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1、乙型腦炎重組痘苗病毒疫苗安全性評價研究StudyofSafetyEvaluationofVaccineofRecombinantVacciniaViruswithJapaneseEncephalitisVirus作者姓名:肖朋朋領(lǐng)域(方向):預(yù)防獸醫(yī)指導(dǎo)教師:金寧一研究員類別:獸醫(yī)碩士答辯日期:2015年6月3日中文摘要乙型腦炎重組痘苗病毒疫苗安全性評價研究近年來,乙型腦炎病毒(JEV)在我國甚至亞洲地區(qū)廣泛流行,威脅著人和家畜的安全,經(jīng)過這些年我國政府及相關(guān)部門的努力,患乙型腦炎的人的發(fā)病率及死亡率不斷下降,但是對于豬的乙型腦炎的
2、預(yù)防還沒有豬專用的乙型腦炎病毒疫苗,目前一般采用弱毒疫苗SA14-14-2對豬進行免疫。因此,根據(jù)當前我國養(yǎng)豬行業(yè)的形勢,需要一種豬專用的乙型腦炎病毒疫苗,本實驗室研制的含乙型腦炎E抗原基因重組痘苗病毒疫苗rVTT-JEVE具有良好的免疫效果,但是目前尚不能證明該疫苗的安全性。本研究對本實驗室研制的重組痘苗病毒疫苗rVTT-JEVE的安全性進行評價,首先對重組痘苗病毒rVTT-JEVE的理化特性進行研究,通過將其進行溫度、酸堿度、乙醚、胰蛋白酶、氯仿、超聲波及紫外線等理化因子的適當?shù)牟煌兞康奶幚恚瑱z測其經(jīng)處理后的病毒滴度的變化,證
3、明其對高溫敏感,對酸堿有一定的耐受性,對氯仿、胰蛋白酶、超聲波、紫外線均有一定程度的敏感性,完成了理化特性的研究。首先應(yīng)用小鼠進行了免疫相關(guān)研究,且對重組痘苗病毒疫苗株rVTT-JEVE的安全性進行了初步評價,免疫小鼠后產(chǎn)生的特異性抗體水平顯著高于弱毒疫苗組和對照組(P<0.05),經(jīng)RT-qPCR方法檢測重組痘苗病毒在小鼠體內(nèi)殘留發(fā)現(xiàn),重組痘苗病毒在小鼠體內(nèi)5-7d后拷貝數(shù)明顯減少,通過分析其體液免疫及病毒殘留,證明該候選疫苗具有良好的體液免疫且病毒在小鼠體內(nèi)殘留僅5-7d。通過豬體免疫,分析其免疫特性、病毒殘留和環(huán)境釋放,證實了
4、該重組痘苗病毒候選疫苗株rVTT-JEVE有良好的免疫特性,重組痘苗病毒在豬體內(nèi)殘留僅3d且不會向環(huán)境中釋放,表明該候選疫苗具有良好安全性。關(guān)鍵詞:重組痘苗病毒;乙型腦炎病毒;痘苗病毒;安全性評價;環(huán)境釋放IAbstractStudyofSafetyEvaluationofVaccineofRecombinantVacciniaViruswithJapaneseEncephalitisVirusOverthepastfewyears,Japaneseencephalitisvirus(JEV)spreadwidelyinourcou
5、ntryandeveninAsia,threateningthesafetyofpeopleandlivestock.WiththeeffortsoftheChinesegovernmentandrelevantdepartments,themorbidityandmortalityofpeoplesufferingfromJapaneseencephalitisdeclinedgradually.ButthereisnoJapaneseencephalitisvirusvaccineforpigtopreventJapanesee
6、ncephalitisvirus.CurrentlytheattenuatedvaccineSA14-14-2isusedgenerallyforimmunizationofpigs.Therefore,accordingtothecurrentsituationofChina'spigindustry,adedicatedsafeandeffectiveJapaneseencephalitisvirusvaccineforswineisneeded.TherecombinantvacciniavirusvaccinerVTT-JE
7、VEwithEantigengeneofJapaneseencephalitisvirusdevelopedinourlaboratoryhasgoodimmuneeffect,butthesafetyofthevaccinehasnotbeenproven.Inthisstudy,weevaluatedthesafetyoftherecombinantvacciniavirusvaccinerVTT-JEVEdevelopedbyourlaboratory.Inthefirstplace,westudiedthephysicala
8、ndchemicalpropertiesofrecombinantvacciniavirusrVTT-JEVEtreatedbytemperature,pH,ether,trypsin,chloroform,ultrasonicand