油桐ssr分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)與遺傳多樣性的研究

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1、；密級(jí)：分類(lèi)號(hào)學(xué)校代號(hào)；１０５３８學(xué)號(hào)：２２０１２００１６４？ＣｅｎｔｒａｌＳｏｕｔｈＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＦｏｒｅｓｔｒ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｙｇｙ碩±學(xué)術(shù)學(xué)位論文油桐ＳＳＲ分子標(biāo)記的開(kāi)發(fā)與遺傳《樣性的研究作者姓名：賈寶光導(dǎo)師姓冶：張淋培養(yǎng)學(xué)院：林學(xué)院學(xué)科若稱(chēng)；經(jīng)濟(jì)林研究方向：經(jīng)濟(jì)林栽培與育種？提交日期：２０１５年６月ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＭｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉ化ＭａｒｋｅｒｓａｎｄＩｎｖｅｓｔ

2、ｉａｔｉｏｎｏｆｇＧｅｎｅｔｉｃＤｉｖｅｒｓｉｔｉｎＴｕｎＴｒｅｅ（Ｖｅｒｎｉｃｉａｏｒｄｉｉ）ｙｇｆｂｙＪＴＡＢａｏｇｕａｎｇＡｔｈｅｓｉｓｓｕｂｍｉｔｔｅｄｉｎａｒｔｉａｌｓａｔｉｓｆａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐＲｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｆｏｒｔｈｅｄｅｒｅｅｏｆｑｇＭａｓｔｅｒｏｆＡｒｏｎｏｍｇｙＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒＰｒｏｆｅｓｓｏｒＺＨＡＮＧＬｉｎＣｅｎｔｒａｌＳｏｕ化Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆ？〇化８巧ａｎｄＴｅｃ

3、ｈｎｏｌｏｇｙ４９８ＳｈａｏｓｈａｎＳｏｕｔｈＲｏａｄ，ｌｌａｎｘｉｎＤｉｓｔｒｉｃｔＣｈａｎｇｓｈａＨｕｎａｎ４１０００４，Ｐ．Ｒ．ＣＨＩＮＡＪｕｎｅ，２０１５中齋妹來(lái)種技夫ｆ學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的論文是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的研巧成果。除了文中特別加Ｗ標(biāo)注引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)的成果作品，也不包含為獲得中南林業(yè)科技大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)所使用過(guò)的材料。對(duì)本文的研究作出重要

4、貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中明確方式表明。本人完全意識(shí)到本聲明的法律后果由本人承擔(dān)。作者簽名：廣錄州各年ｒ月日中齋棘巫種投乂營(yíng)學(xué)位論文版權(quán)使用授枚書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件或電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)中南林業(yè)科技大學(xué)可將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可從采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。龍學(xué)仿屬千．１、保密□，在＿＿年解密后適

5、用本授權(quán)書(shū)。＿＂２、不保密０。＂＂（請(qǐng)您在Ｗ上相應(yīng)方框打Ｖ）作者簽名【：裹鉤導(dǎo)師簽名：年古月父日苗年ｒ月令曰（摘要’油桐（Ｆ如ｗｃ切於Ｗ巧屬于大戟科油桐屬，是世界著名的重要木本油料植物，更在生物能源方面擁有巨大的開(kāi)發(fā)價(jià)值，所Ｗ將油桐作為木本油料樹(shù)種開(kāi)展長(zhǎng)期的育種技術(shù)研究。由于油桐種質(zhì)資源的數(shù)量、性狀表現(xiàn)、遺傳多樣性等研究的深度很大程度上制約著育種的成效，且油桐是我國(guó)恃有的經(jīng)濟(jì)林木，具有極其豐富的種質(zhì)資源，但是油桐中開(kāi)發(fā)出來(lái)的分子標(biāo)記較少，遠(yuǎn)不能滿(mǎn)足分子育種研究

6、的需要。因此，本研究將開(kāi)發(fā)高效的分子標(biāo)記為油桐遺傳多樣性的研究、提供重要的技術(shù)手段，同時(shí)為油桐的分子標(biāo)記輔助育種、遺傳連鎖圖譜構(gòu)建群體遺傳學(xué)研究、品種純度鑒定、系譜分析等提供理想的分子標(biāo)記，有利于促進(jìn)油桐資源的品種選育與種質(zhì)開(kāi)發(fā)、利用。主要研究結(jié)果如下：一１、從油桐種子ＥＳＴ文庫(kù)中獲得非冗余單ＥＳＴ序列１０４７條，用ＭＩＳＡ軟－衛(wèi)星件從１７３個(gè)非冗余ＥＳＴ序列中搜索得到２１２個(gè)ＳＳＲ位點(diǎn)。在２６ｂｐ的微中，主要是二核昔酸重復(fù)類(lèi)型為主導(dǎo)（６８．４％），其次是Ｈ核巧酸重復(fù)類(lèi)型（２５

7、．９４％）。其優(yōu)勢(shì)基元為ＡＧ／ＣＴ（４３．８７％）、ＡＴ／ＡＴ１９．３４％）和ＡＧＣ／ＧＣＴ（５－．６６％。ｒｉｍｅｒ５（利用軟件Ｐ．０，設(shè)計(jì)６８對(duì)ＥＳＴＳＳＲ引物，選擇了１０個(gè)不同品）系的油桐樣本進(jìn)行ＰＣＲ擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)過(guò)瓊脂糖電泳和毛細(xì)管電泳檢測(cè)，最終獲４對(duì)多態(tài)－ＳＳＲ得了１性的ＥＳＴ標(biāo)記。２、運(yùn)用ＭＩＳＡ軟件對(duì)油桐種子轉(zhuǎn)錄組的８１８０５條Ｕｎｉｅｎｅｓ進(jìn)行ＳＳ民位點(diǎn)ｇ的搜索，在５４０４個(gè)ＩＭｅｎｅｓ中搜索得到６３６６個(gè)ＳＳＲ位點(diǎn)，并統(tǒng)計(jì)分析其ｇｅｎｃ－－二Ｈ核昔酸重復(fù)類(lèi)

8、ＧｉＳＳＲ的組成與分布特點(diǎn)。在２６ｂｐ的微衛(wèi)星中，核和型占主導(dǎo)地位９２％，其優(yōu)勢(shì)基元為ＡＧ／ＣＴＧ１．３４％）、ＡＡＧ／ＣＴＴ（１３．３１％，共占）ＡＴ－和／ＡＴ（１１．９９％）。用軟件Ｐｒｉｍｅｒ５．０，設(shè)計(jì)９８對(duì)ＧｅｎｉｃＳＳＲ引物，從１６９份油桐種質(zhì)資源樣本中選取具有代表不同地理來(lái)源的４１個(gè)樣本進(jìn)行ＰＣＲ擴(kuò)増，５ｅｎ－產(chǎn)物經(jīng)過(guò)瓊脂糖電泳和毛細(xì)管電泳檢測(cè)，最終篩選出１對(duì)多態(tài)性