二十碳五烯酸對(duì)赤潮微藻氧化脅迫的影響及細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究

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4、法，具有快速、高效、無(wú)二次污染等特點(diǎn)。從大型海藻中提取出來(lái)的不飽和脂肪酸來(lái)抑制赤潮微藻的生長(zhǎng)是本文研究的重點(diǎn)。二十碳五烯酸(EPA)是不飽和脂肪酸的典型代表，普遍存在于水生動(dòng)植物體內(nèi)。本文通過(guò)觀察EPA對(duì)赤潮微藻的生長(zhǎng)以及氧化脅迫方面的影響，進(jìn)一步對(duì)細(xì)胞的凋亡機(jī)制進(jìn)行了探究，從新的視角闡明化感機(jī)制，為建立一套完善而實(shí)用的赤潮防治方法提供理論依據(jù)。赤潮異彎藻和米氏凱倫藻是海洋中比較常見(jiàn)的單細(xì)胞藻類，作為海洋中的初級(jí)生產(chǎn)者，是海洋食物鏈的關(guān)鍵所在。本文通過(guò)實(shí)驗(yàn)，分別從“個(gè)體水平—細(xì)胞水平—亞細(xì)胞水平—分子水平”上研究不飽和脂肪酸

5、對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻影響，取得了以下研究結(jié)果：1.EPA對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻生長(zhǎng)的影響EPA對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻生長(zhǎng)的影響均呈現(xiàn)出低濃度促進(jìn)高濃度抑制的趨勢(shì)。表現(xiàn)出明顯的“低促高抑”現(xiàn)象。2.EPA對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻氧化脅迫的影響(1)在EPA的作用下，赤潮異彎藻和米氏凱倫藻的SOD、CAT、POD、GSH、ASA均出現(xiàn)一定的應(yīng)激活性，都表現(xiàn)出“低促高抑”的現(xiàn)象。(2)藥物處理后，ROS水平、·OH、H-出現(xiàn)先上升后下降的趨2O2的水平也急劇上升，O2·勢(shì)，這一現(xiàn)象可能與細(xì)胞內(nèi)其它物質(zhì)對(duì)O-2·的作用有關(guān)。

6、(3)MDA含量先上升后下降，但下降趨勢(shì)不是很顯著，總體來(lái)說(shuō)MDA的含量保持在一個(gè)較高的水平，其含量的變化體現(xiàn)了微藻膜系統(tǒng)受損傷的程度。(4)通過(guò)對(duì)照組可以看出，赤潮異彎藻和米氏凱倫藻本身的酶活性就不同。3.EPA對(duì)赤潮異彎藻和米氏凱倫藻細(xì)胞凋亡機(jī)制的影響(1)臺(tái)盼藍(lán)染色實(shí)驗(yàn)顯示：EPA作用下，赤潮異彎藻和米氏凱倫藻的生長(zhǎng)出現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)。(2)EPA作用下，赤潮異彎藻細(xì)胞出現(xiàn)嚴(yán)重變形，細(xì)胞膜破壞嚴(yán)重，外形改變，有凹陷，部分地方出現(xiàn)斷裂，外膜出現(xiàn)溶解現(xiàn)象。而細(xì)胞內(nèi)部的淀粉粒增多，液泡增多變大，質(zhì)體出現(xiàn)空洞，基粒片層間隙

7、變大，出現(xiàn)水腫現(xiàn)象，葉綠體外膜出現(xiàn)溶解現(xiàn)象。而米氏凱倫藻細(xì)胞出現(xiàn)明顯的質(zhì)壁分離現(xiàn)象，細(xì)胞壁逐漸溶解斷裂，細(xì)胞外形發(fā)生嚴(yán)重改變，細(xì)胞內(nèi)部葉綠體界限不清，出現(xiàn)溶解。(3)EPA處理赤潮藻后，赤潮異彎藻和米氏凱倫藻線粒體膜電位出現(xiàn)下降的現(xiàn)象。2曲阜師范大學(xué)2012級(jí)碩士畢業(yè)論文(4)EPA處理赤潮藻后，赤潮異彎藻和米氏凱倫藻細(xì)胞內(nèi)的caspases-3,9含量均上升。(5)在藥物作用下，赤潮異彎藻和米氏凱倫藻細(xì)胞內(nèi)CytC從線粒體膜間歇釋放出來(lái)。(6)在藥物作用下，赤潮異彎藻和米氏凱倫藻細(xì)胞內(nèi)Bcl-2家族蛋白受到抑制。關(guān)鍵詞：E

8、PA；赤潮異彎藻；米氏凱倫藻；氧化脅迫；細(xì)胞凋亡機(jī)制3曲阜師范大學(xué)2012級(jí)碩士畢業(yè)論文AbstractNowadays,withthedevelopmentofeconomicactivitymarineindustry,thepollutiondamagetomarineenviron