寧夏地區(qū)多重耐藥銅綠假單胞菌的臨床耐藥分布及耐藥研究

寧夏地區(qū)多重耐藥銅綠假單胞菌的臨床耐藥分布及耐藥研究

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1、分類號:R4單位代碼:10752密級:公開學(xué)號:20120136寧夏醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文寧夏地區(qū)多重耐藥銅綠假單胞菌的臨床耐藥分布及耐藥研究DistributionanddrugresistanceinNingxiaclinicalmultidrugresistantPseudomonasaeruginosa學(xué)位申請人:徐浩彤指導(dǎo)教師:賈偉申請學(xué)位類別:醫(yī)學(xué)專業(yè)領(lǐng)域名稱:臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)研究方向:臨床病原微生物與免疫學(xué)檢驗(yàn)所在學(xué)院:檢驗(yàn)學(xué)院論文完成日期:二○一五年三月寧夏醫(yī)科大學(xué)研究生院NingxiaMedicalUniversityThe

2、sisforApplicationofMaster’sDegreeDistributionanddrugresistanceinNingxiaclinicalmultidrugresistantPseudomonasaeruginosaStudent’sName:XuhaotongSupervisor:JiaweiSubjectCategory:MedicineMajor:ClinicalLaboratoryDiagnosticsSpecialty:ClinicalpathogenicmicroorganismandMolecularimmun

3、ologySchool:InstituteofClinicalLaboratoryCompletionDate:Mar.20153寧夏醫(yī)科大學(xué)研究生碩士學(xué)位論文中文摘要寧夏地區(qū)多重耐藥銅綠假單胞菌的臨床耐藥分布及耐藥研究摘要目的研究銅綠假單胞菌的臨床分布和抗菌藥物的耐藥性,從分子水平探討其產(chǎn)生多重耐藥的可能機(jī)制和感染的同源性,從而為有效地預(yù)防和控制多重耐藥銅綠假單胞菌感染提供科學(xué)的參考依據(jù)。方法1.收集并保存寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院自2011年9月至2012年9月期間臨床分離的非重復(fù)PA菌株285株,采用法國梅里埃公司全自動微生物分析儀(VITEK

4、2COMPACT)鑒定細(xì)菌;采用K-B法檢測PA臨床分離株對14種常用抗生素的藥物敏感試驗(yàn),應(yīng)用WHONET5.6軟件對上述藥物敏感結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,篩選出多重耐藥銅綠假單胞菌。2.將篩選出的124株MDRP菌株通過外排泵抑制劑利血平對羧芐西林、紅霉素、亞胺培南及慶大霉素的瓊脂稀釋法抑制試驗(yàn)分別檢測銅綠假單胞菌的MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM四種外排泵的表型,同時檢測加入利血平后四種藥物對銅綠假單胞菌MIC值的變化;應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)檢測外排泵基因。3.將篩選出的124株MDR

5、P菌株,通過PCR檢測整合酶基因,將IntⅠ檢測陽性菌株繼續(xù)采用PCR方法擴(kuò)增可變區(qū);采用PCR-RFLP分析并確定菌株可變區(qū)類型。4.應(yīng)用脈沖場凝膠電泳(PFGE)技術(shù)對多重耐藥銅綠假單胞菌進(jìn)行同源性分析。結(jié)果1.2011年9月至2012年9月我院共分離出285株銅綠假單胞菌,標(biāo)本的來源主要是痰液(65.5%),科室的分布主要集中在ICU(34.7%),耐藥結(jié)果顯示:臨床分離的銅綠假單胞菌對多粘菌素B敏感,對亞胺培南、頭孢他啶等耐藥率低,在臨床治療中可以選擇聯(lián)合用藥;篩選出的124株MDRP亦主要來自痰液(62.9%),主要分布在ICU(22

6、.6%)。2.外排泵表型陽性結(jié)果為:MexAB-OprM74株、MexXY-OprM28株、MexEF-OprN12株和寧夏醫(yī)科大學(xué)研究生碩士學(xué)位論文中文摘要MexCD-OprJ10株;124株MDRP菌株中74株MexAB-OprM外排泵表型陽性。3.檢測124株MDRP其中Ⅰ類整合子陽性菌株有87株,未檢測出Ⅱ類整合子;87株IntⅠ基因陽性的菌株中有53株有效的擴(kuò)增出Ⅰ類整合子可變區(qū),通過測序發(fā)現(xiàn)6種形式的耐藥基因盒。4.對124株MDRP進(jìn)行脈沖場凝膠電泳(PFGE)分析得到8個基因型,其中主要的有5個基因型。結(jié)論1.在臨床常用抗生素中

7、,銅綠假單胞菌臨床分離株對多粘菌素B最敏感,對復(fù)方新諾明的耐藥率最高。標(biāo)本來源主要是痰液,PA主要分布在ICU。2.四種外排泵表型中最常見的是MexAB-OprM,推測其可能是銅綠假單胞菌多重耐藥的重要機(jī)制。3.多重耐藥銅綠假單胞菌整合子的分布類型以Ⅰ類整合子為主,整合子中的氨基糖甙類修飾酶基因和β-內(nèi)酰胺類基因的存在與多藥耐藥銅綠假單胞菌的多重耐藥密切相關(guān)。4.在基因水平上通過PFGE對MDRP進(jìn)行分析,得出MDRP感染來源、傳播途徑及分布規(guī)律,對感染流行的監(jiān)測提供可靠依據(jù)。關(guān)鍵詞多藥耐藥銅綠假單胞菌,外排泵,利血平,Ⅰ類整合子,脈沖場凝膠電

8、泳寧夏醫(yī)科大學(xué)研究生碩士學(xué)位論文英文摘要DistributionanddrugresistanceinNingxiaclinicalmultidrug

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