甘薯冷誘導轉(zhuǎn)錄組測序及轉(zhuǎn)錄因子swdreb1b在抗冷調(diào)節(jié)中的作用

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1、‘'.社分類號_型_密級不保密UDC633全曰制碩王專業(yè)學位研究生學位論文甘馨冷誘導轉(zhuǎn)錄組測序及轉(zhuǎn)錄因子SwDREBlB在抗冷調(diào)節(jié)中的作用作者姓名:趙曉飛指導教師:楊虎清副教授專業(yè)學位名稱;農(nóng)業(yè)推廣碩±領(lǐng)域名稱:食品加工與安全研究方向:農(nóng)產(chǎn)品膽藏與保鮮所在學院:農(nóng)業(yè)與食品科學學院論巧日期:2015年12月21日浙江農(nóng)林大學2015年12月獨創(chuàng)性聲明本人聲明,所呈交的學位論文,是受浙江省自然科學基金項目(Y14C200052)""SCBF的,甘墓冷誘導轉(zhuǎn)錄因子p抗冷

2、特性研究資助,在指導教師指導下通過我的努力取得的成果,并且是自己撰寫的。盡我所知,除了文中作了標注和致謝中己經(jīng)作了答謝的地方外,論文中不包含其他人發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含在浙江一農(nóng)林大學或其他教育機構(gòu)獲得學位或證書而使用過的材料。與我同對本研究做出貢獻的同志,都在論文中作了明確的說明并表示了謝意。如被查有嚴重侵犯他人知識產(chǎn)權(quán)的行為,由本人承擔應有的責任。學位論文作者親筆簽名:義日期:V皮辜P.W論文使用授權(quán)的說明本人完全了解浙江農(nóng)林大學有關(guān)保留、使用學位論文的規(guī)定,即學校有權(quán)送交論文的復印件,允許論文被

3、查閱和借閱;學??晒颊撐牡娜炕虿糠謨?nèi)容,可W采用影印、縮印或其他復制手段保存論文。保密,在__年后解密可適用本授權(quán)書?!酰崳姴槐C?,本學位論文屬"于不"保密。0(請在方框內(nèi)打V)學位論文作者親筆簽名:曰期:來主巧_指導教師親筆簽名:卸考曰期:風?!牐玻崳奪hejiangA&FUniversityDissertationfortheDegreeofMasterTranscriptomeanalysisUnderColdStressandFunctionidentificationofSwDREB1Bincoldin

4、ductionfromsweetpotato(Ipomoeabataasa)Candidate:ZhaoXiao-feiAdviser:YangHu-qingAssociateprofessorSpecialty:FoodProcessandSecurityDateofSubmission:December21,2015ZhejiangA&FUniversityLin’an,zhejiangprovince,P.R.ChinaDecember,2015摘要摘要甘薯(Ipomoeabatatas(L.)Lam.)作為世界上第4大糧食作物,除了食用外

5、,還是重要的工業(yè)原料。甘薯喜溫怕冷,在貯藏過程中極易發(fā)生冷害。然而目前對甘薯冷害在分子水平的研究鮮有報道。本研究利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)獲得了塊根在低溫脅迫下的表達數(shù)據(jù)譜并對篩選出的甘薯DREB(SwDREB)家族基因進行了克隆、表達以及與抗氧化酶活性間的相關(guān)性做了研究,主要研究結(jié)果如下:(1)測序產(chǎn)生了8.25Gb的高質(zhì)量數(shù)據(jù),40.86Mb的cleanreads。組裝拼接后共獲得201,388條Transcripts和60,170條Unigenes;N50分別為2035bp、1455bp;平均長度分別為1352.32bp、781.90bp。(2)通

6、過與不同數(shù)據(jù)庫比對,共有34,168條Unigenes獲得了注釋信息,其中注釋到GO數(shù)據(jù)的有22,723條,7,437條Unigenes注釋到148條KEGG途徑。有16條Unigenes被注釋到DREB家族。26,002條Unigenes未獲得注釋,這其中可能有部分屬于甘薯特有基因。(3)低溫脅迫下,實驗組與對照組相比,共有4,470條差異表達基因,其中上條表達的Unigene有4,059條,下調(diào)表達的有411條。(4)利用PCR技術(shù)克隆得到了兩條DREB基因:SwDREB1B、SwDREB2。SwDREB1B的ORF全長為711bp,編碼23

7、7個氨基酸,無內(nèi)含子,含有一個AP2結(jié)構(gòu)域,氨基酸序列比對和系統(tǒng)進化樹分析該基因?qū)儆贒REB1類成員。SwDREB2基因ORF全長726bp,含有一個AP2結(jié)合域,含有典型的YRG和RAYD保守區(qū),序列比對和系統(tǒng)進化樹分析該基因?qū)儆贒REB2類。(5)利用qRT-PCR對SwDREB1B基因的組織特異性及低溫逆境誘導表達進行分析,結(jié)果表明:SwDREB1B在甘薯中均有表達,不具有組織特異性;低溫誘導上調(diào)表達;SwDREB1B在低溫下的表達與多種抗氧化酶的活性呈正相關(guān);在葉片和塊根中,CuZnSOD、APX、β-淀粉酶受低溫誘導表達,而CAT只在塊

8、根中被誘導。關(guān)鍵詞:甘薯;轉(zhuǎn)錄組測序;DREB/CBF轉(zhuǎn)錄因子;低溫脅迫;抗氧化酶IABSTRACTABSTRACTSweetpotat

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