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《正交實(shí)驗(yàn)法優(yōu)化紫草素的提取工藝 本科畢業(yè)論文》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、引言紫草系紫草科多年生草本植物紫草、新疆紫草或內(nèi)蒙古紫草的根。性苦寒無毒，入心肝經(jīng)，有涼血活血、清熱解毒、透疹的作用[1]。其主要有效成分為萘醌類紫草素[1]，其色澤鮮艷，無毒，無味，是食品、飲料、化妝品等理想的著色劑，也是紡織品理想的著色染料。目前，國內(nèi)外對紫草素的抗腫瘤作用研究較多，以天然紫草素化合物為原料，半合成了紫草素類衍生物。實(shí)驗(yàn)證明，其衍生物具有細(xì)胞毒作用和抗腫瘤作用。其作用機(jī)制研究表明，紫草素及其衍生物能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，激活促細(xì)胞分裂原激活蛋白激酶[2]，抑制蛋白酪氨酸激酶和DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶的活性，從而影響腫瘤細(xì)胞的代謝、增殖、分化、信號傳遞、基因表達(dá)等過程，阻礙腫瘤細(xì)胞的生
2、長。另外，紫草色素在醫(yī)藥、化妝品和印染工業(yè)中的多種功用也引起了國外學(xué)者的廣泛研究。紫草素有很強(qiáng)的抑菌作用，對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌等有明顯的抑制作用[3]。紫草是非常有開發(fā)利用價(jià)值的天然資源。本文通過正交實(shí)驗(yàn)法[4]研究紫草素的提取條件。為紫草素的廣泛應(yīng)用提供了參考依據(jù)。1實(shí)驗(yàn)材料1．1原料：呼和浩特市萬民大藥房所購買的紫草藥材1．2試劑：乙醇（95%）,蒸餾水1．3主要儀器：TU-1800PC紫外可見分光光度計(jì)（北京普析通用儀器設(shè)備廠）RE52-3旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海滬西分析儀器廠）OHAUS電子精密天平(OHAUS上海公司)廣口瓶圓底燒瓶2實(shí)驗(yàn)方法2．1 提取溶劑的選擇紫草中的有
3、效成分萘昆類色素多為酯類，脂溶性很強(qiáng)，能溶于石油醚、乙醇、苯等有機(jī)溶劑，因此這些有機(jī)溶劑在提取中作為浸提液被采用。從安全、經(jīng)濟(jì)以及浸提率上考慮，最終選定乙醇（95%）為浸提溶劑[5]?！?．2 紫草素的提取方法將紫草藥材剪碎，置于廣口瓶中，用95%乙醇溶劑浸泡紫草，做兩組平行實(shí)驗(yàn)。浸泡一段時(shí)間后，用雙層紗布過濾，得到提取液。2．3紫草素的定量檢測方法將上述所得提取液取0.2ml，用95%乙醇溶液定容至10ml，以95%乙醇溶液做空白，在紫草素最大吸收波長520nm處測定吸光度[6]。3 結(jié)果與討論3．1 浸提溫度對紫草素提取的影響據(jù)文獻(xiàn)[7]紫草素的變性溫度是70℃，所以選擇在20℃～70℃
4、范圍，在浸提時(shí)間24h和浸提比1:20的條件下，提取紫草素。在520nm處檢測紫草素含量來考察浸提溫度對提取紫草素的影響，結(jié)果見表1：表1浸提溫度對紫草素提取的影響由表1可知，在浸提時(shí)間24h和浸提比1:20的條件下，一定溫度范圍內(nèi)，隨著浸提溫度的升高，提取液的吸光度增加，40℃時(shí)達(dá)到最大值為0.694，溫度超過40℃吸光度開始降低，說明在一定的溫度范圍內(nèi)，升高溫度有利于紫草素的提??；但溫度過高可能導(dǎo)致紫草素穩(wěn)定性下降，使吸光度下降。所以本試驗(yàn)得出提取紫草素的適宜溫度為40℃。3．2浸提時(shí)間對紫草素提取的影響在浸提溫度40℃和浸提比1：20的條件下，提取紫草素。在520nm處檢測紫草素含量來
5、考察浸提時(shí)間對提取紫草素的影響，結(jié)果見表2：表2浸提時(shí)間對紫草素提取的影響 由表2可知，在浸提溫度40℃和浸提比1：20的條件下，隨著浸提時(shí)間的增加，提取液的吸光度增加，可見延長浸提時(shí)間有利于紫草素的提取，24h時(shí)吸光度達(dá)最大，最大值為0.631，所以提取紫草素的適宜時(shí)間為24h。3．3浸提比對紫草素提取的影響在浸提溫度40℃和浸提時(shí)間24h條件下提取紫草素，在520nm處檢測紫草素含量來考察浸提比對紫草素提取的影響，結(jié)果見表3：表3浸提比對紫草素提取的影響由表3可知，在浸提溫度40℃和浸提時(shí)間24h條件下，一定的浸提比范圍內(nèi)，隨著浸提比的增加，提取液的吸光度增加，在1：20吸光度達(dá)最大為
6、0.604，超過1：20吸光度開始降低，可能由于紫草素在1：20時(shí)已經(jīng)提取完全，隨著浸提比的增加，溶劑量也隨之增加，提取液的濃度降低,相應(yīng)的吸光度下降，由此可見提取紫草素適宜的浸提比為1：20。3．4正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)通過上述單因素試驗(yàn)可確定正交實(shí)驗(yàn)水平見表4：3．4．1因素水平的確定表4因素水平因素水平A浸提溫度℃B浸提時(shí)間/hC浸提比125121:17240241:20355361:233．4．2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析表3.4.2正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析試驗(yàn)號ABCabs11110.47921220.44531330.44142120.64452230.59162310.56373130.5248322
7、0.53193310.577T11.3651.6471.619T21.7981.5671.620T31.6321.5811.556K10.4550.5490.539K20.5990.5220.540K30.5440.5270.518R0.1440.0270.022從表中的平均值可見，提取紫草素適宜的溫度為40℃、時(shí)間12h、浸提比1：17和1：20。從經(jīng)濟(jì)效益的角度考慮，最終選定適宜的浸提比是1：17。從極差
