銅綠假單胞菌的耐藥表型與耐藥基因型研究

銅綠假單胞菌的耐藥表型與耐藥基因型研究

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1、K^if^IAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEI全曰制碩士專業(yè)學(xué)位(畢業(yè))論文銅綠假單胞菌的耐藥表型與耐藥基因型研究學(xué)位申請(qǐng)人:胡凡指導(dǎo)教師:李玉榮副教授學(xué)位名稱:獸醫(yī)碩士研究領(lǐng)域:授予單位:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期:二〇一五年五月三H—日獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知,除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果,也不句.含為獲得河北農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過(guò)的材料。與我一同工作

2、的同志對(duì)本研究所做的任何貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:簽字曰期:^年6月I曰學(xué)位論文版權(quán)使W授權(quán)15太犖位論j作者完令了解河北農(nóng)業(yè)大學(xué)冇關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,有權(quán)保留并向國(guó)家冇關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和磁盤,允仵論文被汽閱和借閱。本人授權(quán)河北農(nóng)業(yè)大學(xué)可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入存關(guān)數(shù)據(jù)痄進(jìn)行檢索,可以采用影卬、縮印成掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。(保密的學(xué)位論文在解密后適用本授權(quán)15)學(xué)位論文作者簽名:導(dǎo)師簽名:簽字曰期:、《年簽字日期:^>'1年學(xué)位論文作者畢

3、業(yè)后去向:工作單位:電話:通訊地址:郵編:分類號(hào):S854單位代碼:10086密級(jí):公開學(xué)號(hào):20139140688銅綠假單胞菌的耐藥表型與耐藥基因型研究學(xué)位申請(qǐng)人:胡凡指導(dǎo)教師:李玉榮副教授學(xué)位名稱:獸醫(yī)碩士研究領(lǐng)域:授予單位:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)答辯日期:二〇一五年五月三十一日英文縮略表英文縮寫英文全稱漢語(yǔ)名稱PAPseudomonasaeruginosa銅綠假單胞菌PCRPolymerasechainreaction聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)mlMilliliter毫升μlMicroliter微升minMinute分鐘sSe

4、cond秒hHour小時(shí)dNTPDeoxyribonucleosidetriphosphate脫氧核苷三磷酸LBLuria-BertanimediumLB培養(yǎng)基CFUColonyformunit菌落形成單位CACetrimideAgar十六烷三甲基溴化銨瓊脂STRStreptomycin鏈霉素NEONeomycin新霉素KANKanamycin卡那霉素GENGentamicin慶大霉素SPTSpectinomycin大觀霉素AMKAmikacin阿米卡星NORNorfloxacin諾氟沙星CIPCiproflo

5、xacin環(huán)丙沙星ENREnrofloxacin恩諾沙星OFLOfloxacin氧氟沙星GATGatifloxacin加替沙星LOFLevofloxacin鹽酸左氧氟沙星CROCeftriaxonesodium頭孢曲松鈉EFTCefotaximesodium頭孢噻肟PENPenicillin青霉素CECefradine頭孢拉定SCFCefoperaonesodiumandSulbactamsodium頭孢哌酮鈉舒巴坦鈉AMEAminoglycosidemodifyingenzymes氨基糖苷類修飾酶摘要銅綠假單

6、胞菌(Pseudomonasaeruginosa,PA)是一種常見的人畜共患機(jī)會(huì)致病菌,給人畜健康帶來(lái)巨大威脅。本研究自臨床分離PA51株,并對(duì)其耐藥表型、耐藥基因型、外毒素及動(dòng)物致病性進(jìn)行了檢測(cè)分析,以期為臨床銅綠假單胞菌病的研究提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。自河北及周邊地區(qū)2011年-2014年臨床發(fā)病的雞、豬體內(nèi)分離并純化,通過(guò)形態(tài)學(xué)及PCR技術(shù)進(jìn)行鑒定后,獲得PA野毒51株;采用Kirby-Bauer紙片擴(kuò)散法(K-B法)進(jìn)行3類17種抗菌藥的藥物敏感性試驗(yàn),結(jié)果均表現(xiàn)為多重耐藥性;對(duì)氨基糖苷類藥物鏈霉素、阿米卡星、卡

7、那霉素、新霉素、慶大霉素和大觀霉素的耐藥率依次為84.3%、84.3%、78.4%、78.4%、54.9%和25.2%;對(duì)喹諾酮類藥物氧氟沙星、恩諾沙星、鹽酸左氧、加替沙星、諾氟沙星和環(huán)丙沙星的耐藥率依次94.1%、82.4%、80.4%、78.4%、62.7%和25.2%;對(duì)β-內(nèi)酰胺類藥物頭孢拉定、青霉素、頭孢曲松鈉、頭孢噻肟、頭孢哌酮鈉/舒巴坦鈉的耐藥率依次98.0%、98.0%、70.6%、2.0%和0.0%。本文對(duì)51株P(guān)A分離株相應(yīng)的抗性基因進(jìn)行了PCR檢測(cè)。6種氨基糖苷類耐藥基因(AMEs)的檢測(cè)

8、結(jié)果顯示,ant(3′′)-Ia、aac(6′)-Ib、aac(3)-IIa、aph(3′′)-Ib(strA)、aph(6′)-Id(strB)、Aph(3′)-IIa的陽(yáng)性率由高到低依次為98.0%、51.0%、43.1%、41.2%、31.4%、17.6%;其中有1株為所測(cè)AMEs基因陰性,3株為6種基因全攜帶者;16SrRNA甲基化酶(armA、rmtA、rmtB)的檢測(cè)結(jié)果均

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