1、SAP—HBO組腹水量明顯低于SAP組；2、SAP一／-I130組IL-2、IL-6及TNF一水平明顯低于SAP組；3、SAP—HBO組血DAO濃度明顯低于SAP組。結(jié)論SAP時(shí)，高壓氧治療可能通過控制炎癥因子，保護(hù)大鼠腸黏膜屏障功能，以此改善急性重疽胰腺炎。引言采血管內(nèi)，采血約2．5mL，室溫下待凝血后，以3000r／

3、min離心15rain，分急性胰腺炎(Aeu~pancreatitis，AP)是胰酶在一線內(nèi)被激活后引起胰離得到的上清液即為血清，移液槍吸入1．5ml至EP管中。正常對(duì)照組及腺自身消化所產(chǎn)生的局部炎性反應(yīng)，患者病死率約為5％一10％t”。臨床sham組同法取樣，使用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)血清胰淀粉酶(AMY)的變化?？煞譃檩p癥急性胰腺炎和重癥急性胰腺炎，前者多呈自限性，而后者起1．2．5腹水收集及測(cè)量：SAP組及SAP—HAO組大鼠于術(shù)后3、6、病急，進(jìn)展快，病情重，死亡率高達(dá)30％t2-3~。12、24h再次麻醉，經(jīng)原腹部切口入腹，使用注射器盡可

4、能吸盡大鼠腹腔作為外科常見急腹癥，除其本身的病變外，還極易并發(fā)全身炎癥反及盆腔液體，收集于量筒中觀察腹水性狀并測(cè)量腹水量。應(yīng)綜合癥(SIRS)和多器官功能衰竭(MODS)等并發(fā)癥。目前也有許多的1．2．6ELISA法測(cè)定血液中DAO、IL一2、IL一6、TNF—o【的水平：于術(shù)研究表明SAP時(shí)腸腔內(nèi)隨著缺血使?fàn)I養(yǎng)缺失，黏膜細(xì)胞出現(xiàn)凋亡使腸屏后第3、6、12、24h再次麻醉，經(jīng)下腔靜脈采血，以3000r／rain離心15min，障通透性改變，大量細(xì)菌及內(nèi)毒素進(jìn)入血液循環(huán)，從而誘發(fā)MODSt4-~。分離得到的上清液即為血清，移液槍吸人1．5ml至

5、EP管中。嚴(yán)格醫(yī)學(xué)的不斷進(jìn)步，在研究SAP的道路上除了機(jī)制和治療方案，越來按照購買試劑盒的說明書步驟定量測(cè)量?jī)山M大鼠血清中的DAO及細(xì)越多的人開始注重SAP的輔助治療。本實(shí)驗(yàn)通過建立大鼠SAP模型，觀胞因子水平。察HBO對(duì)于SAP的治療效果，探討其可能的機(jī)制，為合理開展相關(guān)臨床1．2．7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X±s)表示，采用治療提供理論依據(jù)。SPSS19．0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，ELISA結(jié)果使用單因素方差分析進(jìn)行兩兩1材料與方法比較，以P<0．05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1．1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：成年健康雄性sD大鼠65只，250—280g，由

6、河北聯(lián)1-3結(jié)果合大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供。建模的實(shí)驗(yàn)大鼠術(shù)前禁食12h，自由飲水。1-3．1各組大鼠血清淀粉酶的變化ELISA試劑盒由上海信帆生物科技有限公司提供。血清酶學(xué)結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，模型組3、6、12、24h各亞組1．2實(shí)驗(yàn)方法血清淀粉酶(AMY)升高，且與正常對(duì)照組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

7、O)組(2O只)。其中sham組只進(jìn)行單純的開關(guān)腹術(shù)，SAP組及SAP-HAO組均采用逆行膽胰管注射牛黃膽酸鈉的方法制備胰腺炎模型。sham組、SAP組及SAP—HAO組分為4個(gè)亞組，每組5只。sham組和SAP組在術(shù)后3h、6h、12h和24h處死。SA咖O組于造模成功后1h內(nèi)給予高壓氧治療(壓力為2ATA，氧濃度98％，治療時(shí)間為1h)，在術(shù)注：SAP組與對(duì)照組組比，P<0．05；SAP—HAO組與對(duì)照組組后3h、6h、12h和24h處死。比，P<0．05；1．2．2動(dòng)物模型的制備：選成年SD大鼠，術(shù)前12h禁食，自由飲水，1．3．2SA

8、P組和SAP—HBO組腹水量的變化采用10％水合氯醛O．22g／lOOg行腹腔內(nèi)注射麻醉，麻醉生效后于手術(shù)臺(tái)經(jīng)過HBO治療后，SAP—HBO組大鼠腹水量較SAP組大