egb761對(duì)lps誘導(dǎo)thp-1細(xì)胞釋放hmgb1蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)

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1、分類號(hào)密級(jí)ＵＤＣ編號(hào)入？似著妍淨(jìng)碩去學(xué)位論文ＥＧｂ７６１對(duì)ＬＰＳ誘導(dǎo)ＴＨＰ－１細(xì)胞擇放ＨＭＧＢ１蛋白表終的巧節(jié)－－ＴｈｅｅｆｅｃｔｏｆＥＧｂ７６１ｎ化ｅＥｘｒｅｉｏｎｏｆｉｉ１ｏｐｓｓＨＭＧＢ１ｎＬＰＳｎｄｕｃｅｄＴＨＰ王義寧導(dǎo)?zhēng)熐擅犌芍偾桑牻淌冢崳妼＃牷桑犌汕蓪W(xué)培巧類型全日巧論文提交日期２０１５年４月２３日南方醫(yī)科大學(xué)２０１２級(jí)碩去學(xué)位論文ＥＧｂ７６１ＬＰＳＴＨＰ－Ｂ對(duì)誘導(dǎo)１細(xì)胞釋放ＨＭＧ１蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)Ｔｈｅｅ瓶ｃｔｏｆＥＧｂ７６１ｏｎｔｈｅＥｘｐｒｅｓｓｉ

2、ｏｎｏｆＨＭＧＢ１ｉｎ－ｎｄｕｃｅｄ－ＬＰＳｉＴＨＰ１課題來(lái)源導(dǎo)師指定學(xué)位申請(qǐng)人王義寧導(dǎo)師姓違陳仲清專業(yè)違稱麻醉學(xué)培養(yǎng)類型專業(yè)型培養(yǎng)層次碩壬研究生所在學(xué)院第一臨床醫(yī)學(xué)院答辯委貢會(huì)主席徐世元教授答辯委員會(huì)委員陳秉學(xué)教授余守章教授肖曉山教授屠偉峰教授２０１５年４月２３日廣州碩去學(xué)位論文ＥＧｂ７６１對(duì)ＬＰＳ誘導(dǎo)ＴＨＰ－１細(xì)胞釋ＨＭＧＢ１蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)碩±研究生：王義寧指導(dǎo)教師：陳仲清教授摘要一研究背景：在ＩＣＵ患者中腺毒癥為主要死亡原因之，總體死亡率大約為３０％－４０％

3、７０，而在老年患者或者伴隨有其他基礎(chǔ)疾病的患者中死亡率超過(guò)％。根據(jù)新的流行病學(xué)調(diào)查，在美國(guó)統(tǒng)計(jì)重癥脈毒癥的發(fā)病率大約為千分之Ｈ，大約＾半發(fā)生在ＩＣＵ病房＾外，４０％的腺毒癥病人死于醫(yī)院，旅毒癥休克死亡率最高，可達(dá)到５０％。國(guó)內(nèi)外相關(guān)學(xué)者在脈毒癥發(fā)病機(jī)制方面也開(kāi)展了大量的基碰實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)研究一，但是至今仍沒(méi)有達(dá)到個(gè)共識(shí)結(jié)論。傳統(tǒng)認(rèn)為過(guò)度的炎癥細(xì)胞和介質(zhì)激活是腺毒癥導(dǎo)致臟器損傷的主要原因，但是近期國(guó)內(nèi)外相關(guān)學(xué)者卻發(fā)現(xiàn)ＨＭＧＢ１蛋白是旅毒癥的晚期介質(zhì)，其中在大部分腺毒癥患者中會(huì)－－２升高。ＨＭＧＢ１由激活的免疫細(xì)胞合脫可與ＴＬＲ、ＴＬＲ４發(fā)生關(guān)聯(lián)，從而啟

