豬胞內(nèi)勞森氏菌lamp、pcr快速檢測方法的建立及應(yīng)用

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2、導(dǎo)師向貴友窩級獸醫(yī)師，「、．氣Ｖ：＇四川巨星集團(tuán)，乂．式，＾學(xué)位類別獸醫(yī)碩壬．如’＇．、＇．Ａ，。一／？／領(lǐng)域名稱獸醫(yī)！秦，、？，，，＂■研究方向動物微生物與免疫學(xué)．．一？，＇、．．？？＇－．＞．換．．’．，／■．．．．＇，－Ｘ，、＇．？－、、‘／？．ｖ＿？Ｉ一－－－－＾．＊＾，、、２０１５年０６月．、、‘．一、－－．占；；＊－？－？‘．＊．％，．Ｖ＇ｒ，：一？Ｉ巧■，ｃ

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4、ｃｔｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＹａｎＱｉｇｕｉＲｅｓｅａｒｃｈｄｉｒｅｃｔｉｏｎ：ＶｅｔｅｒｉｎａｒＭａｓｔｅｒｙ化ｎｅ２０１５論文獨(dú)削性寅明本人鄭重聲明：所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的＾。成果盡我所知，除了文中特別加圳示注和致謝的地方外，學(xué)位論文中不包含其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研巧成果，也不包含為獲得四川農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)一構(gòu)的學(xué)位或證書所使用過的材料。與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。＇研究生簽名；年ｔ月幽＾緊心關(guān)于論文使用授

5、枚的聲明本人完全了解四川農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即：學(xué)校有權(quán)保留＾，允許論文被查閱和借閱，可＞并向國家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版［＾采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意四川農(nóng)業(yè)大學(xué)可１＾＾？用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容。研巧生簽名：＞咬年日５復(fù)導(dǎo)師簽名ｉｘ（月訴：辦如ｊ中文摘要豬増生性腸炎（Ｐｏｒｃｉｎｅｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｅｎｔｅｒｏｐａｔｈｙ，ＰＰＥ）是由于豬感染胞內(nèi)勞森氏ｐ一１９ｉｅｓｔｅｏｈｗａｒｃｅ菌引起的種傳染性腸道出血性的

6、消耗性疾病，３１年Ｂ和Ｓ首次報道了該病，１９７４年民ｏｗｌａｎｄ等證實(shí)了該病，該病現(xiàn)已成為世界上流行最廣的豬病之一。雖然，豬増生性腸炎引起的死亡率不高，但由于其主要發(fā)病為慢性型，使得患病豬生長緩慢，飼料利用率和平均日增重明顯下降，淘汰率上升，導(dǎo)致豬場經(jīng)濟(jì)損一失嚴(yán)重。些養(yǎng)豬業(yè)發(fā)達(dá)的國家和地區(qū)，由于飼料中抗生素的禁用或限用，導(dǎo)致豬増生性腸炎發(fā)病率逐年上升。在我國，臨床豬増生性腸炎疑似病例有逐漸增多的趨勢，但我國對豬增生性腸炎的研巧還處于起步階段，缺乏對該病的流行病學(xué)調(diào)查，因此開發(fā)快速準(zhǔn)確的臨床檢測方法對于該病的研究具有重要的意義。

7、本試驗(yàn)根據(jù)弓，針對胞內(nèi)勞森氏菌ＡＭ１８０２５．２．１基因序列分別設(shè)計Ｉ物設(shè)計原理－ｍｅｄａｅｄｏｅｒｍａｍｃａｏｎ了ＰＣ民和環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增技術(shù)。ｏｏｐｉｔｉｓｔｈｌａｐｌ近ｔｉ，ＬＡＭＰ）特異性引物ＰＣＲＬＡＭＰ、，通過對方法退火溫度的優(yōu)化，方法的反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間內(nèi)外引物比例、ｄＮＴＰ濃度、鎮(zhèn)離子濃度，、甜菜堿的優(yōu)化確定其最優(yōu)反應(yīng)條件后成功建立了胞內(nèi)勞森氏菌的ＰＣ民和ＬＡＭＰ兩種檢測方法。靈敏度實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明建立３、的ＰＣＲ方法可檢出的拷貝數(shù)為１０個，ＬＡＭＰ方法可檢出的拷貝數(shù)為ｌＯＨ；特異性試驗(yàn)表明，ＰＣ民方法和ＬＡＭＰ方

8、法對Ｅ．ＣＯ／／、說加ｅｗｅ化７、ＰＥＤＶ、ＰＲＶ?jǐn)U