腫瘤來(lái)源的外泌體在耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞自我種植中的作用及其機(jī)制研究

腫瘤來(lái)源的外泌體在耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞自我種植中的作用及其機(jī)制研究

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1、分類(lèi)號(hào):位代碼:密級(jí)博士學(xué)位論文中文論文題目:腫瘤來(lái)源的外泌體在耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞自我種植中的作用及其機(jī)制研究英文論文題目:腫瘤來(lái)源的外泌體在耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞自我種植中的作用及其機(jī)制研究論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:論文評(píng)閱人評(píng)閱人評(píng)閱人評(píng)閱人評(píng)閱人答辯委員會(huì)主席:鄭樹(shù)教授浙江大學(xué)委員葉再元教授浙江省人民醫(yī)院委員陳力教授浙江大學(xué)委員吳育連教授浙江大學(xué)委員程向東教授浙江省中醫(yī)院委員答辯日期:年月Theroleoftumor-derivedexosomesinanoikis-resistancehepatocellul

2、arcarcinomacells'self-seedingAuthor'ssignature:從:::,浙江大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研宄工作及取得的研宄成果。除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研宄成果,也不包含為獲得浙江大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書(shū)而使用過(guò)的材料。與我一同工作的同志對(duì)本研宄所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名簽字日期:年月學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書(shū)本學(xué)位論文作者完全了解浙江大學(xué)有權(quán)

3、保留并向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交本論文的復(fù)印件和磁盤(pán),允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)浙江大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索和傳播,可以釆用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)書(shū))學(xué)位論文作者簽名:導(dǎo)師簽一“—簽字日期:年月簽字曰期年曰浙江大學(xué)博士學(xué)位論文致謝致謝歲月如梭,光陰似箭,三年多的博士研究生學(xué)習(xí)生涯轉(zhuǎn)瞬即逝。值此論文完成之際,謹(jǐn)以此文獻(xiàn)給所有關(guān)心、愛(ài)護(hù)、教導(dǎo)、幫助我的老師、朋友及親人們,致以我最誠(chéng)摯的謝意與最美好的祝愿!首先,我要衷心的感謝我的導(dǎo)

4、師梁廷波教授數(shù)年來(lái)對(duì)我的悉心指導(dǎo)及無(wú)微不至的關(guān)心和幫助。他在我博士課題的設(shè)計(jì)、進(jìn)展和完成的過(guò)程中傾注了大量的心血,他一絲不茍的治學(xué)態(tài)度,求實(shí)的科研作風(fēng),淵博的學(xué)知,高超的臨床技能,高尚的醫(yī)德醫(yī)風(fēng)深深的影響了我,是我今后治學(xué)行醫(yī)生涯的光輝楷模!其次,要真誠(chéng)的感謝我的師兄陳偉、馬濤、張句、俞夏臻以及夏雪峰、梁超、支梟、陳煒、周悅、聞良、陳恩江、張劍、魏濤、葉龍?jiān)啤⑿煳虻缺娢粠煹軒熋?,無(wú)論在科研還是生活上,他們給予的無(wú)私幫助和熱心支持,讓我感慨甚深,同窗之間兄弟般的情誼令我終生難忘!此外,感謝浙醫(yī)二院臨床研究中心的張行老

5、師、陳唯唯老師、葉景佳老師在實(shí)驗(yàn)平臺(tái)方面給予的大力支持。感謝浙醫(yī)一院外科實(shí)驗(yàn)室謝海洋老師、殷勝勇老師、魚(yú)達(dá)老師及陳輝、洪良杰等眾位朋友鼎力相助。感謝鄭小小、章淑芬、蔡盈、胡立強(qiáng)、陳聰琳、謝尚志等實(shí)驗(yàn)室工作人員的幫助,感謝其他幫助過(guò)我的朋友,謝謝你們!最后,感謝我的父母及妻子余秀清女士,是他們背后默默無(wú)私的付出,讓我這一生有幸在醫(yī)學(xué)道路上不斷前行。年月曰浙江大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要腫瘤來(lái)源的外泌體在耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞自我種植中的作用及其機(jī)制研究浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院外科學(xué)(普外)博士研究生劉昊導(dǎo)師梁廷波教授中文摘要實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>

6、肝細(xì)胞肝癌是全球范圍內(nèi)最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,其術(shù)后高復(fù)發(fā)率是制約肝癌治療效果的首要因素。其中在循環(huán)系統(tǒng)中耐失巢凋亡的肝癌循環(huán)腫瘤細(xì)胞在肝癌的復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移中起到了重要作用。腫瘤細(xì)胞脫落入血已被證實(shí)發(fā)生于腫瘤形成的早期,然而,并非所有進(jìn)入循環(huán)的腫瘤細(xì)胞都會(huì)形成轉(zhuǎn)移灶,這取決于耐失巢凋亡腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性、定植器官的微環(huán)境及機(jī)體的免疫狀態(tài)等因素。本研究的目的就是觀察耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞的腫瘤自我種植現(xiàn)象,以及腫瘤來(lái)源的外泌體在肝癌細(xì)胞自我種植中的作用及內(nèi)在機(jī)制。材料與方法:本研究通過(guò)包被的低粘附培養(yǎng)板對(duì)正常肝癌細(xì)胞系和進(jìn)行長(zhǎng)

7、時(shí)間連續(xù)懸浮培養(yǎng)后獲得耐失巢凋亡的肝癌細(xì)胞株,通過(guò)細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)凋亡、實(shí)驗(yàn)等方法,觀察耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞株細(xì)胞株的增殖能力、抗凋亡能力、侵襲轉(zhuǎn)移能力等生物學(xué)特性的變化。通過(guò)構(gòu)建裸鼠肝癌原位荷瘤模型,觀察耐失巢凋亡的肝癌細(xì)胞在體內(nèi)的腫瘤自我種植現(xiàn)象。在體外通過(guò)提取不同組織來(lái)源細(xì)胞的分泌物及分泌物不同成分檢測(cè)其對(duì)耐失浙江大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要巢凋亡肝癌細(xì)胞穿內(nèi)皮細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。在機(jī)制上,利用芯片技術(shù)對(duì)不同細(xì)胞來(lái)源外泌體中表達(dá)檢測(cè)進(jìn)行檢測(cè),同時(shí)對(duì)外泌體共培養(yǎng)后耐失巢凋亡肝癌的表達(dá)譜進(jìn)行檢測(cè),結(jié)合兩

8、者結(jié)果預(yù)測(cè)外泌體中對(duì)耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞穿內(nèi)皮細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力的調(diào)節(jié),并進(jìn)一步通過(guò)干擾技術(shù)在相應(yīng)的耐失巢調(diào)亡肝癌細(xì)胞中進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)(肝癌細(xì)胞系和隨著失巢培養(yǎng)時(shí)間的遞增逐漸聚集成團(tuán)。(耐失巢凋亡肝癌細(xì)胞的遷移能力明顯增強(qiáng)而侵襲能力無(wú)明顯變化,在失巢環(huán)境中再次分散成單細(xì)胞時(shí)耐失巢凋亡細(xì)胞株具有較快聚集成團(tuán)能力,且抗失巢凋亡能力顯著增強(qiáng)。耐失巢凋亡肝

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