4、動(dòng)與ＬＰＳ類似的炎癥反應(yīng)。ＨＭＧＢ１還會(huì)引起凝血因子和中性粒細(xì)胞的聚集，－與促炎細(xì)胞因子圧１等相比ＬＰＳ刺激ＨＭＧＢ１的釋放發(fā)生于相對(duì)較晩的階段。，盡管ＨＭＧＢ１在嚴(yán)重化毒癥患者中升高，但是其對(duì)賊毒癥的預(yù)后并沒(méi)有預(yù)測(cè)意義。向?qū)嶒?yàn)小鼠注射ＨＭＧＢ１是致命的，而用ＨＭＧＢ１抗體對(duì)內(nèi)毒素和盲腸結(jié)一扎穿孔小鼠具有定治療作用，因此推斷ＨＭＢＧ１可能是化毒癥治療的新祀點(diǎn)。中藥銀杏葉提取物ｅｘｔｒａｃｔｏｆＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａ，ＥＧｂ７６１是從銀杏葉中提取的天（）然活性物質(zhì)，其中主要有效成分為黃爾糖巧類２４％和茹帰肉醋類巧％）正Ｇｂ７６１（）也是一類純天然抗

5、氧化劑調(diào)節(jié)多種抗氧化酶活性具有抗炎、抗癌、抗衰老、抑，，ｂ７６－制血小板聚集等多種藥理活性。也有研究表明ＥＧ１對(duì)早期炎癥因子比１３、（Ｉ摘要一－６－化、ＴＮＦａ的有定的抑制作用，國(guó)外有文獻(xiàn)報(bào)道ＥＧｂ７６１能夠減輕ＬＰＳ誘導(dǎo)的急性肺損傷，但目前國(guó)內(nèi)外尚未有ＥＧｂ７６１對(duì)ＨＭＧＢ１蛋白影響的研究。ＴＨＰ－１ＥＧｂ７６１對(duì)ＬＰＳ目的：本實(shí)驗(yàn)通過(guò)體外培養(yǎng)細(xì)胞，觀察銀杏葉提取物一－誘導(dǎo)ＴＨＰ１細(xì)胞釋放ＨＭＧＢ１蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)。為進(jìn)步實(shí)驗(yàn)及Ｗ后臨床運(yùn)用提供可行的依據(jù)。材料與方法：１．實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及分組－１．１ＴＨＰ１細(xì)胞的培養(yǎng)＇ｌＯＯＯ、ｒ／

6、ｍｉ２０％陽(yáng)Ｓ將分離的細(xì)胞收入離。管化ｉｎ，離屯ｌＯｍｎ棄上猜用含６２－的ＲＰＭ１６４０１１０ｌＫｘｌ０／ｃｍ入培養(yǎng)Ｉ培養(yǎng)液混勻細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度至（），種°皿３７Ｃ＾－，５％條Ｃ文后根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)情況每２３日換液，在件下化培養(yǎng)；次日換液，１次。－＝１．２將生長(zhǎng)良好的ＴＨＰ１隨機(jī)分為５組〇１３。）－＋ＥＧｂ７６／ｌ＋ＬＰＳｌｌＷ炎性因子檢測(cè)組：ＴＨＰｌ１５０帖ｍ帖／ｍ（）（）２ＮＦ－ＴＨＰ－ｌ＋ＥＧｂ７６ｋＢ的１５０／ｍｌ＋ＬＰＳｌ／ｍｌ（制七檢測(cè)組；腿（帖）（））３－不同時(shí)間點(diǎn)ＨＭＧＢ：ＴＨＰ１＋ＬＰＳ１／ｍｌ（１蛋白檢測(cè)組帖）（）ｂ７

7、６－４不同濃度ＥＧ１對(duì)ＨＭＧＢ１影響檢測(cè)組：ＴＨＰｌ＋ＥＧｂ７６１０／ｍｌ、１００（）口帖ｉ／ｍＫ１５０ｉ／ｍｌ＋ＬＰＳｌｊ，／ｍｌ｜ｇ｜ｇ）（｜ｇ）５ＨＭＧＢ－１核轉(zhuǎn)：ＴＨＰ１＋ＥＧｂ７６１〇／ｍ＋ＬＰＳ１ｍ（）位組ｎｇｌ帖／ｌ）口）（２．觀察指標(biāo)２１＾５八－－－．１￡檢測(cè)炎性因子止１３、忙６、腳［〇１的表達(dá)｜ＴＨＰ－１２４將稀釋均勻的細(xì)胞培養(yǎng)于孔板中，每孔加入細(xì)胞懸浮液１ｍｌ及濃度５０化／ｍｌＥＧｂ７６１預(yù)處理２ｈ后用濃度為